Diphtheria Ab elisa酶(mei)聯(lian)免(mian)疫(yi)試劑(ji)盒樣(yang)本(ben)處理及(ji)要求(qiu):
1. 血(xue)清(qing):室溫血(xue)液自然(ran)凝(ning)固10-20分鐘(zhong),離(li)心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細收(shou)集(ji)上清,保存過程(cheng)中如(ru)出(chu)現沈(chen)澱(dian),應(ying)再(zai)次(ci)離心。
2. 血(xue)漿(jiang):應(ying)根據(ju)標本(ben)的(de)要(yao)求(qiu)選(xuan)擇(ze)EDTA或檸(ning)檬(meng)酸(suan)鈉作為(wei)抗(kang)凝(ning)劑(ji),混合(he)10-20分(fen)鐘(zhong)後(hou),離(li)心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細收(shou)集(ji)上清,保存過程(cheng)中如(ru)有(you)沈(chen)澱(dian)形成,應(ying)該(gai)再次(ci)離心。
3. 尿液:用(yong)無菌(jun)管收集(ji),離(li)心20分鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細收(shou)集(ji)上清,保存過程(cheng)中如(ru)有(you)沈(chen)澱(dian)形成,應(ying)再(zai)次(ci)離心。胸(xiong)腹水(shui)、腦脊(ji)液參照實行(xing)。
4. 細胞(bao)培(pei)養上清:檢測(ce)分泌性的(de)成(cheng)份(fen)時(shi),用(yong)無菌(jun)管收集(ji)。離(li)心20分鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細收(shou)集(ji)上清。檢測(ce)細胞(bao)內的(de)成(cheng)份(fen)時(shi),用(yong)PBS(PH7.2-7.4)稀(xi)釋(shi)細胞(bao)懸(xuan)液,細胞(bao)濃度(du)達(da)到(dao)
100萬(wan)/ml左(zuo)右。通(tong)過反復(fu)凍(dong)融,以(yi)使(shi)細胞(bao)破壞並(bing)放(fang)出(chu)細胞(bao)內成份(fen)。離心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細收(shou)集(ji)上清。保存過程(cheng)中如(ru)有(you)沈(chen)澱(dian)形成,應(ying)再(zai)次(ci)離心。
5. 組織標本(ben):切(qie)割標本(ben)後(hou),稱(cheng)取(qu)重量(liang)。加(jia)入壹定(ding)量(liang)的(de)PBS,PH7.4。用(yong)液氮迅(xun)速(su)冷(leng)凍(dong)保存備用(yong)。標本(ben)融化(hua)後(hou)仍(reng)然(ran)保持(chi)2-8℃的(de)溫度(du)。加(jia)入壹定(ding)量(liang)的(de)PBS(PH7.4),用(yong)手(shou)工(gong)或(huo)勻漿器(qi)將(jiang)標本(ben)勻漿充(chong)分。離心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細收(shou)集(ji)上清。分(fen)裝(zhuang)後(hou)壹份待檢測(ce),其(qi)余冷(leng)凍(dong)備用(yong)。
6. 標本(ben)采(cai)集(ji)後(hou)盡(jin)早(zao)進行(xing)提取(qu),提取(qu)按相(xiang)關文獻進行(xing),提取(qu)後(hou)應(ying)盡(jin)快進行(xing)實驗(yan)。若(ruo)不(bu)能(neng)馬(ma)上進行(xing)試驗(yan),可將(jiang)標本(ben)放(fang)於(yu)-20℃保存,但應(ying)避(bi)免(mian)反復(fu)凍(dong)融.
7. 不(bu)能(neng)檢測(ce)含NaN3的(de)樣(yang)品(pin),因(yin)NaN3抑制辣(la)根過氧化(hua)物(wu)酶(mei)的(de)(HRP)活(huo)性。
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