人(ren)結(jie)蛋(dan)白(bai)ELISA試劑(ji)盒(he)​樣本(ben)處理(li)及(ji)要求

人(ren)結(jie)蛋(dan)白(bai)ELISA試劑(ji)盒(he)樣(yang)本處理(li)及(ji)要求：

1. 血(xue)清(qing)：室(shi)溫(wen)血液(ye)自然(ran)凝固(gu)10-20分(fen)鐘，離(li)心(xin)20分(fen)鐘左右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)）。仔(zai)細(xi)收集上清(qing)，保(bao)存(cun)過(guo)程中如出(chu)現沈澱，應再次離(li)心(xin)。

2. 血(xue)漿(jiang)：應(ying)根據(ju)標(biao)本(ben)的要求(qiu)選擇(ze)EDTA或檸(ning)檬酸(suan)鈉(na)作(zuo)為抗(kang)凝劑(ji)，混合10-20分(fen)鐘後，離(li)心(xin)20分(fen)鐘左右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)）。仔(zai)細(xi)收集上清(qing)，保(bao)存(cun)過(guo)程中如有沈澱形成，應該(gai)再(zai)次離(li)心(xin)。

3. 尿(niao)液(ye)：用(yong)無(wu)菌管收集，離(li)心(xin)20分(fen)鐘左右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)）。仔(zai)細(xi)收集上清(qing)，保(bao)存(cun)過(guo)程中如有沈澱形成，應再(zai)次離(li)心(xin)。胸腹(fu)水(shui)、腦(nao)脊(ji)液參照實行。

4. 細(xi)胞培養上(shang)清(qing)：檢測分(fen)泌(mi)性(xing)的成份時(shi)，用無(wu)菌管收集。離(li)心(xin)20分(fen)鐘左右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)）。仔(zai)細(xi)收集上清(qing)。檢測細(xi)胞(bao)內的成份時(shi)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞(bao)懸(xuan)液，細(xi)胞濃度達(da)到100萬/ml左右(you)。通(tong)過(guo)反(fan)復(fu)凍融(rong)，以使細胞(bao)破壞並(bing)放出(chu)細胞(bao)內成份。離(li)心(xin)20分(fen)鐘左右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)）。仔(zai)細(xi)收集上清(qing)。保(bao)存(cun)過(guo)程中如有沈澱形成，應再(zai)次離(li)心(xin)。

5. 組織(zhi)標(biao)本(ben)：切割標(biao)本(ben)後(hou)，稱(cheng)取重量。加(jia)入(ru)壹定(ding)量(liang)的PBS，PH7.4。用液(ye)氮迅(xun)速冷(leng)凍保(bao)存(cun)備用(yong)。標(biao)本(ben)融(rong)化後(hou)仍然(ran)保(bao)持2-8℃的溫度。加(jia)入(ru)壹定(ding)量(liang)的PBS（PH7.4），用手(shou)工(gong)或(huo)勻(yun)漿(jiang)器(qi)將(jiang)標(biao)本(ben)勻(yun)漿(jiang)充分(fen)。離(li)心(xin)20分(fen)鐘左右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)）。仔(zai)細(xi)收集上清(qing)。分(fen)裝(zhuang)後壹份(fen)待(dai)檢測，其(qi)余(yu)冷(leng)凍備用(yong)。

6. 標(biao)本(ben)采集後盡早進行提(ti)取，提(ti)取按相關文(wen)獻(xian)進行，提(ti)取後(hou)應盡快進行實驗(yan)。若不(bu)能馬(ma)上(shang)進行試驗(yan)，可(ke)將(jiang)標(biao)本(ben)放(fang)於-20℃保(bao)存(cun)，但(dan)應(ying)避(bi)免反(fan)復(fu)凍融(rong).

7. 不(bu)能檢(jian)測含(han)NaN3的樣品(pin)，因NaN3抑制辣(la)根過(guo)氧化物(wu)酶(mei)的（HRP）活(huo)性(xing)。