谷研試(shi)劑(ji)-96T人(ren)神(shen)經(jing)球(qiu)蛋白ELISA 檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

谷研試(shi)劑(ji)-96T人(ren)神(shen)經(jing)球(qiu)蛋白ELISA 檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

人(ren)神(shen)經(jing)球(qiu)蛋白ELISA 檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

本試劑(ji)僅供研究(jiu)使用      標(biao)本：血清或血漿

試(shi)驗原(yuan)理(li)：
　　　　NGB試劑(ji)盒是(shi)固(gu)相夾心(xin)法(fa)酶(mei)聯免疫(yi)吸附實驗（ELISA）.已(yi)知(zhi)NGB濃(nong)度(du)的(de)標(biao)準品、未知(zhi)濃度(du)的(de)樣品加(jia)入(ru)微孔酶(mei)標(biao)板內進(jin)行(xing)檢(jian)測(ce)。先將NGB和(he)標(biao)記的(de)抗體同(tong)時(shi)溫育。洗(xi)滌後(hou)，加(jia)入(ru)親和(he)素標(biao)記過(guo)的(de)HRP。再經(jing)過(guo)溫育和(he)洗(xi)滌，去(qu)除未結合(he)的(de)酶結(jie)合(he)物，然(ran)後(hou)加(jia)入(ru)底物A、B，和(he)酶結(jie)合物同(tong)時(shi)作用(yong)。產生(sheng)顏(yan)色(se)。顏(yan)色(se)的(de)深淺(qian)和(he)樣品中NGB的(de)濃度(du)呈比(bi)例(li)關(guan)系(xi)。

安(an)全性(xing)
避(bi)免直(zhi)接(jie)接觸終(zhong)止(zhi)液(ye)和(he)底物A、B。壹旦接觸到(dao)這些(xie)液(ye)體，請盡快(kuai)用(yong)水沖(chong)洗(xi)。
實驗中(zhong)不要吃(chi)喝(he)、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴(zui)吸取(qu)試(shi)劑(ji)盒裏的(de)任何成份(fen)。

人(ren)神(shen)經(jing)球(qiu)蛋白ELISA 檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

操作註(zhu)意事項
試(shi)劑(ji)應按(an)標(biao)簽(qian)說明(ming)書(shu)儲(chu)存，使用前恢復到(dao)室溫。稀稀過(guo)後(hou)的(de)標(biao)準品應丟(diu)棄，不可(ke)保(bao)存。
實驗中(zhong)不用(yong)的(de)板條應(ying)立即(ji)放(fang)回包(bao)裝袋(dai)中(zhong)，密封(feng)保(bao)存，以免變(bian)質(zhi)。
不用(yong)的(de)其它試劑(ji)應包(bao)裝好(hao)或蓋(gai)好(hao)。不同(tong)批號(hao)的(de)試劑(ji)不要混用。保(bao)質(zhi)前(qian)使用。
使用壹次性(xing)的(de)吸頭(tou)以(yi)免交叉(cha)汙染(ran)，吸(xi)取(qu)終(zhong)止(zhi)液(ye)和(he)底物A、B液時(shi)，避(bi)免使用帶金屬(shu)部分(fen)的(de)加(jia)樣器。
使用幹凈(jing)的(de)塑料容器配置洗(xi)滌液(ye)。使用前充(chong)分(fen)混勻(yun)試劑(ji)盒裏的(de)各種成份(fen)及樣品。
洗(xi)滌酶(mei)標(biao)板時(shi)應(ying)充(chong)分(fen)拍幹，不要將吸水紙(zhi)直(zhi)接(jie)放入酶標(biao)反應(ying)孔中(zhong)吸(xi)水。
底物A應揮(hui)發，避免長(chang)時(shi)間打(da)開(kai)蓋(gai)子(zi)。底物B對光敏感(gan)，避(bi)免長(chang)時(shi)間暴(bao)露於光下。避(bi)免用手接觸，有毒(du)。實(shi)驗完(wan)成後(hou)應(ying)立(li)即(ji)讀(du)取OD值(zhi)。
加(jia)入(ru)試劑(ji)的(de)順(shun)序應壹(yi)致，以保(bao)證(zheng)所(suo)有反應(ying)板孔溫育的(de)時(shi)間壹樣。
按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)中(zhong)標(biao)明(ming)的(de)時(shi)間、加(jia)液(ye)的(de)量及順(shun)序進行(xing)溫育操(cao)作。

樣品收集(ji)、處(chu)理(li)及保(bao)存方(fang)法(fa)
血清-----操(cao)作過(guo)程(cheng)中(zhong)避免任何細胞(bao)刺激。使用不含(han)熱(re)原和(he)內毒(du)素的(de)試管(guan)。收(shou)集(ji)血液後(hou)，000×g離(li)心0分(fen)鐘將(jiang)血清和(he)紅(hong)細(xi)胞(bao)迅速(su)小心地分離(li)。
血漿-----EDTA、檸(ning)檬酸(suan)鹽(yan)、肝(gan)素血漿可(ke)用於(yu)檢(jian)測(ce)。000×g離(li)心30分(fen)鐘去(qu)除(chu)顆(ke)粒。
細胞(bao)上清(qing)液(ye)---000×g離(li)心0分(fen)鐘去(qu)除(chu)顆(ke)粒和(he)聚合(he)物。
組織勻(yun)漿-----將組(zu)織加(jia)入(ru)適(shi)量生(sheng)理(li)鹽(yan)水搗碎。000×g離(li)心0分(fen)鐘，取(qu)上清(qing)液(ye)
保(bao)存------如果(guo)樣品不立(li)即(ji)使用，應將其分成小(xiao)部分(fen)-70 ℃保(bao)存，避免反復冷凍。盡可(ke)能的(de)不要使用溶血或高(gao)血脂血。如果(guo)血清中(zhong)大量顆(ke)粒，檢(jian)測(ce)前(qian)先離(li)心或過(guo)濾。不要在37℃或更高的(de)溫度(du)加(jia)熱(re)解凍。應在室溫下解(jie)凍並確保(bao)樣品均勻(yun)地充(chong)分(fen)解(jie)凍。

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操作步(bu)驟
使用前，將所(suo)有試(shi)劑(ji)充(chong)分(fen)混勻(yun)。不要使液體產生(sheng)大(da)量的(de)泡(pao)沫(mo)，以(yi)免加(jia)樣時(shi)加(jia)入(ru)大量的(de)氣(qi)泡(pao)，產生(sheng)加(jia)樣上的(de)誤(wu)差。
根據待測(ce)樣品數(shu)量加(jia)上標(biao)準品的(de)數(shu)量決(jue)定所(suo)需的(de)板條數(shu)。每(mei)個(ge)標(biao)準品和(he)空白(bai)孔建(jian)議做(zuo)復孔。每(mei)個(ge)樣品根據自己的(de)數(shu)量來(lai)定，能(neng)使用復孔的(de)盡量做(zuo)復孔。標(biao)本用標(biao)本稀釋(shi)液：稀釋(shi)後(hou)加(jia)入(ru)50ul於反應(ying)孔內(nei)。
加(jia)入(ru)稀釋(shi)好(hao)後(hou)的(de)標(biao)準品50ul於反應(ying)孔、加(jia)入(ru)待測(ce)樣品50ul於反應(ying)孔內(nei)。立(li)即(ji)加(jia)入(ru)50ul的(de)標(biao)記的(de)抗體。蓋上膜(mo)板，輕(qing)輕(qing)振蕩(dang)混勻(yun)，37℃溫育小(xiao)時(shi)。
甩(shuai)去孔內(nei)液(ye)體，每(mei)孔加(jia)滿洗(xi)滌液(ye)，振蕩(dang)30秒，甩(shuai)去(qu)洗(xi)滌液(ye)，用吸水紙(zhi)拍幹。重(zhong)復此操(cao)作3次(ci)。如果(guo)用洗(xi)板機(ji)洗(xi)滌，洗(xi)滌次(ci)數(shu)增加(jia)壹(yi)次。
每(mei)孔加(jia)入(ru)80ul的(de)親和(he)鏈酶(mei)素-HRP，輕(qing)輕(qing)振蕩(dang)混勻(yun)，37℃溫育30分(fen)鐘。
甩(shuai)去(qu)孔內(nei)液(ye)體，每(mei)孔加(jia)滿洗(xi)滌液(ye)，振蕩(dang)30秒，甩(shuai)去(qu)洗(xi)滌液(ye)，用吸水紙(zhi)拍幹。重(zhong)復此操(cao)作3次(ci)。如果(guo)用洗(xi)板機(ji)洗(xi)滌，洗(xi)滌次(ci)數(shu)增加(jia)壹(yi)次。
每(mei)孔加(jia)入(ru)底物A、B各50ul，輕(qing)輕(qing)振蕩(dang)混勻(yun)，37℃溫育0分(fen)鐘。避(bi)免光照(zhao)。
取(qu)出酶標(biao)板，迅速(su)加(jia)入(ru)50ul終(zhong)止(zhi)液(ye)，加(jia)入(ru)終(zhong)止(zhi)液(ye)後(hou)應(ying)立(li)即(ji)測(ce)定(ding)結(jie)果(guo)。
在450nm波(bo)長(chang)處(chu)測(ce)定(ding)各孔的(de)OD值(zhi)。

6號(hao)標(biao)準品以上的(de)結果(guo)為非(fei)線(xian)性(xing)的(de)，根據此標(biao)準曲(qu)線(xian)無(wu)法(fa)得到(dao)的(de)結果(guo)。

試劑(ji)盒性(xing)能(neng)
. 靈敏度(du)：zui小的(de)檢(jian)測(ce)濃(nong)度(du)小於(yu)號(hao)標(biao)準品。稀釋(shi)度(du)的(de)線(xian)性(xing)。樣品線(xian)性(xing)回歸(gui)與(yu)預(yu)期(qi)濃度(du)相關(guan)系(xi)數(shu)R值(zhi)為0.990。
2. 特(te)異(yi)性(xing)：不與(yu)其它細胞(bao)因(yin)子反應(ying)。
3. 重(zhong)復性(xing)：板內、板間變(bian)異(yi)系數(shu)均小(xiao)於(yu)0%。

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結 果(guo) 判 斷(duan) 與(yu) 分(fen) 析(xi)
、儀(yi)器值(zhi)：於波長(chang)450nm的(de)酶標(biao)儀(yi)上讀(du)取(qu)各孔的(de)OD值(zhi)

2、以吸光(guang)度(du)OD值(zhi)為縱(zong)坐(zuo)標(biao)（Y），相應(ying)的(de)NGB標(biao)準品濃度(du)為橫坐(zuo)標(biao)（X），做(zuo)得相應的(de)曲線(xian)，樣品的(de)NGB含量可(ke)根據其OD值(zhi)由標(biao)準曲(qu)線(xian)換算(suan)出(chu)相應的(de)濃度(du)。

3、檢(jian)測(ce)值(zhi)範圍：0-200ng/ml

4、敏感度(du)： 0. ng/ml
Recombinant Human Thrombopoietin （ rHuTPO ） 重組(zu)人(ren)血小板生(sheng)成素(su) 2ug
Recombinant Human Thymic Stromal Lymphopoietin （ rHu TSLP ） 重(zhong)組人(ren)胸腺基質(zhi)淋(lin)巴(ba)生(sheng)成素(su) 2ug
Recombinant Human Pigment Epithelium-derived Factor（ rHuPEDF ） 重(zhong)組人(ren)色(se)素(su)上皮(pi)細(xi)胞(bao)衍生(sheng)因(yin)子 5ug
Recombinant Human Tumor Necrosis Factor-alpha （ rHuTNF-α） 重(zhong)組(zu)人(ren)腫(zhong)瘤(liu)壞(huai)死(si)因(yin)子α 0ug
Recombinant Human B Cell Activating Factor （ rHuBLys ） 重(zhong)組(zu)人(ren)B淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)刺激因(yin)子 5ug
Recombinant Human BAFF Receptor（rHuBAFF-R） 重(zhong)組(zu)人(ren)B淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)刺激因(yin)子-受體 0ug
Recombinant Human Flt-3 Ligand （rHuFlt-3L） 重組(zu)人(ren)Flt3配(pei)體 2ug
Recombinant Human soluble CD40 Ligand （rHusCD40L） 重組(zu)人(ren)可(ke)溶性(xing)CD40配(pei)體 0ug
Recombinant Human Oncostatin M（rHuOSM） 重組(zu)人(ren)腫(zhong)瘤(liu)抑(yi)制(zhi)素 2ug
Recombinant Human Angiostatin K-3 （ rHuAngiostatin ） 重組人(ren)血管生(sheng)成抑(yi)制(zhi)素 0ug