人(ren)去(qu)氫血栓(shuan)烷B2（-DH-TXB2）試(shi)劑(ji)盒(he)分(fen)析

人(ren)去(qu)氫血栓(shuan)烷B2（-DH-TXB2）試(shi)劑(ji)盒(he)分(fen)析

本試(shi)劑(ji)盒(he)僅(jin)供(gong)研究使用(yong)。

檢(jian)測範(fan)圍：96T
20pg/ml-480pg/ml 

使用(yong)目(mu)的(de)：本(ben)人(ren)去(qu)氫血栓(shuan)烷-DH-TXB2試(shi)劑(ji)盒(he)用(yong)於(yu)測(ce)定人(ren)血清(qing)、血漿(jiang)及相(xiang)關(guan)液體樣本中(zhong)去(qu)氫血栓(shuan)烷B2（-DH-TXB2）含(han)量。

實(shi)驗原理
本試(shi)劑(ji)盒(he)應(ying)用(yong)雙抗(kang)體夾(jia)心(xin)法測定標本中(zhong)人(ren)去(qu)氫血栓(shuan)烷-DH-TXB2水平。用(yong)純(chun)化(hua)的(de)人(ren)去(qu)氫血栓(shuan)烷B2（-DH-TXB2）抗(kang)體包(bao)被(bei)微(wei)孔(kong)板，制成固(gu)相抗(kang)體，往(wang)包(bao)被(bei)單抗(kang)的微(wei)孔(kong)中(zhong)依(yi)次(ci)加(jia)入(ru)去(qu)氫血栓(shuan)烷B2（-DH-TXB2），再與(yu)HRP標記的去(qu)氫血栓(shuan)烷B2（-DH-TXB2）抗(kang)體結(jie)合(he)，形成抗(kang)體-抗(kang)原-酶(mei)標抗(kang)體復合物，經過(guo)*洗(xi)滌(di)後加(jia)底(di)物TMB顯色(se)。TMB在HRP酶的催(cui)化(hua)下(xia)轉化(hua)成藍色，並(bing)在酸的作(zuo)用(yong)下(xia)轉化(hua)成zui終(zhong)的黃(huang)色。顏(yan)色(se)的(de)深(shen)淺和樣品(pin)中(zhong)的(de)去(qu)氫血栓(shuan)烷B2（-DH-TXB2）呈(cheng)正(zheng)相(xiang)關(guan)。用酶(mei)標儀在450nm波長(chang)下測(ce)定吸光(guang)度(du)（OD值），通(tong)過(guo)標準曲(qu)線(xian)計算樣品(pin)中(zhong)人(ren)去(qu)氫血栓(shuan)烷B2（-DH-TXB2）濃(nong)度。

試(shi)劑盒(he)組成

標本要(yao)求(qiu)

．標本采集後(hou)盡(jin)早(zao)進行提(ti)取，提(ti)取按相關(guan)文獻(xian)進行，提(ti)取後應(ying)盡(jin)快進行實(shi)驗。若不能馬上進行試(shi)驗，可(ke)將標本放於(yu)-20℃保(bao)存，但(dan)應(ying)避免(mian)反復凍融(rong)

2．不能檢測(ce)含(han)NaN3的樣品(pin)，因(yin)NaN3抑(yi)制辣(la)根(gen)過(guo)氧化(hua)物酶(mei)的(de)（HRP）活(huo)性。

操作(zuo)步(bu)驟

.標準品(pin)的(de)稀釋：本(ben)人(ren)去(qu)氫血栓(shuan)烷-DH-TXB2試(shi)劑(ji)盒(he)提(ti)供(gong)原倍標準品(pin)壹(yi)支(zhi)，用(yong)戶(hu)可(ke)按照(zhao)下(xia)列(lie)圖表(biao)在小(xiao)試(shi)管中(zhong)進行稀釋。

2.加樣：分別設空白(bai)孔(kong)（空(kong)白對照(zhao)孔(kong)不加(jia)樣品(pin)及酶(mei)標試劑，其余(yu)各步(bu)操作(zuo)相(xiang)同(tong)）、標準孔(kong)、待(dai)測樣品(pin)孔(kong)。在酶標包被(bei)板上標準品(pin)準(zhun)確(que)加樣50μl，待測(ce)樣品(pin)孔(kong)中(zhong)先(xian)加樣品(pin)稀釋液40μl，然後再加待(dai)測樣品(pin)0μl（樣品(pin)zui終(zhong)稀釋度(du)為5倍）。加(jia)樣將樣品(pin)加(jia)於(yu)酶(mei)標板孔(kong)底(di)部(bu)，盡量不觸(chu)及孔(kong)壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃動混勻。

3.溫育(yu)：用封板膜封(feng)板後置37℃溫育(yu)30分鐘。  

4.配液：將30倍濃(nong)縮洗(xi)滌(di)液用蒸餾水30倍稀釋後(hou)備用(yong)

5.洗滌(di)：小(xiao)心(xin)揭(jie)掉(diao)封(feng)板膜，棄(qi)去(qu)液體，甩幹，每孔(kong)加(jia)滿洗滌(di)液，靜置30秒後(hou)棄(qi)去(qu)，如(ru)此(ci)重(zhong)復5次，拍幹(gan)。

6.加酶：每孔(kong)加(jia)入酶標試劑50μl，空白(bai)孔(kong)除外。

7.溫育(yu)：操作(zuo)同(tong)3。

8.洗(xi)滌(di)：操作(zuo)同(tong)5。

9.顯色(se)：每孔(kong)先(xian)加入顯色(se)劑(ji)A50μl，再加入(ru)顯色(se)劑(ji)B50μl，輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)，37℃避光(guang)顯色(se)5分(fen)鐘.

0.終(zhong)止(zhi)：每孔(kong)加(jia)終止(zhi)液50μl，終止(zhi)反(fan)應(ying)（此(ci)時藍色立(li)轉黃(huang)色）。

.測(ce)定：以空白(bai)空(kong)調(tiao)零，450nm波長(chang)依序(xu)測量各(ge)孔(kong)的(de)吸光(guang)度(du)（OD值）。 測定應(ying)在加終止(zhi)液後5分鐘以內(nei)進行。

計算
以標準物的(de)濃(nong)度為(wei)橫坐(zuo)標，OD值為縱(zong)坐(zuo)標，在坐標紙(zhi)上繪出標準曲(qu)線(xian)，根(gen)據(ju)樣品(pin)的(de)OD值由(you)標準曲(qu)線(xian)查出相應(ying)的(de)濃(nong)度；再乘以稀釋倍數(shu)；或用(yong)標準物的(de)濃(nong)度與(yu)OD值計算出標準曲(qu)線(xian)的(de)直(zhi)線(xian)回(hui)歸(gui)方(fang)程式(shi)，將(jiang)樣品(pin)的(de)OD值代入(ru)方(fang)程式(shi)，計算出樣品(pin)濃(nong)度，再乘以稀釋倍數(shu)，即為(wei)樣品(pin)的(de)實(shi)際(ji)濃(nong)度。

註(zhu)意事(shi)項

．人(ren)去(qu)氫血栓(shuan)烷-DH-TXB2試(shi)劑(ji)盒(he)從(cong)冷(leng)藏(zang)環境(jing)中(zhong)取(qu)出應(ying)在室(shi)溫平衡(heng)5-30分鐘(zhong)後方(fang)可(ke)使用(yong)，酶(mei)標包被(bei)板開封(feng)後如(ru)未(wei)用(yong)完(wan)，板條(tiao)應(ying)裝(zhuang)入密封袋中(zhong)保(bao)存。

2．濃(nong)洗滌(di)液可(ke)能會有(you)結晶(jing)析出，稀釋時(shi)可(ke)在水浴中(zhong)加(jia)溫助(zhu)溶，洗滌(di)時不影響(xiang)結果(guo)。

3．各(ge)步(bu)加樣均應(ying)使用(yong)加(jia)樣器，並(bing)經常校(xiao)對其準(zhun)確(que)性，以避免(mian)試驗誤差(cha)。壹(yi)次(ci)加(jia)樣時間(jian)控制在5分鐘內(nei)，如(ru)標本數量多(duo)，使用(yong)排槍加樣。

4．請每次測定的同(tong)時做(zuo)標準曲(qu)線(xian)，做(zuo)復孔(kong)。如(ru)標本中(zhong)待(dai)測(ce)物質(zhi)含(han)量過(guo)高(gao)（樣本OD值大於(yu)標準品(pin)孔(kong)*孔(kong)的(de)OD值），請先(xian)用樣品(pin)稀釋液稀釋壹(yi)定倍數(shu)（n倍）後(hou)再測定，計算時請zui後乘(cheng)以總稀釋倍數(shu)（×n×5）。

5．封板膜只(zhi)限壹(yi)次(ci)性使用(yong)，以避免(mian)交叉(cha)汙(wu)染。

6．底(di)物請(qing)避光(guang)保(bao)存。

7．嚴格按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)的(de)操作(zuo)進行，試(shi)驗結(jie)果(guo)判(pan)定必須以酶標儀讀數(shu)為(wei)準(zhun).

8．所(suo)有(you)樣品(pin)，洗(xi)滌(di)液和各(ge)種(zhong)廢(fei)棄物都(dou)應(ying)按(an)傳染物處(chu)理。

9．本試(shi)劑(ji)不同(tong)批(pi)號(hao)組分(fen)不得(de)混(hun)用。

0.如(ru)與(yu)英(ying)文說(shuo)明(ming)書(shu)有(you)異，以英文說(shuo)明(ming)書(shu)為(wei)準。

保(bao)存條(tiao)件(jian)及有(you)效期

．試(shi)劑盒(he)保(bao)存：；2-8℃。

2．有(you)效期：6個(ge)月