雞(ji)卵黃蛋白(bai)原(yuan)VTG試(shi)劑盒操作說(shuo)明(ming)

雞(ji)卵黃蛋白(bai)原(yuan)VTG試(shi)劑盒操作說(shuo)明(ming)

本(ben)試(shi)劑盒僅(jin)供研究(jiu)使(shi)用      標(biao)本(ben)：血(xue)清(qing)或者血(xue)漿

雞(ji)卵黃蛋白(bai)原(yuan)VTG試(shi)劑組(zu)成

註意(yi)事項(xiang)

此雞(ji)卵黃蛋白(bai)原(yuan)VTG試(shi)劑為體外(wai)檢測(ce)試(shi)劑，效期(qi)內(nei)使(shi)用，試(shi)劑應視(shi)為傳染物(wu)，不(bu)同(tong)總批號(hao)的試(shi)劑不(bu)能(neng)混(hun)用(yong)。

使(shi)用前應(ying)將盒內各試(shi)劑取出(chu)。室(shi)溫放(fang)置至(zhi)少(shao)30分鐘(zhong)，

濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌(di)液出(chu)現(xian)結晶(jing)後(hou)，請於37℃孵育5分鐘。

濃(nong)縮(suo)樣品(pin)稀(xi)釋液(ye)出(chu)現(xian)結晶(jing)後(hou)，請於37℃孵育5分鐘

若(ruo)24小時(shi)內(nei)進(jin)行實(shi)驗(yan)，標(biao)本(ben)可存(cun)放(fang)於2～8℃。不(bu)需(xu)及(ji)時(shi)實(shi)驗(yan)，標(biao)本(ben)-20℃保存，避(bi)免反(fan)復凍(dong)融。

在(zai)反(fan)復清(qing)洗(xi)微(wei)孔板(ban)，並扣幹(gan)微(wei)孔中(zhong)的殘(can)余(yu)液(ye)體，否(fou)則(ze)將降(jiang)低(di)度(du)，造(zao)成吸光(guang)度(du)偏離(li)的假(jia)像(xiang)。

加(jia)樣完畢後(hou)，應註意(yi)輕微搖動(dong)微(wei)孔(kong)反(fan)應(ying)條(tiao)，以(yi)便使(shi)孔中的液(ye)體充分(fen)混勻(yun)。

試(shi)劑盒保存於2～8℃，請勿(wu)冷(leng)凍，有(you)效期(qi)請(qing)見盒內標(biao)示(shi)。

實(shi)驗(yan)前準備(bei)

．使(shi)用前應(ying)將盒內各試(shi)劑取出(chu)，室(shi)溫放(fang)置至(zhi)少(shao)30分鐘(zhong)。

2．準備(bei)各種實(shi)驗(yan)儀(yi)器及(ji)材料，如(ru)微(wei)量移液器(qi)，吸頭(tou)，醫用蒸(zheng)餾(liu)水等(deng)

3．濃(nong)縮(suo)洗(xi)液(ye)與醫用蒸(zheng)餾(liu)水︰9倍(bei)稀(xi)釋後(hou)成為應用洗(xi)滌(di)液

4．濃(nong)縮(suo)樣品(pin)稀(xi)釋液(ye)與醫用蒸(zheng)餾(liu)水︰4倍(bei)稀(xi)釋成應用樣品(pin)稀(xi)釋液(ye)

5．用(yong)應(ying)用樣品(pin)稀(xi)釋液(ye)來稀(xi)釋樣品(pin)，按(an)照(zhao)：00的體積(ji)比(bi)來稀(xi)釋樣品(pin)如(ru)0μl的樣品(pin)加(jia)入(ru)到(dao)ml的應(ying)用(yong)樣品(pin)稀(xi)釋液(ye)中，充分(fen)混勻(yun)待用(yong)。）

操(cao)作步驟(zhou)

．取(qu)出(chu)酶(mei)標(biao)板，設空白(bai)孔(kong)，依(yi)照(zhao)次(ci)序對(dui)應(ying)分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)00μl的標(biao)準品於空白(bai)微(wei)孔(kong)中(zhong)（空白(bai)孔(kong)視(shi)為0號(hao)標(biao)準品，用(yong)醫用蒸(zheng)餾(liu)水替代）

2、分(fen)別(bie)標(biao)記樣品(pin)編(bian)號，加(jia)入(ru)00μl的稀(xi)釋樣品(pin)於空白(bai)微(wei)孔(kong)中(zhong)（不(bu)同(tong)的樣本(ben)采(cai)用(yong)不(bu)同(tong)的吸頭(tou)）。

3、將(jiang)酶(mei)標(biao)板置於37℃溫育30分(fen)鐘(zhong)；

4、將(jiang)酶(mei)標(biao)板板取(qu)出(chu)，將(jiang)其(qi)中(zhong)的液(ye)體甩(shuai)去(qu)，每(mei)個孔中(zhong)全(quan)部(bu)加(jia)滿應用洗(xi)滌(di)液後(hou)，立即甩(shuai)去(qu)液體;

5、每(mei)個孔中(zhong)加(jia)滿應用洗(xi)滌(di)液後(hou)，輕微振搖酶(mei)標(biao)板30秒(miao)後(hou)將孔(kong)中的應(ying)用(yong)洗(xi)滌(di)液甩(shuai)去(qu)，在吸水(shui)紙(zhi)上(shang)將酶標(biao)板拍幹(gan)。

6、重(zhong)復第(di)5個步驟(zhou)5次(ci)，在吸水(shui)紙(zhi)上(shang)將酶標(biao)板拍幹(gan)。

7、雞(ji)卵黃蛋白(bai)原(yuan)VTG在(zai)標(biao)準品孔(kong)和樣品(pin)孔(kong)中加(jia)入(ru)00μl的酶(mei)標(biao)偶(ou)合(he)溶液。

8、將(jiang)96孔(kong)板(ban)置於37℃溫育30分(fen)鐘(zhong)。

9、將(jiang)酶(mei)標(biao)板取出(chu)，將(jiang)其(qi)中(zhong)的液(ye)體甩(shuai)去(qu)，每(mei)個孔中(zhong)全(quan)部(bu)加(jia)滿應用洗(xi)滌(di)液後(hou)，立即甩(shuai)去(qu)液體。

0、每(mei)個孔中(zhong)再次(ci)加(jia)滿洗(xi)滌(di)應用(yong)液(ye)後(hou)，室溫輕微振搖酶(mei)標(biao)板30秒(miao)後(hou)將孔(kong)中的應(ying)用(yong)洗(xi)滌(di)液甩(shuai)去(qu)，在吸水(shui)紙(zhi)上(shang)將酶標(biao)板拍幹(gan)。

、重(zhong)復第(di)5個步驟(zhou)5次(ci)，在吸水(shui)紙(zhi)上(shang)將酶標(biao)板拍幹(gan)。

2、在(zai)每(mei)個孔中(zhong)加(jia)入(ru)底(di)物(wu)A 50μl後(hou)立即加(jia)入(ru)底(di)物(wu)B 50μl。輕輕振蕩(dang)混(hun)勻(yun)。（A液(ye)、B液(ye)采(cai)用(yong)不(bu)同(tong)的吸頭(tou)加(jia)樣）

3、將(jiang)酶(mei)標(biao)板置於37℃避(bi)光(guang)溫育反(fan)應(ying)5分(fen)鐘(zhong)。

4、每(mei)個微孔(kong)中加(jia)入(ru)50μl的終(zhong)止液，輕輕振蕩(dang)混(hun)勻(yun)。

5、在(zai)酶(mei)標(biao)儀(yi)上，450nm處測(ce)定(ding)OD; 顯(xian)色(se)後(hou)，5分(fen)鐘(zhong)內進(jin)行測(ce)定(ding)。

6、根(gen)據制(zhi)備(bei)的標(biao)準曲線，計算樣本(ben)含量(liang)

結(jie)果(guo)判(pan)斷(duan)

. 儀(yi)器值：於波長450nm的酶(mei)標(biao)儀(yi)上讀取各孔(kong)的OD值(zhi)；

2、檢測(ce)值(zhi)範(fan)圍(wei)：0－400pg/ml

3、敏感度(du)：.0pg/ml