適(shi)合(he)ELISA試劑盒(he)樣本檢(jian)測的方法

血(xue)清(qing)是zui常(chang)用(yong)的ELISA試劑盒(he)標本之壹，ELISA檢測中(zhong)血(xue)漿(jiang)壹般(ban)可視為與血(xue)清(qing)同(tong)等的標本，標本中(zhong)幹擾(rao)性(xing)物(wu)質(zhi)是引起(qi)檢測後(hou)結(jie)果偏高或偏低的主要(yao)原(yuan)因(yin)，幹擾(rao)性(xing)物(wu)質(zhi)分為內源性(xing)物(wu)質(zhi)和外(wai)源(yuan)性(xing)物(wu)質(zhi)兩大類(lei)；

    外(wai)源(yuan)性(xing)物(wu)質(zhi)常(chang)常(chang)是由(you)於(yu)用(yong)於(yu)ELISA測定的血(xue)標本的采(cai)集(ji)、貯存等不當(dang)所(suo)致。如標本溶血(xue)、標本被(bei)細(xi)菌(jun)汙(wu)染(ran)、標本貯(zhu)存過久、標本凝(ning)集 不全(quan)和中(zhong)添(tian)加物(wu)等影響(xiang)。

    由(you)於(yu)各(ge)種(zhong)人(ren)為原(yuan)因(yin)引起(qi)的標本溶血(xue)，均(jun)可因(yin)紅細(xi)胞(bao)破壞溶解時(shi)釋放(fang)出(chu)大(da)量(liang)具有過氧(yang)化(hua)物酶(mei)活性(xing)的血(xue)紅蛋(dan)白(bai)，在以(yi)辣根過氧(yang)化(hua)物酶(mei)為標記(ji)的 ELISA試劑盒(he)測定中(zhong)，會(hui)導致(zhi)非(fei)特異(yi)性(xing)顯(xian)色(se)，幹擾(rao)測定結(jie)果(guo)。

    標本受(shou)細(xi)菌(jun)汙(wu)染(ran) ：因(yin)菌(jun)體中(zhong)可能含(han)有內源性(xing)辣(la)根(gen)過氧(yang)化(hua)物酶(mei)，因(yin)此(ci)，被(bei)細(xi)菌(jun)汙(wu)染(ran)的標本同(tong)溶血(xue)標本壹(yi)樣，亦(yi)可產生(sheng)非特異(yi)性(xing)顯(xian)色(se)而(er)幹擾(rao)測定結(jie)果(guo)。

    標本保存不當 ：在冰(bing)箱中(zhong)保存過久的標本，血(xue)清(qing)中(zhong)IgG可聚合(he)成多(duo)聚體、AFP可形成二(er)聚體，在間(jian)接(jie)法ELISA測定中(zhong)會(hui)導致(zhi)本底(di)過深、甚至(zhi)造(zao)成檢(jian)測OD值偏高；

    標本凝(ning)集不全(quan)；在ELISA檢(jian)測中(zhong)影響(xiang)血(xue)清(qing)血(xue)漿(jiang)樣本的因(yin)素(su)很多(duo)，ELISA試劑盒(he)在考慮(lv)試劑因(yin)素(su)和操(cao)作因(yin)素(su)之外(wai)，也(ye)應(ying)從(cong)標本因(yin)素(su)方面(mian)進行(xing)分析(xi)。

    常(chang)見(jian)的幹擾(rao)物(wu)質(zhi)有：類(lei)風濕(shi)因(yin)子(zi)、補(bu)體、嗜異性(xing)抗(kang)體、嗜靶抗原自(zi)身(shen)抗體、醫(yi)源性(xing)誘導(dao)的抗鼠Ig (s)抗體、交叉(cha)反(fan)應物質和其它物(wu)質等。

    類(lei)風濕(shi)因(yin)子(zi) ：血(xue)清(qing)中(zhong)IgM、IgG型類(lei)風濕(shi)因(yin)子(zi)（RF）在ELISA試劑盒(he)檢(jian)測中(zhong)，可與ELISA系(xi)統(tong)中(zhong)的捕獲抗體及(ji)酶(mei)標記(ji)二(er)抗的FC段直(zhi)接結(jie)合(he)，從而(er)導致(zhi)檢(jian)測OD值偏高。

    補(bu)體 ： ELISA系統(tong)中(zhong)固相壹抗(kang)和標記(ji)二(er)抗過程中(zhong)，抗體分子(zi)發(fa)生(sheng)變構，其FC段的補體Cq分子(zi)結(jie)合(he)位點(dian)被(bei)暴露出(chu)來，使Cq 可以將(jiang)二(er)者(zhe)連接(jie)起(qi)來，從而造(zao)成檢(jian)測OD值偏高。