當(dang)前位(wei)置(zhi):首(shou)頁(ye) > 技術(shu)文(wen)章(zhang) > 非(fei)標記抗(kang)體(ti)酶法(fa)——酶橋法
? 首(shou)先用酶(mei)免疫(yi)動(dong)物(wu),制(zhi)備效(xiao)價(jia)高、特異性強(qiang)的(de)抗酶(mei)抗體(ti);
? 以二抗作橋,將抗酶抗(kang)體(ti)聯(lian)結(jie)在(zai)壹(yi)抗(kang)上;
? 再將(jiang)酶(mei)結(jie)合(he)在(zai)抗(kang)酶抗(kang)體(ti)上,經顯(xian)色顯(xian)示抗原的(de)分布
– 優點(dian):任(ren)何抗體(ti)均未(wei)被酶(mei)標記。酶(mei)是(shi)通過(guo)免疫學原理與(yu)酶(mei)抗體(ti)結(jie)合(he)的(de)。避免了(le)共價(jia)連(lian)接對(dui)抗體(ti)和酶(mei)活(huo)性的(de)損害(hai),提高了(le)方法的(de)敏感性,而(er)且節(jie)省壹(yi)抗(kang)的(de)用量。但抗(kang)酶抗(kang)體(ti)不(bu)易純(chun)化。
幾(ji)點(dian)說(shuo)明(ming)
? 壹(yi)抗(kang)(假(jia)設(she)來(lai)自(zi)種(zhong)屬A)的(de)稀(xi)釋度可(ke)大(da)些(xie),使(shi)抗(kang)體(ti)的(de)兩個Fab段(duan)均與(yu)組(zu)織抗(kang)原結(jie)合(he)。
? 二抗——橋抗體(ti)(抗種(zhong)屬A的(de)IgG抗體(ti))應過(guo)量,使(shi)其Fab段壹(yi)個(ge)與(yu)壹(yi)抗(kang)結(jie)合(he),另壹(yi)個(ge)則遊(you)離。
? 因(yin)抗(kang)酶抗(kang)體(ti)與壹(yi)抗(kang)均(jun)系(xi)種(zhong)屬A IgG,具(ju)有相同(tong)的(de)抗原性(xing),所以橋抗體(ti)遊(you)離的(de)Fab能與(yu)抗(kang)酶抗(kang)體(ti)結(jie)合(he),起橋作用,將其連接(jie)在(zai)與(yu)組(zu)織抗(kang)原結(jie)合(he)的(de)壹(yi)抗(kang)上。
非(fei)標記抗(kang)體(ti)酶法(fa)——PAP法
? 與(yu)酶橋法相似(si),不(bu)同(tong)的(de)是,PAP法(fa)將酶(mei)橋法的(de)第3、4步(bu)並為(wei)步,用(yong)PAP復合(he)物(wu)代(dai)替(ti);
? PAP是(shi)離(li)體(ti)制(zhi)備的(de)復合(he)物(wu)(HRP--抗(kang)HRP)。
? 顯(xian)色與酶(mei)橋法相同(tong),PAP復合(he)物(wu)中(zhong)的(de)過氧(yang)化物(wu)酶(mei)催化底物(wu)水解,形(xing)成不(bu)溶(rong)性終(zhong)產物(wu)。
PAP法(fa)評價
? PAP法比(bi)直(zhi)接(jie)法、間(jian)接(jie)法(fa)、酶(mei)橋法更(geng)敏感。特別(bie)適用(yong)於石(shi)蠟切片(pian)中(zhong)微(wei)量抗原和抗(kang)原性(xing)減弱(ruo)抗(kang)原的(de)檢測(ce)。
– 缺點:步驟較多,時間(jian)較長(chang),不(bu)適(shi)用(yong)於臨床(chuang)常規檢查(zha)。
? 由(you)於常(chang)做石(shi)蠟切片(pian),故可(ke)用(yong)於回(hui)顧性研(yan)究。
英文(wen)名稱 Homo sapiens (Human) 鈣調(tiao)素(RGN)檢測試劑(ji)盒(酶(mei)聯(lian)免疫(yi)吸附試(shi)驗(yan)法(fa)) 規格(ge): 48T/96T
英文(wen)名稱 Homo sapiens (Human) 鈣調(tiao)素(CAM)檢測試劑(ji)盒(酶(mei)聯(lian)免疫(yi)吸附試(shi)驗(yan)法(fa)) 規格(ge): 48T/96T
英文(wen)名稱 Homo sapiens (Human) 鈣調(tiao)寧蛋白(bai)2(CNN2)檢測試(shi)劑(ji)盒(he)(酶(mei)聯(lian)免疫(yi)吸附試(shi)驗(yan)法(fa)) 規格(ge): 48T/96T
英文(wen)名稱 Homo sapiens (Human) 鈣調(tiao)寧蛋白(bai)(CNN)檢測試(shi)劑(ji)盒(he)(酶(mei)聯(lian)免疫(yi)吸附試(shi)驗(yan)法(fa)) 規格(ge): 48T/96T
抗(kang)體(ti)英文(wen)名稱 Homo sapiens (Human) 鈣調(tiao)磷(lin)酸酶(CaN)檢測試(shi)劑(ji)盒(he)(酶聯(lian)免疫(yi)吸附試(shi)驗(yan)法(fa)) 規格(ge): 48T/96T
英文(wen)名稱 Rattus norvegicus (Rat) 鈣調(tiao)磷(lin)酸酶(CaN)檢測試(shi)劑(ji)盒(he)(酶聯(lian)免疫(yi)吸附試(shi)驗(yan)法(fa)) 規格(ge): 48T/96T
英文(wen)名稱 Homo sapiens (Human) 鈣調(tiao)結(jie)合(he)蛋白(bai)(CALD)檢測試(shi)劑(ji)盒(he)(酶(mei)聯(lian)免疫(yi)吸附試(shi)驗(yan)法(fa)) 規格(ge): 48T/96T
英文(wen)名稱 Rattus norvegicus (Rat) 鈣調(tiao)結(jie)合(he)蛋白(bai)(CALD)檢測試(shi)劑(ji)盒(he)(酶(mei)聯(lian)免疫(yi)吸附試(shi)驗(yan)法(fa)) 規格(ge): 48T/96T
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