原位雜(za)交(jiao)組織(zhi)化(hua)學(xue)雙鏈(lian)DNA探針和(he)靶(ba)DNA變性(xing)

  雜(za)交(jiao)反應(ying)是(shi)指用雜(za)交(jiao)液孵(fu)育組織(zhi)切(qie)片(pian)，雜(za)交(jiao)液中(zhong)標(biao)記(ji)的(de)核酸探針在適當(dang)的條件(jian)下(xia)與組織(zhi)細(xi)胞(bao)內相應(ying)的(de)靶(ba)核酸互(hu)補(bu)結(jie)合(he)形(xing)成雜(za)交(jiao)體(ti)的過程(cheng)。雜(za)交(jiao)液的(de)成(cheng)分(fen)與預雜(za)交(jiao)液基(ji)本(ben)相同，所(suo)不同的只(zhi)是(shi)加入標記(ji)的(de)核酸探針。ELISA試劑(ji)盒

    雜(za)交(jiao)前(qian)的準(zhun)備(bei)只(zhi)是(shi)為(wei)雜(za)交(jiao)成功(gong)奠(dian)定(ding)基(ji)礎．要(yao)獲(huo)得(de)滿(man)意的實驗(yan)結(jie)果(guo)，在(zai)雜(za)交(jiao) 反應(ying)的(de)實(shi)驗(yan)過程(cheng)中還必(bi)須(xu)註意以(yi)下(xia)環節。
    雙鏈(lian)DNA探針和(he)靶(ba)DNA變性(xing)

    進行(xing)雜(za)交(jiao)反應(ying)時(shi)．探針和(he)靶(ba)核酸必須(xu)均是(shi)單(dan)鏈(lian)，兩者方(fang)能(neng)結(jie)合(he)。如果探針和(he)靶(ba)核酸均為(wei)雙鏈(lian)或二(er)者(zhe)中(zhong)有(you)壹者(zhe)是(shi)雙鏈(lian)。必須(xu)通過變性(xing)使其變為(wei)單(dan)鏈(lian)。壹般通過加熱(re)變性(xing)。變性(xing)溫度(du)為(wei)95C，5～5分鐘。探針和(he)(或)靶核酸壹旦變性(xing)，則需(xu)立(li)即(ji)進(jin)行雜(za)交(jiao)反應(ying)，否(fou)則(ze)解鏈(lian)的核酸又(you)會(hui)重(zhong)新(xin)復(fu)性(xing)。如果用(yong)單(dan)鏈(lian)探針檢測靶RNA，壹(yi)般不需(xu)要(yao)變性(xing)。有(you)時(shi)單(dan)鏈(lian)探針較長(chang)，可能(neng)會(hui)在局部形(xing)成雙鏈(lian)，這(zhe)時(shi)也(ye)同樣(yang)可通(tong)過加熱(re)處理使(shi)局部雙鏈(lian)解開以(yi)利(li)於探針和(he)靶(ba)核酸之(zhi)間(jian)的結(jie)合(he)。ELISA試劑(ji)盒

    微波(bo)爐處(chu)理(li)也(ye)可使(shi)雙鏈(lian)DNA探針和(he)靶(ba)DNA變性(xing)。此法不僅(jin)能(neng)使雙鏈(lian)探針和(he)靶(ba)核酸有(you)效地(di)變性(xing)，而(er)且(qie)還能(neng)使雜(za)交(jiao)信(xin)號(hao)增加。這(zhe)可能(neng)是(shi)由於(yu)微波(bo)輻射引起基質(zhi)蛋(dan)白(bai)質(zhi)變性(xing)，使靶(ba)核酸暴露(lu)，也(ye)可能(neng)是(shi)微波(bo)輻射對(dui)靶(ba)核酸構型(xing)產生(sheng)直(zhi)接影(ying)響，從而(er)提(ti)高(gao)雜(za)交(jiao)效率(lv)。ELISA試劑(ji)盒