傳(chuan)代細(xi)胞(bao)內皮細(xi)胞(bao)-細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)和(he)復蘇(su)實(shi)驗(yan)原(yuan)理(li)與註(zhu)意事(shi)項

    按照(zhao)常規的(de)組織學分類(lei)方法(fa)，脊椎動物和(he)人(ren)體(ti)細(xi)胞(bao)類(lei)型約有200余(yu)種。這些(xie)細(xi)胞(bao)在人(ren)體(ti)中(zhong)呈(cheng)現(xian)有序(xu)的(de)空(kong)間分布(bu)。細(xi)胞(bao)是人(ren)體(ti)的(de)結構(gou)和(he)功(gong)能(neng)單(dan)位。共(gong)約(yue)有40萬(wan)--60萬億(yi)個，細(xi)胞(bao)的(de)平(ping)均直徑在(zai)0--20微(wei)米之間。除成熟的(de)紅血(xue)球(qiu)外，所有細(xi)胞(bao)都(dou)有壹(yi)個細(xi)胞(bao)核(he)，是(shi)調節(jie)細(xi)胞(bao)作用(yong)的(de)中心。zui大(da)的(de)是成熟的(de)卵細(xi)胞(bao)，直徑在(zai)0.毫(hao)米以(yi)上;zui小的(de)是血小板，直徑只(zhi)有約(yue)2微(wei)米。而75000個精子細(xi)胞(bao)才(cai)抵(di)得上壹(yi)個卵(luan)細(xi)胞(bao)的(de)重量。腸粘膜(mo)細(xi)胞(bao)的(de)壽命(ming)為(wei)3天(tian)，肝(gan)細(xi)胞(bao)壽命(ming)為(wei)500天(tian)，而(er)腦與(yu)骨(gu)髓裏的(de)神經(jing)細(xi)胞(bao)的(de)壽命(ming)有幾(ji)十年，同人(ren)體(ti)壽命(ming)幾(ji)乎相(xiang)等(deng)。血液中的(de)白細(xi)胞(bao)有的(de)只(zhi)能活幾小時(shi)。

傳(chuan)代細(xi)胞(bao)內皮細(xi)胞(bao)-細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)和(he)復蘇(su)實(shi)驗(yan)原(yuan)理(li):

    細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)及復蘇(su)的(de)基本(ben)原(yuan)則是(shi)慢(man)凍(dong)快(kuai)融(rong)，實(shi)驗(yan)證(zheng)明這樣(yang)可(ke)以(yi)zui大限(xian)度的(de)保(bao)存(cun)細(xi)胞(bao)活力(li)。目前細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)多采用(yong)甘(gan)油或(huo)二甲(jia)基亞(ya)碸(feng)作保(bao)護(hu)劑，這(zhe)兩種物質能(neng)提(ti)高 細(xi)胞(bao)膜對(dui)水(shui)的(de)通(tong)透性(xing)，加上緩慢(man)冷(leng)凍(dong)可(ke)使(shi)細(xi)胞(bao)內的(de)水(shui)分滲出細(xi)胞(bao)外，減(jian)少(shao)細(xi)胞(bao)內冰(bing)晶(jing)的(de)形成，從而減(jian)少(shao)由(you)於冰(bing)晶 形成造成的(de)細(xi)胞(bao)損(sun)傷(shang)。復蘇(su)細(xi)胞(bao)應采(cai)用(yong)快(kuai)速(su)融(rong)化(hua)的(de)方法(fa)，這樣可(ke)以(yi)保(bao)證(zheng)細(xi)胞(bao)外結晶(jing)在(zai)很短(duan)的(de)時(shi)間內(nei)即融化(hua)，避(bi)免(mian) 由(you)於緩慢(man)融(rong)化(hua)使(shi)水(shui)分滲入細(xi)胞(bao)內形成胞(bao)內再(zai)結晶(jing)對(dui)細(xi)胞(bao)造成損(sun)傷(shang)。

傳(chuan)代細(xi)胞(bao)內皮細(xi)胞(bao)-細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)和(he)復蘇(su)實(shi)驗(yan)註(zhu)意(yi)事項:

. 從增(zeng)殖(zhi)期到形成致密(mi)的(de)單(dan)層細(xi)胞(bao)以(yi)前的(de)培(pei)養細(xi)胞(bao)都(dou)可(ke)以(yi)用(yong)於(yu)凍(dong)存(cun)，但(dan)為(wei)對(dui)數生(sheng)細(xi)胞(bao)。在凍(dong)存(cun) 前(qian)壹(yi)天換(huan)壹(yi)次(ci)培(pei)養液。

2. 將凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)入液氮(dan)容(rong)器或(huo)從中取(qu)出時(shi)，要做(zuo)好(hao)防(fang)護(hu)工作(zuo)，以(yi)免凍(dong)傷(shang)。

3. 凍(dong)存(cun)和(he)復蘇(su)用(yong)新(xin)配(pei)制的(de)培(pei)養液。

傳(chuan)代細(xi)胞(bao)內皮細(xi)胞(bao)-凍(dong)存(cun)和(he)復蘇(su)的(de)原(yuan)則：

    慢(man)凍(dong)快(kuai)融(rong) 當(dang)細(xi)胞(bao)冷到零(ling)度(du)以(yi)下(xia)，可(ke)以(yi)產生以(yi)下(xia) 變(bian)化(hua)：細(xi)胞(bao)器脫水(shui)，細(xi)胞(bao)中可(ke)溶(rong)性(xing)物質濃度(du)升高，並(bing)在細(xi)胞(bao)內形成冰晶(jing)。 如果(guo)緩慢(man)冷(leng)凍(dong)，可(ke)使(shi)細(xi)胞(bao)逐步(bu)脫(tuo)水(shui) ，細(xi)胞(bao)內不(bu)致產生大(da)的(de)冰晶;相(xiang)反，結晶(jing)就大，大結晶(jing)會造成細(xi)胞(bao)膜、綱(gang)胞(bao)器的(de)損(sun)傷(shang)和(he)破裂。復蘇(su)過(guo)程應快(kuai)融(rong)，目 的(de)是防止(zhi)小冰(bing)晶(jing)形成大冰(bing)晶，即冰晶(jing)的(de)重結晶(jing)。