當(dang)前位置(zhi):首頁 > 技(ji)術(shu)文(wen)章 > 國(guo)產ELISA試劑(ji)盒標本(ben)常(chang)用的反應(ying)劑(ji)配(pei)制方法(fa)
、國產ELISA試劑(ji)盒檢查(zha)葡(pu)萄(tao)糖試(shi)劑(ji)
配(pei)方(fang)壹(yi) 本(ben)尼(ni)迪(di)克(ke)(Benedict)溶液(ye)
() 在400毫(hao)升(sheng)蒸餾水中溶解(jie)85克檸檬酸(suan)鈉和50克。
(2) 在50毫(hao)升(sheng)加(jia)熱(re)的蒸餾水中溶解(jie)8.5克硫酸(suan)銅。
把(ba)硫酸(suan)銅溶液(ye)緩緩(huan)倒入(ru)檸檬酸(suan)鈉-碳酸(suan)鈉溶液(ye)中,邊(bian)加(jia)邊(bian)攪拌,如(ru)果產生(sheng)沈(chen)澱,要過(guo)濾(lv)。本(ben)尼(ni)迪(di)克(ke)溶液(ye)配(pei)制後能(neng)使(shi)用(存放時(shi)間較久而產生(sheng)沈(chen)澱是(shi),取(qu)上層清液(ye)使(shi)用,不必重新配(pei)制)。
本(ben)尼(ni)迪(di)克(ke)溶液(ye)用來測(ce)試(shi)食物、血液(ye)和尿中的葡(pu)萄(tao)糖,可測(ce)出(chu)0.5 ~0.20%的葡(pu)萄(tao)糖。這(zhe)種(zhong)溶液(ye)跟未(wei)知物同加(jia)熱(re)時(shi),如(ru)果未(wei)知物中有(you)葡(pu)萄(tao)糖,會(hui)形(xing)成紅(hong)色(se)的氧化亞(ya)銅沈(chen)澱物。
配(pei)方(fang)二 裴(pei)林(lin)(Fehling)溶液(ye)
()把(ba)34.5克(ke)硫酸(suan)銅溶於(yu)500毫(hao)升(sheng)蒸餾水中。
(2)把(ba)25克(ke)氫(qing)氧(yang)化鉀(鈉)和73克酒石(shi)酸(suan)鉀鈉溶解(jie)在500毫(hao)升(sheng)蒸餾水中。
上(shang)述(shu)兩種溶液(ye)應分(fen)別(bie)保(bao)存。在檢測(ce)葡(pu)萄(tao)糖時(shi),使(shi)他們(men)等(deng)量的混合,加(jia)入(ru)待(dai)測(ce)物(wu)的試管內,加(jia)熱(re)到沸騰(teng)。如(ru)果有葡(pu)萄(tao)糖,會(hui)形(xing)成紅(hong)色(se)的氧化亞(ya)銅沈(chen)澱物。
2、檢查(zha)澱粉(fen)的試劑(ji)
魯(lu)哥氏(Lugol’s)溶液(ye)(碘液(ye))
取(qu)6克溶於(yu)20毫(hao)升(sheng)蒸餾水中,攪(jiao)拌到(dao)溶解(jie)後,加(jia)入(ru)4克碘(dian),等(deng)碘(dian)充分(fen)溶解(jie),在加(jia)入(ru)80毫(hao)升(sheng)蒸餾水,貯存在棕(zong)色試(shi)劑(ji)瓶內。
碘(dian)液(ye)用來測(ce)試(shi)食物樣品(pin)或(huo)葉(ye)片(pian)中的澱粉(fen),也(ye)用作(zuo)染(ran)色劑(ji),例(li)如(ru)可染(ran)色鞭(bian)毛、纖(xian)毛和細胞(bao)核等(deng)。
3、檢查(zha)蛋白(bai)質(zhi)的試劑(ji)
配(pei)方(fang)壹(yi) 米倫(Millon)試(shi)劑(ji)
在60毫(hao)升(sheng)濃(nong)硝(xiao)酸(suan)(比重.42)中溶解(jie)40克汞(gong)(水(shui)浴(yu)加(jia)溫(wen)可助溶),溶解(jie)後加(jia)入(ru)兩倍體(ti)積(ji)的蒸餾水稀釋,靜置(zhi)澄(cheng)清(qing)後,取(qu)它上層的清液備用。這種試劑(ji)可保(bao)存。
在待(dai)測(ce)物(wu)中加(jia)入(ru)少量米倫試(shi)劑(ji),加(jia)熱(re),如(ru)果有蛋白(bai)質(zhi),會(hui)出(chu)現紅(hong)色(se)。這種試(shi)劑(ji)不能(neng)用來測(ce)定尿(niao)中的蛋白(bai)質(zhi)。
配(pei)方(fang)二 雙縮尿試(shi)劑(ji)
分別(bie)配(pei)制0%氫氧化鈉(na)溶液(ye)和%硫酸(suan)銅溶液(ye)。
在3毫(hao)升(sheng)待(dai)測(ce)物(wu)中加(jia)入(ru)毫(hao)升(sheng)0%氫氧化鈉(na)溶液(ye)和滴(di)%硫酸(suan)銅溶液(ye)。如(ru)果有蛋白(bai)質(zhi),會(hui)出(chu)現紫(zi)色(se)反應(ying)。
4、檢查(zha)脂(zhi)肪的試劑(ji)
蘇丹(dan)Ⅲ(Ⅳ)酒精(jing)飽和溶液(ye)
取(qu)0.2克蘇丹(dan)Ⅲ(或(huo)蘇丹(dan)Ⅳ),放入(ru)純酒精中,加(jia)熱(re),使(shi)它充分溶解(jie),成為(wei)飽和(he)酒精(jing)溶液(ye),過(guo)濾(lv)後(hou)密(mi)閉在(zai)試劑(ji)瓶內保(bao)存備用。
5、酸(suan)堿指(zhi)示(shi)劑(ji)
配(pei)方(fang)壹(yi) 試劑(ji)和試紙
試劑(ji) 取(qu)克,溶解(jie)在00毫(hao)升(sheng)60%的酒精溶液(ye)裏,裝(zhuang)在試(shi)劑(ji)瓶內密(mi)閉保(bao)存。
酚態(tai)試紙(zhi) 取(qu)克,溶解(jie)在00毫(hao)升(sheng)95%酒精溶液(ye)裏,加(jia)入(ru)00毫(hao)升(sheng)蒸餾水。把(ba)綠(lv)紙條放(fang)入溶液(ye)中浸(jin)濕後(hou),取(qu)出,放在無氨氣影(ying)響(xiang)處(chu)晾(liang)幹。
國(guo)產ELISA試劑(ji)盒酚泰試劑(ji)(試紙) pH值變(bian)色範(fan)圍8.2~0,在(zai)酸(suan)性和中性(xing)溶液(ye)中都(dou)無色,再(zai)堿性(xing)溶液(ye)中呈深紅(hong)色(se)。
配(pei)方(fang)二 紅(hong)藍(lan)石(shi)蕊(rui)試紙
取(qu)市(shi)售(shou)石(shi)蕊(rui)克,放在(zai)80毫(hao)升(sheng)0%酒精溶液(ye)中攪(jiao)拌,使(shi)它溶解(jie),然後過(guo)濾(lv)。把(ba)濾(lv)液(ye)分(fen)成兩份(fen)。份(fen)滴(di)入稀(xi)磷(lin)酸(suan)或(huo)稀(xi)硫酸(suan),到出現紅(hong)色(se)為(wei)止。另(ling)份(fen)滴(di)入稀(xi)氫(qing)氧(yang)化鈉(na)溶液(ye),到出(chu)現藍(lan)色(se)為(wei)止。在(zai)上述(shu)制備的溶液(ye)中分(fen)別(bie)浸濕(shi)濾(lv)紙(zhi)條(tiao),隨(sui)後(hou)取(qu)出濾(lv)紙(zhi)條(tiao),放(fang)在(zai)蔽光處(chu)、無酸(suan)堿性(xing)氣體(ti)影(ying)響(xiang)的地方晾(liang)幹,即(ji)的紅(hong)、藍(lan)兩種石(shi)蕊(rui)試紙。
紅(hong)石(shi)蕊(rui)試紙在(zai)堿性(xing)溶液(ye)中變(bian)藍(lan),藍(lan)石(shi)蕊(rui)試紙在(zai)酸(suan)性溶液(ye)中變(bian)紅(hong)。
6、檢查(zha)二氧化碳的試劑(ji)
檢查(zha)二氧化碳的試劑(ji),可用溴(xiu)代(dai)藍(lan)溶液(ye)和石(shi)灰水。
配(pei)方(fang)壹(yi) 溴(xiu)代(dai)藍(lan)溶液(ye)
取(qu)0.克溴(xiu)代(dai)藍(lan),溶解(jie)在00毫(hao)升(sheng)蒸餾水裏,滴(di)入少(shao)量0.%氫氧(yang)化鉀溶液(ye),使(shi)它成為(wei)弱堿性(xing)溶液(ye)而呈藍(lan)色(se)。
溴(xiu)代(dai)藍(lan)溶液(ye)pH值變(bian)色範(fan)圍是(shi)6.0(黃)~7.6(藍(lan))。待(dai)測(ce)物(wu)中如(ru)果有二氧化碳,會(hui)形(xing)成碳酸(suan)而使(shi)溶液(ye)變(bian)成黃色。
配(pei)方(fang)二 石(shi)灰水
在蒸餾水中加(jia)入(ru)生(sheng)石(shi)灰(氧化鈣(gai)),變(bian)加(jia)邊(bian)攪拌,直到(dao)加(jia)入(ru)的生(sheng)石(shi)灰不再(zai)溶解(jie),呈飽(bao)和(he)狀(zhuang)態(tai)時(shi)為(wei)止。在(zai)石(shi)灰水澄(cheng)清(qing)後,傾出上(shang)層清液(ye),用濾(lv)紙(zhi)過(guo)濾(lv),放(fang)在(zai)密(mi)閉瓶內保(bao)存。
如(ru)果測(ce)定的物質中有(you)二氧化碳,會(hui)生(sheng)成碳酸(suan)鈣(gai),使(shi)石(shi)灰水變(bian)渾(hun)濁(zhuo)。
7、檢查(zha)細胞(bao)生(sheng)活(huo)力(li)的試劑(ji)
檢查(zha)細胞(bao)有無生(sheng)活(huo)力(li),可用中性(xing)紅(hong)甲(jia)基藍(lan)試(shi)劑(ji)。國產ELISA試劑(ji)盒配(pei)制的方法(fa)是(shi)先分(fen)別(bie)配(pei)制%中性(xing)紅(hong)溶液(ye)和%甲(jia)基藍(lan)溶液(ye),這兩種溶液(ye)各(ge)取(qu)份(fen)混合(he)。該試(shi)劑(ji)使(shi)活細胞(bao)的液泡(pao)染(ran)上紅(hong)色(se),而使(shi)死(si)細胞(bao)全(quan)部染(ran)成藍(lan)色(se)。
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