進口(kou)ELISA試(shi)劑盒(he)常見(jian)樣(yang)本(ben)的(de)處(chu)理(li)方法—組織樣(yang)本(ben)

進口(kou)ELISA試(shi)劑盒(he)（酶聯免疫吸附(fu)劑測定）是壹(yi)種快(kuai)速(su)、靈(ling)敏(min)、準(zhun)確(que)可(ke)靠的(de)壹種定量(liang)分析方(fang)法(fa)，樣(yang)本(ben)的(de)處(chu)理(li)對(dui)於(yu)ELISA實(shi)驗的成(cheng)功(gong)有(you)著(zhe)舉(ju)足輕(qing)重的作用。 利(li)用ELISA進行(xing)檢測(ce)的(de)樣(yang)本(ben)類(lei)型包括(kuo)常見(jian)的(de)血(xue)液（血(xue)清、血(xue)漿），組織勻漿、細(xi)胞(bao)裂(lie)解液、細(xi)胞(bao)培(pei)養上清(qing)以及(ji)不(bu)常見(jian)的(de)皮(pi)膚(fu)組織、尿液(ye)、糞便(bian)、肺泡(pao)灌洗(xi)液、唾液、腦脊(ji)液(ye)、胸(xiong)腹(fu)水、前(qian)列腺(xian)液等(deng)，這些樣(yang)本(ben)收(shou)集的(de)時間(jian)、處理(li)方法和保存(cun)都會影(ying)響到ELISA實(shi)驗的結(jie)果(guo)。
 
下(xia)面(mian)就(jiu)常見(jian)ELISA組織樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)方法的整理(li)，希望(wang)對(dui)您有所(suo)幫(bang)助(zhu)。
組織樣(yang)本(ben)壹(yi)般(ban)是(shi)制成(cheng)組織勻漿，處理(li)方法如下(xia):
）取(qu)適量(liang)組織塊(kuai)，於(yu)預(yu)冷(leng)PBS（0.02mol/L, pH 7.0-7.2）中(zhong)清(qing)洗(xi)去除(chu)血(xue)液，稱重後(hou)備(bei)用（組織塊(kuai)較大(da)需(xu)先剪碎(sui)後(hou)再(zai)勻漿） ；
2）可(ke)同時選用(yong)多種勻漿方法(fa)達(da)到較(jiao)好的破碎(sui)效果(guo)：首先將(jiang)組織塊(kuai)移入玻(bo)璃勻漿器，加(jia)入 5-0ml預(yu)冷(leng)PBS(組織與 PBS 的質量(liang)體積(ji)比建(jian)議(yi)為 :5，即(ji)g 樣(yang)本(ben)加(jia)入 5ml PBS)進行(xing)充分(fen)研(yan)磨(mo)（有條(tiao)件(jian)實(shi)驗室可(ke)選用(yong)機器勻漿），該(gai)過程(cheng)需在(zai)冰(bing)上進行(xing)；得到的(de)勻漿液可(ke)再利(li)用超聲破碎(sui)或反復凍融進壹步(bu)處理(li)（超聲破碎(sui)過程(cheng)中註(zhu)意冰(bing)浴降(jiang)溫(wen)；反復凍融法可(ke)重復 2 次） 。
3）將(jiang)制備(bei)好的勻漿液於(yu)5000×g 離(li)心(xin) 5分(fen)鐘，留(liu)取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke)檢測(ce)。
4）如(ru)果(guo)樣(yang)本(ben)需(xu)要(yao)保存(cun)，請添(tian)加(jia)蛋白酶抑(yi)制劑。根據(ju)實(shi)驗需要(yao)，組織勻漿樣(yang)本(ben)可(ke)先定量(liang)總蛋白，以便(bian)於(yu)統(tong)計(ji)分(fen)析數據。某些組織樣(yang)本(ben)如(ru)肝(gan)臟(zang)，腎(shen)臟，腦組織會有假(jia)陽(yang)性(xing)反應。

    進口(kou)ELISA試(shi)劑盒(he)處理(li)樣(yang)本(ben)的(de)過(guo)程(cheng)就(jiu)是收(shou)集目標(biao)蛋白的過(guo)程(cheng)，由(you)於(yu)蛋白容易(yi)變性(xing)，降(jiang)解，故(gu)該(gai)過程(cheng)應盡量(liang)溫和。樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)之後(hou)的(de)儲存(cun)也(ye)非(fei)常重要，尤其(qi)註(zhu)意不(bu)要反復凍融，樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)之後(hou)可(ke)分裝(zhuang)密(mi)封(feng)保存(cun)， 4 度(du)保存(cun)應小於(yu) 周，-20 度(du)不(bu)應超過 個月(yue)，-80度(du)不(bu)應超過2個月(yue)。在標(biao)本(ben)使(shi)用(yong)前(qian)應緩(huan)慢(man)均(jun)衡(heng)至(zhi)室溫，不(bu)應加(jia)熱(re)使之(zhi)融解。樣(yang)本(ben)的(de)處(chu)理(li)是實(shi)驗成(cheng)功(gong)的(de)*步(bu), ，以(yi)上就(jiu)是關(guan)於(yu)常見(jian)樣(yang)本(ben)處(chu)理(li)方法的壹(yi)個簡(jian)述，供研(yan)究(jiu)者(zhe)參考.
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