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內皮(pi)素(su)ELISA試(shi)劑盒(he)檢(jian)測系統可(ke)以(yi)說是(shi)現(xian)在(zai)運(yun)用zui多(duo)的(de)檢(jian)測辦法,並且技術(shu)手(shou)段(duan)許(xu)多,關於花板(ban),假陽(yang)性,全顯(xian)色(se),悉(xi)數(shu)顯(xian)色(se),顯(xian)色(se)比空(kong)缺還(hai)低(di),這(zhe)些都(dou)起到了至(zhi)關重(zhong)要的(de)效果,必(bi)定(ding)要多(duo)留心(xin),那(na)麽(me)elisa檢測系統安穩(wen),這(zhe)些實驗進(jin)程都(dou)要留心(xin)。
包被原的性質(zhi)很重(zhong)要,蛋(dan)白濃(nong)度(du),是(shi)否降解(jie),這(zhe)關系到(dao)妳做出(chu)的(de)抗體(ti)可(ke)不(bu)可(ke)以(yi)被(bei)其(qi)辨(bian)認,所(suo)以(yi)保(bao)存抗原很重(zhong)要,我(wo)做重(zhong)組蛋(dan)白時,師(shi)兄(xiong)都(dou)嚴(yan)厲正(zheng)告我(wo)必(bi)定(ding)要在(zai)冰浴下緩慢消(xiao)融(rong)就(jiu)是(shi)這(zhe)個道理(li)。封suo就(jiu)是(shi)讓(rang)很(hen)多(duo)不(bu)相(xiang)關的(de)蛋(dan)白質(zhi)充填這(zhe)些曠(kuang)地(di)閑(xian)暇,然(ran)後排(pai)擠ELISA後(hou)的(de)過程中(zhong)攪擾(rao)物質(zhi)的再(zai)吸附。但有(you)時由於實驗的(de)需要(yao),包被原的特殊性也(ye)可(ke)能采用(yong)中(zhong)性的緩沖(chong)溶(rong)液來(lai)包。
應留心(xin)以(yi)下原理:由於蛋(dan)白質(zhi)與聚(ju)苯乙(yi)烯固相(xiang)載體(ti)是(shi)經過(guo)物理吸附結合(he)的(de),靠的是(shi)蛋白質(zhi)分子結(jie)構上的疏水(shui)基(ji)團與(yu)固(gu)相(xiang)載體(ti)外(wai)表(biao)的疏水(shui)基(ji)團間(jian)的(de)效果,這(zhe)種物理(li)吸附長(chang)短特異性的,受蛋白質(zhi)的分子量(liang)、等(deng)電點(dian)、濃(nong)度(du)等(deng)的(de)影(ying)響,大(da)分子蛋(dan)白質(zhi)較(jiao)小分子蛋(dan)白質(zhi)壹般(ban)含有(you)更(geng)多的疏水(shui)基(ji)團,故(gu)更(geng)易(yi)吸附到固相(xiang)載體(ti)外(wai)表(biao)。小分子必(bi)需(xu)依(yi)靠和大(da)的(de)蛋(dan)白載(zai)體(ti)偶(ou)聯(lian)後才(cai)幹固定(ding)在固(gu)相(xiang)載體(ti)上。
還(hai)有(you)有(you)的包被原可(ke)能不是(shi)蛋白,關(guan)於(yu)和脂(zhi)類(lei)物(wu)質(zhi)或小(xiao)分子物(wu)質(zhi)我們(men)要(yao)事前對其改造再(zai)加以(yi)包被,親(qin)和(he)素(su):先(xian)親(qin)和素(su)先(xian)包被載(zai)體(ti),參(can)加化(hua)的DNA,這(zhe)種包被辦(ban)法均(jun)勻、結(jie)實,已擴展應用於各種(zhong)抗原物質(zhi)的定(ding)量測定(ding)。常(chang)用(yong)的包被液除了(le)剛才說到的pH9.6碳酸鹽(yan)緩沖(chong)液,還(hai)有(you)pH7.2的磷(lin)酸鹽(yan)緩沖(chong)液和pH7-8的(de)Tris-HCL緩沖(chong)液等等(deng)。
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