進口(kou)ELISA試劑盒的應(ying)用種(zhong)屬(shu)、檢測樣(yang)本的種(zhong)類(lei),除特(te)別說(shuo)明(ming)外,壹般(ban)不(bu)同種(zhong)屬(shu)不(bu)能通用(yong)。常見(jian)待(dai)測樣(yang)本種(zhong)類(lei)有血(xue)清和(he)血(xue)漿(jiang)、細(xi)胞上清,和(he)細(xi)胞裂解(jie)液,試劑盒中不(bu)同樣(yang)本的稀(xi)釋(shi)液不(bu)混(hun)用。
試劑盒的檢測範(fan)圍(wei)也就是標(biao)曲範(fan)圍(wei),需要(yao)註意待(dai)測樣(yang)本濃(nong)度(du)是否(fou)落在標(biao)曲範(fan)圍(wei)內,對於濃度(du)很(hen)高(gao)的樣(yang)本,可(ke)以(yi)先(xian)進行(xing)預實(shi)驗(yan)摸(mo)索到比較(jiao)好的稀(xi)釋(shi)倍數後(hou)再(zai)大量測定(ding)樣(yang)本。
試劑盒中的稀(xi)釋(shi)線(xian)性(xing)壹般(ban)指樣(yang)本稀(xi)釋(shi)線(xian)性(xing),是將(jiang)樣(yang)本梯(ti)度(du)稀(xi)釋下來,看(kan)各稀釋(shi)梯度(du)濃(nong)度(du)是否(fou)成線(xian)性(xing),參考(kao)樣(yang)本稀(xi)釋(shi)線(xian)性(xing)可以(yi)選(xuan)擇樣(yang)本的稀(xi)釋(shi)倍數;稀(xi)釋(shi)線性(xing)也有做加標(biao)稀釋(shi)線性(xing)的情(qing)況(kuang),加標(biao)稀釋(shi)線性(xing)是將(jiang)標(biao)準品加入樣(yang)本中測定(ding)加入的標(biao)準品濃(nong)度(du)測定(ding)是否(fou)準確;同樣(yang)也是確定(ding)待測樣(yang)本稀(xi)釋(shi)倍數的參(can)考(kao)指(zhi)標(biao)。壹般(ban)線性(xing)和(he)回(hui)收率的範(fan)圍(wei)在80%-20%比(bi)較(jiao)合(he)適(shi)。
當待檢樣(yang)本過(guo)多時,建議分批(pi)操(cao)作(zuo),需(xu)要(yao)稀釋(shi)的樣(yang)本提(ti)前(qian)做好稀(xi)釋(shi),註意選(xuan)對合適(shi)稀釋液;控制好加樣(yang)時間(jian),避(bi)免(mian)加樣(yang)費時過(guo)長(chang)造成誤差;註意加樣(yang)角(jiao)度(du),垂(chui)直加入孔(kong)底,不(bu)要(yao)接觸(chu)孔(kong)壁(bi),做到壹份樣(yang)本壹(yi)個(ge)移液頭,防止(zhi)交叉汙染。
進(jin)口(kou)ELISA試劑盒能夠檢測到(dao)的樣(yang)本低(di)濃度(du)的能力(li),如(ru)果待(dai)檢指(zhi)標(biao)含量很(hen)低(di),需要(yao)選(xuan)擇高(gao)靈敏(min)度(du)的ELISA試劑盒,板間(jian)和(he)板內的變(bian)異系數(shu)(CV%):反映(ying)板內和(he)不(bu)同板之(zhi)間(jian)是否(fou)均勻,CV%壹(yi)般(ban)小於0%比較好。其(qi)有效(xiao)期(qi)壹(yi)般(ban)是半年(nian)至壹年(nian),樣(yang)本準備(bei)時間(jian)需(xu)要(yao)考慮(lv)到試劑盒的有(you)效(xiao)期(qi)。