為了(le)成功(gong)的(de)操作
小(xiao)鼠(shu)ELISA試劑(ji)盒,需要(yao)在(zai)確立穩健(jian)的(de)多色(se)配(pei)色方(fang)案(an),確定正確對照和(he)進行重復性(xing)好(hao)的(de)分析上花費(fei)大(da)量(liang)的(de)時(shi)間(jian)和(he)精力。除(chu)了(le)資(zi)源(yuan)共享實驗室(shi)和(he)核(he)心設(she)備花(hua)費大(da)量(liang)的(de)時(shi)間(jian)在(zai)儀器(qi)質(zhi)量(liang)控(kong)制(zhi)上,研究(jiu)人(ren)員(yuan)也會把(ba)質(zhi)量(liang)控(kong)制(zhi)結合進(jin)他們(men)的(de)實驗中。質(zhi)量(liang)控(kong)制(zhi)管能實現確保實驗之間(jian)的(de)PMT電壓壹(yi)致(zhi),能(neng)確保實驗正確進行並且(qie)能確保設(she)門策略具(ju)有說(shuo)服力。
洗板(ban)時(shi)容(rong)易(yi)造(zao)成(cheng)誤差(cha):因為洗板(ban)是人工洗的(de),所以(yi)判(pan)斷(duan)什麽(me)時(shi)候洗幹凈了(le)也是人為判(pan)斷(duan)的(de),這個(ge)時(shi)候帶有主觀(guan)色(se)彩,所以(yi)多清(qing)洗幾次(ci),還有就(jiu)是在(zai)洗的(de)時(shi)候孔(kong)與(yu)孔之間(jian)的(de)液體(ti)容(rong)易(yi)交叉流動;
小(xiao)鼠(shu)ELISA試劑(ji)盒的(de)顯(xian)色問題:使用(yong)了過(guo)期的(de)顯(xian)色劑或(huo)者(zhe)是顯(xian)色劑用(yong)過後(hou)放置(zhi)時(shi)間(jian)太長(chang),都(dou)有可(ke)能造(zao)成顯(xian)色劑不(bu)顯(xian)色。所以(yi)在(zai)進(jin)行顯(xian)色反(fan)應的(de)時(shi)候,要(yao)先(xian)查看(kan)顯(xian)色劑本(ben)身(shen)的(de)情況(kuang);
試劑(ji)的(de)選擇:選(xuan)擇優(you)良試劑(ji)大(da)家(jia)都(dou)是知道的(de),但(dan)是在(zai)檢(jian)測(ce)之前(qian)還(hai)應該提(ti)前半(ban)個小(xiao)時(shi)將試劑(ji)拿到常(chang)溫(wen)下(xia)進行解凍(dong);
加樣中可(ke)能遇(yu)到的(de)問題:在(zai)做(zuo)血清或(huo)是血漿用(yong)於檢(jian)測(ce)試劑(ji)的(de)時(shi)候,會碰到血清血漿不(bu)好(hao)分離的(de)情況(kuang),這個(ge)時(shi)候的(de)解決(jue)辦(ban)法是先(xian)放(fang)在(zai)常(chang)溫(wen)中到2小(xiao)時(shi),然(ran)後在(zai)進(jin)行離心處(chu)理;
讀(du)板(ban):讀(du)板(ban)的(de)時(shi)候首(shou)先(xian)應該保證(zheng)板(ban)的(de)清潔(jie)幹(gan)凈;
終(zhong)止(zhi)反(fan)應:在(zai)加終(zhong)止(zhi)劑的(de)時(shi)候由於傾(qing)倒速(su)度快,差(cha)生氣(qi)泡(pao),造成(cheng)假陽性(xing)結果。所(suo)以(yi)在(zai)倒終止(zhi)劑的(de)時(shi)候要(yao)緩慢倒;
壹般(ban)待測(ce)抗(kang)原標準曲線(xian)的(de)線(xian)性(xing)範圍的(de)可通(tong)過(guo)將標準品做8次(ci)2倍(bei)系列(lie)稀(xi)釋(shi)從(cong)2000pg/ml到5pg/ml。可(ke)利(li)用(yong)標準的(de)ELISA操作流程、放大(da)試劑(ji)盒、第三(san)類(lei)試劑(ji)、或(huo)改變酶底(di)物(wu)系統(tong)可(ke)在(zai)壹(yi)定範圍內(nei)提(ti)高(gao)靈(ling)敏度。
根據(ju)檢測(ce)標本(ben)數量(liang)確定所需試劑(ji)的(de)量(liang);
按(an)說(shuo)明書將所用(yong)試劑(ji)平(ping)衡(heng)至室(shi)溫(wen),配制(zhi)所需(xu)試劑(ji);
準(zhun)備好(hao)所有實驗額外(wai)所需物(wu)品,如試管、吸(xi)頭(tou)、移(yi)液(ye)器(qi)、離心機(ji)等(deng);
標本(ben)制備要(yao)規(gui)範,每份標本(ben)體(ti)積(ji)要(yao)按(an)2-3個復孔以(yi)上的(de)量(liang)制(zhi)備,盡(jin)量(liang)分裝(zhuang)做備份(fen)。短期內(nei)無(wu)法實驗者(zhe),註(zhu)意低(di)溫(wen)保存。