大鼠(shu)GATA結合蛋白(bai)2（GATA2）ELISA試(shi)劑盒(he)樣(yang)本(ben)處理(li)及(ji)要求(qiu)

大鼠(shu)GATA結合蛋白(bai)2(GATA2)ELISA試(shi)劑盒(he)樣(yang)本(ben)處理(li)及(ji)要求(qiu)

.  血清：全(quan)血標(biao)本(ben)請(qing)於(yu)室(shi)溫放置2小(xiao)時或(huo)4℃過夜後(hou)於(yu)000g離心20分(fen)鐘(zhong)，取(qu)上(shang)清即可檢測，或(huo)將標(biao)本(ben)放(fang)於(yu)-20℃或(huo)-80℃保存(cun)，但應避免(mian)反復凍(dong)融(rong)。
2.  血漿(jiang)：可(ke)用EDTA或(huo)肝素(su)作為抗(kang)凝劑(ji)，標(biao)本(ben)采(cai)集後(hou)30分(fen)鐘(zhong)內(nei)於(yu)2 - 8°C 000g離心20分(fen)鐘(zhong)，或(huo)將標(biao)本(ben)放(fang)於(yu)-20℃或(huo)-80℃保存(cun)，但應避免(mian)反復凍(dong)融(rong)。
3.  細胞培養(yang)物(wu)上清或(huo)其它(ta)生(sheng)物(wu)標(biao)本(ben)：000g離心20分(fen)鐘(zhong)，取(qu)上(shang)清即可檢測，或(huo)將標(biao)本(ben)放(fang)於(yu)-20℃或(huo)-80℃保存(cun)，但應避免(mian)反復凍(dong)融(rong)。
註(zhu)：標(biao)本(ben)溶(rong)血會影(ying)響(xiang)後(hou)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)，因此溶(rong)血標(biao)本(ben)不宜進(jin)行(xing)此(ci)項檢測(ce)。

操(cao)作步(bu)驟

.  從(cong)室溫平衡(heng)20min後(hou)的(de)鋁(lv)箔(bo)袋中(zhong)取(qu)出所需板條(tiao)，剩余(yu)板條(tiao)用自(zi)封(feng)袋密封(feng)放(fang)回4℃。

2.  設(she)置標(biao)準品(pin)孔(kong)和(he)樣(yang)本(ben)孔(kong)，標(biao)準品(pin)孔(kong)各加(jia)不同濃度(du)的(de)標(biao)準品(pin)50μL；

3.  樣(yang)本(ben)孔(kong)中(zhong)加入待測樣(yang)本(ben)50μL；空(kong)白(bai)孔(kong)不加。

4.  除(chu)空(kong)白孔外，標(biao)準品(pin)孔(kong)和(he)樣(yang)本(ben)孔(kong)中(zhong)每(mei)孔加(jia)入辣(la)根過氧化(hua)物(wu)酶（HRP）標(biao)記(ji)的(de)檢(jian)測(ce)抗(kang)體(ti)00μL，用(yong)封(feng)板(ban)膜(mo)封住(zhu)反(fan)應(ying)孔(kong)，37℃水(shui)浴鍋或(huo)恒溫箱溫育60min。

5.  棄去(qu)液(ye)體(ti)，吸(xi)水(shui)紙(zhi)上拍(pai)幹，每(mei)孔加(jia)滿洗(xi)滌液（350μL），靜(jing)置min，甩去洗滌液(ye)，吸(xi)水(shui)紙(zhi)上拍(pai)幹，如此(ci)重(zhong)復洗(xi)板(ban)5次(ci)（也可用洗(xi)板機洗板）。

6.  每(mei)孔加(jia)入底物(wu)A、B各50μL，37℃避光(guang)孵(fu)育5min。

7.  每(mei)孔加(jia)入終(zhong)止(zhi)液50μL，5min內(nei)，在450nm波(bo)長處測(ce)定各孔(kong)的(de)OD值(zhi)。