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植物(wu)生(sheng)長素(su)(IAA)試劑盒操(cao)作步(bu)驟(zhou)
)使(shi)用(yong)前,將(jiang)所(suo)有(you)試劑充分(fen)混勻(yun)。不(bu)要使(shi)液體產(chan)生(sheng)大(da)量(liang)的(de)泡沫,以(yi)免(mian)加樣時(shi)加入大(da)量(liang)的(de)氣泡,產(chan)生(sheng)加(jia)樣上的(de)誤差。
2)根(gen)據待測樣品(pin)數量(liang)加上標(biao)準(zhun)品(pin)的(de)數量(liang)決定(ding)所(suo)需的(de)板條(tiao)數。每(mei)個(ge)標準(zhun)品(pin)和(he)空白(bai)孔建(jian)議做復孔(kong)。每(mei)個(ge)樣品(pin)根據自(zi)己(ji)的(de)數量(liang)來(lai)定(ding),能(neng)使(shi)用(yong)復孔(kong)的(de)盡量(liang)做復(fu)孔(kong)。標本用(yong)標本稀釋(shi)液:稀釋(shi)後加入50ul於反(fan)應(ying)孔內。
3)加入稀釋(shi)好(hao)後的(de)標準(zhun)品(pin)50ul於反(fan)應(ying)孔、加入待測樣品(pin)50ul於反(fan)應(ying)孔內。立即加入50ul的(de)標記的(de)抗(kang)體。蓋(gai)上膜(mo)板(ban),輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻,37℃溫育(yu)小時(shi)。
4)甩去孔內(nei)液(ye)體,每(mei)孔(kong)加滿洗滌液(ye),振(zhen)蕩(dang)30秒(miao),甩去洗滌(di)液(ye),用(yong)吸水紙(zhi)拍(pai)幹。重(zhong)復此操(cao)作3次(ci)。如果用(yong)洗板(ban)機洗(xi)滌(di),洗滌(di)次(ci)數增(zeng)加壹次(ci)。
5)每(mei)孔(kong)加入80ul的(de)親和(he)鏈酶素(su)-HRP,輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻,37℃溫育(yu)30分(fen)鐘。
6)甩去孔內(nei)液(ye)體,每(mei)孔(kong)加滿洗滌液(ye),振(zhen)蕩(dang)30秒(miao),甩去洗滌(di)液(ye),用(yong)吸水紙(zhi)拍(pai)幹。重(zhong)復此操(cao)作3次(ci)。如果用(yong)洗板(ban)機洗(xi)滌(di),洗滌(di)次(ci)數增(zeng)加壹次(ci)。
7)每(mei)孔(kong)加入底(di)物(wu)A、B各50ul,輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻,37℃溫育(yu)0分(fen)鐘。避(bi)免(mian)光(guang)照。
8)取出酶(mei)標(biao)板,迅速(su)加入50ul終(zhong)止液,加入終(zhong)止液後應(ying)立即測定(ding)結果。
9)在450nm波(bo)長處(chu)測定(ding)各孔(kong)的(de)OD值。
植物(wu)生(sheng)長素(su)(IAA)試劑盒局(ju)限(xian)
6號(hao)標準(zhun)品(pin)以(yi)上的(de)結果為(wei)非(fei)線性的(de),根據此標(biao)準(zhun)曲線無法得(de)到的(de)結果。
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