人(ren)蛋(dan)白ELISA檢測(ce)試劑盒(he)基本(ben)原(yuan)則(ze)點

人蛋白(bai)ELISA檢測(ce)試劑盒(he)的基(ji)本(ben)原(yuan)則(ze)有三(san)：

（）抗原或抗體的物理(li)吸附(fu)到固(gu)相(xiang)載體，可(ke)以是(shi)蛋白(bai)質與(yu)聚苯乙(yi)烯表面(mian)吸(xi)附(fu)的疏(shu)水性(xing)部分(fen)之間(jian)的(de)相互(hu)作用，並(bing)人蛋(dan)白ELISA檢測(ce)試劑盒(he)保(bao)持其(qi)免(mian)疫(yi)活(huo)性(xing)；

（2）抗原或抗體酶結合(he)物可(ke)以通(tong)過(guo)然而人蛋(dan)白ELISA檢測(ce)試劑盒(he)酶共(gong)價(jia)鍵(jian)連(lian)接(jie)，這種(zhong)酶結(jie)合物仍(reng)能保(bao)持其(qi)免(mian)疫(yi)和(he)大(da)鼠(shu)ELISA試劑盒(he)酶的(de)活(huo)性(xing)；

（3）酶結合(he)物與相(xiang)應(ying)的抗原或抗體試劑盒(he)，以確(que)定是(shi)否(fou)免疫(yi)反(fan)應(ying)是根(gen)據底物顯(xian)色(se)反應(ying)的增(zeng)加(jia)，和顯(xian)色(se)反應(ying)深度成(cheng)正(zheng)比樣品(pin)的(de)相(xiang)應(ying)抗原或抗體的量，因(yin)此(ci)，可(ke)以按顯(xian)色(se)底物水平(ping)顯(xian)示(shi)測(ce)試結果(guo)。

人蛋(dan)白(bai)ELISA檢測(ce)試劑盒(he)間接(jie)法(fa)
() 抗原包被：用(yong)包被液(ye)將PEDV抗原作∶5稀(xi)釋(shi)包被反(fan)應(ying)板，每(mei)孔(kong)00μl，同時(shi)設(she)陰性細(xi)胞(bao)培養物對照孔，置4℃過(guo)夜。
(2) 洗滌：用(yong)洗滌(di)液(ye)洗滌2次，每(mei)次2min，瀝幹。
(3) 加入(ru)被(bei)檢血清：用(yong)保(bao)溫液(ye)將被(bei)檢血清作(zuo)∶00稀(xi)釋(shi)，加(jia)入(ru)反(fan)應(ying)板相(xiang)鄰的兩個孔中(zhong)，每(mei)孔(kong)00μl。同時(shi)作(zuo)陰(yin)、陽性標(biao)準血(xue)清(qing)對照，置37℃孵育(yu)h。
(4) 洗滌3次：方(fang)法(fa)同上(shang)。
(5) 加(jia)入(ru)酶(mei)結合物：用保(bao)溫液(ye)將酶(mei)結(jie)合(he)物作∶4 000稀(xi)釋(shi)，加(jia)入(ru)反(fan)應(ying)孔中(zhong)，每(mei)孔(kong)00μl，置37℃孵育(yu)h。
(6) 洗滌3次：方(fang)法(fa)同上(shang)。
(7) 加(jia)入(ru)底物：每(mei)孔(kong)00μl，置室(shi)溫(wen)暗(an)盒(he)內顯(xian)色(se)20min。
(8) 加入(ru)終(zhong)止液(ye)：每(mei)孔(kong)50μl，靜置5min。
(9) 測(ce)定OD值(zhi)：用檢測(ce)儀，於(yu)492nm波長，按儀器使(shi)用及(ji)制(zhi)定標(biao)準要求調節(jie)儀器，測(ce)定各反應(ying)孔的(de)OD值(zhi)，記(ji)錄(lu)結(jie)果。