elisa試(shi)劑盒(he)實驗(yan)前樣本(ben)的(de)處理(li)方法

在(zai)采(cai)集樣品(pin)之前(qian)必須(xu)有(you)壹(yi)個完(wan)整的計(ji)劃，清(qing)楚(chu)要(yao)測(ce)試的(de)成(cheng)分(fen)是(shi)否(fou)足(zu)夠(gou)穩定(ding)。同(tong)壹回(hui)采集(ji)的(de)ELISA樣本(ben)被(bei)及時(shi)存放在4℃。對於(yu)第(di)二天測(ce)試的(de)樣本(ben)，樣品(pin)應(ying)在加載(zai)後的(de)-20℃及時(shi)冷(leng)凍。如(ru)果(guo)有(you)條(tiao)件(jian)，將它們(men)冷(leng)凍到-70℃。標(biao)本(ben)應(ying)避(bi)免反(fan)復凍融(rong)。

液(ye)體(ti)標本：包(bao)括(kuo)血清(qing)、血漿、尿(niao)液(ye)、胸水(shui)和腹水(shui)、腦脊(ji)液、細(xi)胞(bao)培養上(shang)清(qing)液(ye)等(deng)。

壹(yi)、血清(qing)

室(shi)溫(wen)自然(ran)凝固(gu)0-20分(fen)鐘(zhong)後，將血液離(li)心(xin)約20分(fen)鐘(zhong)(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收(shou)集(ji)清(qing)洗(xi)。如(ru)果(guo)保存過(guo)程中出現(xian)沈澱(dian)，應再(zai)次離(li)心(xin)。

二、等(deng)離(li)子(zi)體(ti)

應根據(ju)樣品(pin)的(de)要求選(xuan)用EDTA、檸(ning)檬酸鈉或(huo)肝(gan)素(su)作為(wei)抗凝(ning)劑。混合(he)0-20分鐘(zhong)後，離(li)心(xin)約20分(fen)鐘(zhong)(2000-3000轉/分)，仔(zai)細收(shou)集(ji)，保存過(guo)程中如(ru)有(you)沈(chen)澱形成(cheng)，應(ying)再(zai)次離(li)心(xin)。

三、尿(niao)液(ye)

用無(wu)菌(jun)管(guan)收(shou)集(ji)，離(li)心(xin)約20分(fen)鐘(zhong)(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收(shou)集(ji)清(qing)洗(xi)。如(ru)果(guo)保存過(guo)程中有(you)沈(chen)澱形成(cheng)，應(ying)再(zai)次離(li)心(xin)。根據(ju)這(zhe)壹(yi)做(zuo)法(fa)，以胸水(shui)、胸水(shui)和腦脊(ji)液(腦脊(ji)液)為(wei)參(can)考(kao)。

四(si)、細(xi)胞(bao)培養上(shang)清(qing)

檢(jian)測(ce)分泌(mi)成(cheng)分(fen)時(shi)，用無(wu)菌(jun)管(guan)收(shou)集(ji)，離(li)心(xin)20分鐘(zhong)(每分鐘(zhong)2000-3000轉)，仔(zai)細收(shou)集(ji)。

五(wu)、培養細胞(bao)

檢測(ce)細胞(bao)內組分時(shi)，用PBS(PH7.2-7.4)稀(xi)釋細胞(bao)懸液，細胞(bao)濃(nong)度約為(wei)00萬/ml。通(tong)過(guo)反復凍融(rong)或(huo)添(tian)加組織蛋白(bai)提(ti)取(qu)劑(ji)，細(xi)胞(bao)被破(po)壞，細(xi)胞(bao)內成(cheng)分(fen)釋放。離(li)心(xin)20分鐘(zhong)(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收(shou)集(ji)清(qing)洗(xi)。如(ru)果(guo)保存過(guo)程中有(you)沈(chen)澱形成(cheng)，應(ying)再(zai)次離(li)心(xin)。

六、組織標本

切完(wan)標本後，稱(cheng)重。加入壹(yi)定(ding)量(liang)的(de)PBS，pH7.4。用液(ye)氮(dan)快(kuai)速冷(leng)凍。試樣熔(rong)化(hua)後溫(wen)度保持在2-8℃。加(jia)入壹(yi)定量(liang)的(de)PBS(pH7.4)或(huo)組織蛋白(bai)提(ti)取(qu)劑(ji)，樣品(pin)用手(shou)或(huo)勻(yun)漿機均勻(yun)化(hua)。離(li)心(xin)20分鐘(zhong)左右(2000-3000 rpm)。仔(zai)細收(shou)集(ji)清(qing)洗(xi)。壹(yi)份(fen)經過(guo)單獨(du)加載(zai)後將進(jin)行(xing)測(ce)試，其(qi)余的將被冷(leng)凍並(bing)存放(fang)。（內容僅供(gong)參(can)考(kao)，如(ru)有(you)問(wen)題或(huo)遇到問(wen)題請在(zai)線咨(zi)詢，我(wo)們會(hui)竭(jie)誠為您(nin)服務(wu)）