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豚(tun)鼠(shu)單(dan)核(he)細(xi)胞(bao)趨化蛋白(bai)4 ELISA試劑盒測(ce)定(ding)步驟:
.加樣
. 除(chu)包(bao)被外(wai)都(dou)需(xu)45度加樣
2.加樣體(ti)積要(yao)準(zhun)確(que)
3.管(guan)底加樣,不能加在管壁上(shang)
4.加樣時不能產生氣泡(pao)
2.溫浴
.加標(biao)本(ben)後和加結合(he)物(wu)後,應立即(ji)放入(ru)按規(gui)定(ding)的(de)反(fan)應(ying)溫 度的(de)水浴(yu)箱(xiang)。
2.各ELISA板(ban)不應疊(die)在壹起(qi)。
3.為避免蒸(zheng)發,板(ban)上(shang)應(ying)加蓋,或(huo)將(jiang)板平放在(zai)底部(bu)墊有濕(shi) 紗(sha)布(bu)的(de)金屬(shu)濕(shi)盒中。
4.加入(ru)底物(wu)後,反(fan)應(ying)的(de)時間(jian)和溫度通常(chang)不做(zuo)嚴(yan)格要求(qiu)。 如(ru)室(shi)溫高(gao)於(yu)20℃,ELISA板可避光(guang)放在(zai)實(shi)驗臺(tai)上,以便(bian) 不時觀(guan)察,待(dai)對(dui)照管(guan)顯(xian)色適(shi)當時,即(ji)可終止(zhi)酶反(fan)應(ying)。
3.洗滌
.洗(xi)滌(di)在ELISA過程(cheng)中不是反(fan)應(ying)步驟,但卻 是決(jue)定(ding)實(shi)驗成敗(bai)的(de)關(guan)鍵(jian)。
2.目(mu)的(de)是洗(xi)去反(fan)應(ying)液(ye)中沒有與(yu)固(gu)相(xiang)抗(kang)原或(huo) 抗(kang)體(ti)結合(he)的(de)物(wu)質(zhi)以及(ji)在(zai)反(fan)應(ying)過程中非特(te) 異性吸附於(yu)固相(xiang)載(zai)體(ti)的(de)幹擾(rao)物(wu)質(zhi)。
4.讀板
.陰(yin)性(xing)對照顏(yan)色極(ji)淺,在(zai)定(ding)性測(ce)定(ding)中壹般 可采用(yong)目(mu)視比色。
2.如(ru)用(yong)酶標(biao)儀(yi)測(ce)定(ding)結果,準(zhun)確(que)性(xing)決(jue)定(ding)於(yu) ELISA板底的(de)平整與(yu)透(tou)明(ming)度、酶(mei)標(biao)儀(yi)的(de)質(zhi) 量(liang)和軟(ruan)件(jian)的(de)算法。
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