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食(shi)蟹猴C肽(tai)(C-Peptide)ELISA試劑(ji)盒(he)外源(yuan)性(xing)幹(gan)擾(rao)因(yin)素(su)進(jin)行(xing)簡(jian)要(yao)說明(ming):
()標本(ben)溶(rong)血(xue) 要註(zhu)意避免出現(xian)嚴重(zhong)溶(rong)血(xue)。血(xue)紅(hong)蛋白中含(han)有血(xue)紅(hong)素(su)基(ji)團,其(qi)具(ju)有類過氧(yang)化(hua)物(wu)的(de)活(huo)性(xing),因(yin)此(ci),在(zai)以辣(la)根過氧(yang)化(hua)物(wu)酶(mei)(horseradish peroxidase,HRP)為(wei)標記酶(mei)的(de)ELISA測定中,如果血(xue)清標本(ben)中血(xue)紅(hong)蛋白濃度較高,則其(qi)就很(hen)容(rong)易在(zai)溫育(yu)過程(cheng)中吸附於(yu)固(gu)相,從(cong)而與後面加(jia)入(ru)的(de)底(di)物反應顯色(se)。
(2)標本(ben)被細(xi)菌(jun)汙染 標本(ben)的(de)采(cai)集及(ji)血(xue)清分離(li)要註(zhu)意(yi)盡(jin)量(liang)避免細(xi)菌(jun)汙染。細(xi)菌(jun)菌(jun)體中除可能含(han)有內源(yuan)酶(mei)對(dui)測定產(chan)生非(fei)特異(yi)性(xing)幹(gan)擾(rao)外,還(hai)可能對抗原(yuan)抗體等(deng)蛋白產(chan)生分解(jie)作(zuo)用(yong)。另外標本(ben)在(zai)保存(cun)中出現渾濁或(huo)絮狀(zhuang)物時(shi),應離(li)心沈澱(dian)後取上(shang)清(qing)檢測。
(3)標本(ben)貯(zhu)存時(shi)間(jian)過長(chang) 標本(ben)在(zai)低溫(wen)下(xia)保存(cun)時(shi)間(jian)過長(chang),IgG可聚合(he)成(cheng)多(duo)聚(ju)體,在(zai)間(jian)接(jie)法(fa)ELISA測定中會(hui)導致本(ben)底(di)加(jia)深(shen)、甚(shen)至出現(xian)假(jia)陽性(xing)結(jie)果。通常情況下(xia)血(xue)清標本(ben)可在(zai)2~8℃下(xia)保存(cun)l周,冷(leng)凍保存時(shi)間(jian)會(hui)更長,但對於(yu)抗(kang)體或(huo)抗(kang)原(yuan)含(han)量低的(de)標本(ben)而言,則可能會(hui)因(yin)抗體掉(diao)價(jia)、抗原(yuan)分解(jie)而出(chu)現(xian)假(jia)陰性(xing)結(jie)果。
(4)ELISA試劑(ji)盒(he)標本(ben)凝(ning)固(gu)不全(quan) 血(xue)液(ye)通(tong)常(chang)在(zai)采(cai)集後(hou)半小(xiao)時(shi)後開(kai)始(shi)凝固(gu),8~24h*凝(ning)固(gu)。如果在(zai)血(xue)液(ye)未(wei)凝固(gu)時(shi)即(ji)離(li)心分離(li)血(xue)清,則可因(yin)纖(xian)維(wei)蛋白原(yuan)非(fei)特異(yi)吸附於(yu)微(wei)孔(kong)而造(zao)成(cheng)假(jia)陽性(xing)結(jie)果。為了縮短標本(ben)處(chu)理時(shi)間(jian),可以在(zai)離(li)心前將血(xue)液(ye)標本(ben)置(zhi)於(yu)溫(wen)箱中溫育或(huo)者采(cai)用(yong)帶分離(li)膠(jiao)的(de)或(huo)於(yu)中加(jia)入(ru)適當(dang)的(de)促(cu)凝(ning)劑(ji)以加(jia)速(su)血(xue)清的(de)分離(li)。
(5)冷(leng)凍保存標本(ben)避免反復凍融 標本(ben)的(de)反復凍融會(hui)因(yin)其所(suo)產(chan)生的機械(xie)剪(jian)切(qie)力(li)對標本(ben)中的蛋白等(deng)分子(zi)產(chan)生破壞(huai)作(zuo)用(yong),使(shi)抗(kang)體效(xiao)價(jia)跌(die)落(luo)從而引(yin)起(qi)假(jia)陰性(xing)結(jie)果,ELISA試劑(ji)盒(he)所(suo)以測抗體的(de)血(xue)清標本(ben)如需保存作(zuo)多(duo)次(ci)檢測,宜少(shao)量(liang)分裝(zhuang)凍存。此(ci)外,標本(ben)在(zai)凍存時(shi)會(hui)因(yin)蛋白質(zhi)局(ju)部濃縮,分布(bu)不均(jun),因(yin)此(ci)重新融解(jie)的(de)標本(ben)必須(xu)混勻,但不要(yao)進行(xing)劇(ju)烈振蕩,反復顛(dian)倒(dao)即(ji)可。
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