小鼠(shu)嗜(shi)酸性粒細(xi)胞陽(yang)離子(zi)蛋白(bai)(ECP)ELISA試(shi)劑盒(he)反應步(bu)驟:
()嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)試(shi)劑(ji)說(shuo)明書進(jin)行(xing)操作。操作前將(jiang)試劑(ji)在(zai)室溫下平衡(heng)30~60min。
(2)加(jia)樣後(hou)及(ji)時(shi)放人孵箱。標(biao)本較(jiao)多時(shi),要(yao)分(fen)批(pi)操作。按(an)說(shuo)明(ming)步(bu)驟嚴(yan)格(ge)控(kong)制(zhi)操作時(shi)間(jian),防(fang)止孵育(yu)時(shi)間(jian)人為(wei)延長(chang),導(dao)致非(fei)特異(yi)性結合緊(jin)附於(yu)反應孔(kong)周圍(wei),難以清(qing)洗*。
(3)封(feng)板(ban)溫育(yu)時(shi),各孔壹(yi)定要(yao)封(feng)嚴(yan),防(fang)止陽(yang)性標(biao)本的(de)液(ye)體蒸發,產生(sheng)周邊(bian)現象(xiang)從(cong)而導(dao)致“花(hua)板(ban)"的出現。
(4)用(yong)洗板(ban)機洗板(ban)時(shi),保證(zheng)洗液(ye)註滿各孔,洗板(ban)針(zhen)暢(chang)通(tong),洗完(wan)板(ban)後(hou)在(zai)吸水(shui)紙(zhi)(選擇幹(gan)凈、無或(huo)少(shao)塵的吸水(shui)材料)上(shang)輕(qing)輕(qing)拍(pai)幹(gan):還要(yao)防(fang)止針(zhen)口有纖維(wei)蛋白(bai)或(huo)異(yi)物,ELISA試(shi)劑盒(he)這些(xie)異(yi)物在(zai)洗板(ban)的過程(cheng)中(zhong)易產生(sheng)拖帶(dai)現象(xiang)而(er)導(dao)致“花(hua)板(ban)"的出現。
(5)合理(li)安(an)排檢測(ce)量,以免反(fan)應板(ban)過多造成(cheng)洗板(ban)等待時(shi)間(jian)長(chang)。
(6)加(jia)酶(mei)試劑(ji)後(hou)用(yong)吸水(shui)紙(zhi)在酶(mei)標(biao)板(ban)表面(mian)輕(qing)拭吸幹(gan)。
(7)顯色劑(ji)盡量在臨用(yong)前(qian)配(pei)制,堅(jian)持(chi)不用過期(qi)顯色劑(ji),肉(rou)眼(yan)可(ke)見淺(qian)藍色(se)的(de)TMB顯色劑(ji)不用。
(8)加(jia)樣時(shi)保持(chi)顯色劑(ji)不外流;A、B液(ye)應避免接(jie)觸(chu)金(jin)屬器(qi)械(xie)。加(jia)終(zhong)止(zhi)液(ye)時(shi)應避免產生(sheng)氣泡。
(9)應保(bao)證(zheng)酶(mei)標(biao)板(ban)清潔(jie),整(zheng)個(ge)操作過程(cheng)中(zhong)保證(zheng)酶(mei)標(biao)板(ban)不接觸(chu)次(ci)氯酸(suan)。以上(shang)的措(cuo)施可(ke)以使“花板(ban)"降(jiang)至(zhi)zui低(di)限度。ELISA試劑盒(he)豚鼠(shu)從(cong)而(er)提(ti)高(gao)檢(jian)測(ce)的特(te)異性。並得(de)到更準確、可(ke)靠的(de)實(shi)驗(yan)結果。
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