人3-硝(xiao)基(ji)ELISA檢(jian)測(ce)試劑盒樣本實(shi)驗(yan)前準備(bei)

人(ren)3-硝基(ji)ELISA檢(jian)測(ce)試劑盒樣本實(shi)驗(yan)前準備(bei)：

ELISA試劑盒液(ye)體(ti)樣本：包(bao)括血(xue)清、血(xue)漿、尿液(ye)、胸(xiong)腹水(shui)、腦(nao)脊液(ye)、細(xi)胞(bao)培養(yang)上(shang)清等。
（）血(xue)清
室溫血(xue)液(ye)自然(ran)凝固0-20分(fen)鐘後，離心20分(fen)鐘左右（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上清。保存(cun)過(guo)程中如(ru)有(you)沈(chen)澱(dian)形(xing)成(cheng)，應(ying)再(zai)次離心。
（2）血(xue)漿：
應(ying)根據(ju)標(biao)本的要(yao)求選(xuan)擇(ze)EDTA、檸(ning)檬(meng)酸鈉或肝素作為(wei)抗凝(ning)劑(ji)，混(hun)合(he)0-20分鐘後，離心20分(fen)鐘左右（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上清。保存(cun)過(guo)程中如(ru)有(you)沈(chen)澱(dian)形(xing)成(cheng)，應(ying)再(zai)次離心。
（3）尿液(ye)：
用無(wu)菌(jun)管(guan)收集(ji)。離心20分(fen)鐘左右（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上清。保存(cun)過(guo)程中如(ru)有(you)沈(chen)澱(dian)形(xing)成(cheng)，應(ying)再(zai)次離心。胸(xiong)腹水(shui)、腦(nao)脊液(ye)參照(zhao)此(ci)實(shi)行。
（4）細(xi)胞(bao)培養(yang)上(shang)清：
檢(jian)測(ce)分(fen)泌(mi)性的成(cheng)份(fen)時，用無(wu)菌(jun)管(guan)收集(ji)。離心20分(fen)鐘左右（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上清。
（5）培養(yang)細(xi)胞
檢(jian)測(ce)細(xi)胞(bao)內的成(cheng)份(fen)時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋(shi)細胞懸液，細胞濃(nong)度達(da)到(dao)00萬(wan)/ml左右。通過(guo)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)或加入(ru)組織蛋(dan)白(bai)萃(cui)取(qu)試劑，以(yi)使細(xi)胞(bao)破(po)壞並(bing)放(fang)出(chu)細(xi)胞(bao)內(nei)成(cheng)份。離心20分(fen)鐘左右（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上清。保存(cun)過(guo)程中如(ru)有(you)沈(chen)澱(dian)形(xing)成(cheng)，應(ying)再(zai)次離心。
（6）組織標(biao)本
切割標(biao)本後，稱取重(zhong)量(liang)。加(jia)入壹定(ding)量(liang)的(de)PBS，PH7.4。用液氮迅速(su)冷(leng)凍(dong)保存(cun)備(bei)用。標(biao)本融(rong)化後仍(reng)然(ran)保持(chi)2-8℃的溫度。加(jia)入壹(yi)定(ding)量(liang)的(de)PBS（PH7.4），或組織蛋(dan)白(bai)萃(cui)取(qu)試劑, 用手(shou)工(gong)或勻漿器(qi)將標(biao)本勻漿化。離心20分(fen)鐘左右（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上清。分裝(zhuang)後(hou)壹份(fen)待(dai)檢(jian)測(ce)，其(qi)余(yu)冷凍(dong)備(bei)用。