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小鼠(shu)網(wang)膜(mo)素(su)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)樣(yang)本(ben)處(chu)理及要(yao)求(qiu):
. 血(xue)清(qing):室(shi)溫血液自(zi)然凝(ning)固(gu)0-20分(fen)鐘(zhong),離心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左右(you)(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收集(ji)上清,保存過程(cheng)中如出現沈澱,應再次(ci)離心(xin)。
2. 血(xue)漿(jiang):應根據(ju)標(biao)本(ben)的(de)要(yao)求(qiu)選擇(ze)EDTA或(huo)檸(ning)檬酸鈉作為(wei)抗(kang)凝(ning)劑(ji),混(hun)合(he)0-20分鐘(zhong)後(hou),離心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左右(you)(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收集(ji)上清,保存過程(cheng)中如有(you)沈澱形成(cheng),應該再(zai)次離心(xin)。
3. 尿液:用無菌(jun)管(guan)收(shou)集(ji),離心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左右(you)(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收集(ji)上清,保存過程(cheng)中如有(you)沈澱形成(cheng),應再次(ci)離心(xin)。胸腹水(shui)、腦(nao)脊(ji)液(ye)參照實(shi)行。
4. 細胞培養(yang)上清:檢測(ce)分(fen)泌(mi)性的(de)成(cheng)份(fen)時,用無菌(jun)管(guan)收(shou)集(ji)。離心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左右(you)(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收集(ji)上清。檢測(ce)細胞內的(de)成(cheng)份(fen)時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸(xuan)液(ye),細胞濃度(du)達(da)到00萬/ml左右(you)。通過反復凍融,以使(shi)細胞破(po)壞並(bing)放(fang)出細胞內成(cheng)份(fen)。離心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左右(you)(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收集(ji)上清。保存過程(cheng)中如有(you)沈澱形成(cheng),應再次(ci)離心(xin)。
5. 組(zu)織(zhi)標(biao)本(ben):切割(ge)標(biao)本(ben)後(hou),稱(cheng)取(qu)重量(liang)。加(jia)入(ru)壹定量(liang)的(de)PBS,PH7.4。用液氮(dan)迅(xun)速(su)冷凍保存備(bei)用。標(biao)本(ben)融化(hua)後(hou)仍(reng)然保持2-8℃的(de)溫(wen)度(du)。加(jia)入(ru)壹定量(liang)的(de)PBS(PH7.4),用手工或(huo)勻漿(jiang)器(qi)將標(biao)本(ben)勻漿(jiang)充(chong)分。離心(xin)20分(fen)鐘(zhong)左右(you)(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收集(ji)上清。分裝後(hou)壹份待檢測(ce),其(qi)余(yu)冷凍備(bei)用。
6. 標(biao)本(ben)采(cai)集(ji)後(hou)盡(jin)早進(jin)行提(ti)取(qu),提(ti)取(qu)按(an)相(xiang)關(guan)文(wen)獻(xian)進(jin)行,提(ti)取(qu)後(hou)應盡(jin)快進(jin)行實(shi)驗(yan)。若不(bu)能馬上進行試(shi)驗(yan),可(ke)將(jiang)標(biao)本(ben)放(fang)於-20℃保存,但應避(bi)免(mian)反復凍融.
7. 不(bu)能檢測(ce)含NaN3的(de)樣(yang)品(pin),因(yin)NaN3抑(yi)制(zhi)辣(la)根過氧化物酶(mei)的(de)(HRP)活(huo)性。
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