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HCV-IgG elisa酶聯(lian)免(mian)疫試(shi)劑盒(he)操(cao)作步驟:
. 取(qu)出(chu)試(shi)劑盒(he),室(shi)溫(wen)(20-25℃)放置 30 分(fen)鐘。
2. 分(fen)組(zu):取(qu)出(chu) 96 孔板(ban),根據(ju)待(dai)測(ce)樣品數量加(jia)上標(biao)準品的數(shu)量決(jue)定(ding)所需的板(ban)條數(shu),把(ba)剩(sheng)余的板(ban)條繼續冷藏處理(li)。分別(bie)設標準品組(zu)(6 個濃(nong)度(du))、空白孔、待(dai)測(ce)樣品組(zu)。
註:為(wei)減少實驗(yan)誤差,保(bao)證準確性,建議設置復(fu)孔。
3. 加(jia)樣:依(yi)照(zhao)標準品的順(shun)序(xu)分(fen)別(bie)加(jia)入(ru) 00ul 的(de)標準品溶液(ye)於空(kong)白(bai)微(wei)孔中(zhong);空(kong)白對(dui)照(zhao)孔加(jia)入(ru) 00ul 的蒸餾(liu)水(shui);其余(yu)微(wei)孔中(zhong)加(jia)入00ul 的(de)待(dai)測(ce)樣本(ben)。
4. 加(jia)酶標溶液(ye):標準品組(zu)、待測樣本(ben)組(zu)各(ge)孔中(zhong)加(jia)入 50ul 的(de)酶標溶液(ye)(空白(bai)對照(zhao)孔除外(wai))。
5. 溫(wen)育:酶標板(ban)用封(feng)板(ban)紙密(mi)封(feng)後,放入濕盒內(nei)於 37℃恒(heng)溫(wen)孵育(yu) 小時。
6. 洗(xi)板(ban):用稀釋(shi)後的(de)洗(xi)滌液(ye)註滿每孔,靜(jing)置 5-30s,充(chong)分清洗(xi)酶標板(ban) 5 次,用(yong)吸水(shui)紙*拍幹(gan)。
7. 顯色(se):各(ge)孔加(jia)入(ru)顯色(se)劑 A 液(ye) 50ul 後,再(zai)加(jia)入(ru)顯色(se)劑 B 液(ye) 50ul。
8. 終(zhong)止:25-37℃下避光(guang)反(fan)應(ying) 0-5 分(fen)鐘(zhong),加(jia)入 50ul 終止液。
9. 讀(du)板(ban):在 450nm 波長(chang)讀(du)取(qu)各(ge)孔的(de) OD 值(zhi)。
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