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          海魚(yu)分(fen)枝桿(gan)菌(jun)探(tan)針法(fa)熒(ying)光定量(liang)PCR檢(jian)測(ce)試劑盒RNA質量檢(jian)測(ce)

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          海魚(yu)分(fen)枝桿(gan)菌(jun)探(tan)針法(fa)熒(ying)光定量(liang)PCR檢(jian)測(ce)試劑盒RNA質量檢(jian)測(ce):
          )紫(zi)外(wai)吸(xi)收法(fa)測(ce)定
          先用稀(xi)釋用的TE溶(rong)液(ye)將(jiang)分(fen)光光度計(ji)調零。然(ran)後取(qu)少(shao)量RNA溶(rong)液(ye)用TE稀(xi)釋(:00)後(hou),讀取(qu)其(qi)在(zai)分(fen)光光度計(ji)260nm和280nm處的吸(xi)收值,測(ce)定RNA溶(rong)液(ye) 濃(nong)度和純度。
          濃(nong)度(du)測(ce)定
          A260下讀值為(wei)表示40 g RNA/ml。樣品(pin)RNA濃度(du)(g/ml)計(ji)算公(gong)式(shi)為(wei):A260 ×稀釋倍(bei)數(shu)× 40 g/ml。具體計(ji)算如(ru)下:
          RNA溶(rong)於(yu)40 l DEPC水(shui)中,取(qu)5ul,:00稀釋至(zhi)495的TE中,測(ce)得(de)A260 = 0.2
          RNA 濃度(du)= 0.2 ×00 ×40 g/ml = 840 g/ml 或(huo) 0.84 g
          取(qu)5ul用來(lai)測(ce)量(liang)以後(hou),剩(sheng)余(yu)樣品(pin)RNA為(wei)35 l,剩(sheng)余(yu)RNA總(zong)量為(wei):
          35 l × 0.84 gl = 29.4 g
          ②純度檢(jian)測(ce)
          RNA溶(rong)液(ye)的A260/A280的比(bi)值即為(wei)RNA純度,比(bi)值範圍(wei).8到2.。
          2)變性瓊脂(zhi)糖(tang)凝膠電(dian)泳測(ce)定
          ①制(zhi)膠(jiao)
          g瓊脂(zhi)糖溶(rong)於(yu)72ml水(shui)中,冷(leng)卻(que)至60℃,0 ml的0× MOPS電(dian)泳緩沖(chong)液(ye)和8 ml的37% (2.3 M)。
          0×MOPS電(dian)泳緩沖(chong)液(ye)
          濃(nong)度 成(cheng)分(fen)
          0.4M MOPS,pH 7.0
          0.M 乙(yi)酸鈉(na)
          0.0M EDTA
          灌(guan)制凝膠板,預留加(jia)樣(yang)孔(kong)至少(shao)可(ke)以加(jia)入25 l溶(rong)液(ye)。膠(jiao)凝後取(qu)下梳子(zi),將(jiang)凝膠板放(fang)入電(dian)泳槽內,加(jia)足量的×MOPS電(dian)泳緩沖(chong)液(ye)至(zhi)覆(fu)蓋膠(jiao)面(mian)幾(ji)個毫(hao)米。

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