小(xiao)鼠(shu)肺泡上(shang)皮(pi)細胞(bao)培養方(fang)法(fa)

 小鼠(shu)肺泡上(shang)皮(pi)細胞(bao)培養方(fang)法(fa)：

、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：細胞(bao)密(mi)度(du)達(da)到(dao)80-90%時(shi)即(ji)可傳(chuan)代(dai)
①棄去培養上(shang)清，用(yong)PBS或生(sheng)理(li)鹽水(shui)清洗-2次(ci)；
②加入(ru)2ml0.25%（T25瓶），使(shi)覆(fu)蓋整個(ge)瓶或皿，蓋好放(fang)入(ru)培養箱消(xiao)化；
③-2min後，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)，若(ruo)大(da)部分細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)且有少量細胞(bao)脫(tuo)落(luo)，輕輕吹打下(xia)確(que)認(ren)消(xiao)化情況(kuang)後加入(ru)*培養基終(zhong)止消化；若細胞(bao)還(hai)是(shi)貼(tie)壁(bi)，放(fang)回(hui)培養箱繼(ji)續(xu)消化至可以輕輕吹打下(xia)為止；
④將細胞(bao)懸(xuan)液(ye)000RPM左右條(tiao)件下(xia)離心(xin)4min，棄上(shang)清；
⑤用(yong)新(xin)鮮(xian)培養基重(zhong)懸(xuan)後加入(ru)培養瓶或皿中(zhong)，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸(xuan)浮(fu)細胞(bao)直(zhi)接(jie)離心(xin)收集，細胞(bao)沈澱(dian)重(zhong)懸(xuan)後分到(dao)新(xin)培養瓶中(zhong)。
2、細胞(bao)復(fu)蘇：
①將凍存管(guan)在(zai)37℃溫(wen)水(shui)中(zhong)快(kuai)速搖(yao)晃(huang)融(rong)化，時(shi)間min左右，加入(ru)4-5ml培養基混(hun)勻(yun)。
②在(zai)000RPM左右條(tiao)件下(xia)離心(xin)4min，棄上(shang)清,加-2ml培養基吹勻(yun)，將細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入(ru)培養瓶中(zhong)，補(bu)加適量培養基。
3、細(xi)胞(bao)凍存：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態良好時(shi)進(jin)行細胞(bao)凍存保(bao)種
①棄去培養上(shang)清，用(yong)PBS或生(sheng)理(li)鹽水(shui)清洗-2次(ci)，加入(ru)mL 0.25%（T25瓶）
②-2min後(hou)，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)，大(da)部(bu)分細胞(bao)回(hui)縮(suo)且有少量細胞(bao)脫(tuo)落(luo)，輕輕吹打下(xia)確(que)認(ren)消(xiao)化情況(kuang)後加入(ru)*培養基終(zhong)止消化；
③將細胞(bao)懸(xuan)液(ye)000RPM左右條(tiao)件下(xia)離心(xin)4min，棄上(shang)清，加ml凍存液(ye)重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)；
④將凍存管(guan)放(fang)入(ru)程序(xu)降(jiang)溫(wen)盒(he)，放(fang)入(ru)-80℃冰箱，4小(xiao)時(shi)後將凍存管(guan)轉入(ru)液氮(dan)罐(guan)儲存。

A2780/TAXOL人(ren)卵(luan)巢(chao)癌耐藥株
LOVO/ADR人(ren)結(jie)腸癌耐藥株
HCT-8/VCR人(ren)結(jie)腸癌長春(chun)新(xin)堿(jian)耐藥細(xi)胞(bao)株
PATU8988/FU人(ren)胰(yi)腺癌氟耐藥株
Hela/TAXOL人(ren)宮(gong)頸(jing)癌耐藥細(xi)胞(bao)株
Bxpc3/DDP人(ren)胰(yi)腺腫瘤耐藥株
Hela/DDP人(ren)宮(gong)頸(jing)癌耐藥株
CNE2/DDP人(ren)鼻咽(yan)癌耐藥株
A375/DDP人(ren)惡性(xing)黑色素瘤耐藥株
HT-29/DDP人(ren)結(jie)直(zhi)腸(chang)腺癌耐藥株
SMMC772/DDP人(ren)肝(gan)癌耐藥株
SK-MES-/DDP人(ren)肺鱗癌耐藥株
T-24/DDP人(ren)膀(pang)胱移(yi)行細胞(bao)癌耐細胞(bao)株
A549/DDP人(ren)肺癌耐藥株
SGC790/DDP人(ren)胃(wei)癌耐藥株
K562/ADR人(ren)白血病(bing)耐藥株
A549/TAXOL人(ren)肺癌耐藥株
MCF7/Taxol人(ren)乳(ru)腺癌耐藥株
SMMC-772/Sorafenib人(ren)肝(gan)癌索拉非(fei)尼(ni)耐藥株
Huh-7/Sorafenib人(ren)肝(gan)癌索拉非(fei)尼(ni)耐藥株
A549/耐藥株人(ren)肺癌耐藥株
SGC790/V人(ren)胃(wei)癌長春(chun)新(xin)堿(jian)耐藥
A2780/V人(ren)卵(luan)巢(chao)癌長春(chun)新(xin)堿(jian)耐藥株
HCT8/V人(ren)結(jie)腸癌長春(chun)新(xin)堿(jian)耐藥株
HL-60/Adr人(ren)白血病(bing)耐藥株
K562/Adr人(ren)白血病(bing)耐藥株
A2780/Adr人(ren)卵(luan)巢(chao)癌耐藥株