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小(xiao)鼠顱(lu)蓋(gai)成纖維細(xi)胞;OP9細(xi)胞株源自(zi)新(xin)生(sheng)的op/op 小鼠顱蓋(gai)。因(yin)編(bian)碼(ma)M-CSF的基因(yin)中(zhong)的壹個突(tu)變(bian),它(ta)不能生成有功能的巨噬細(xi)胞克隆刺(ci)激(ji)因(yin)子(zi)(M-CSF)。M-CSF的存在對(dui)胚胎(tai)幹(gan)細(xi)胞(ES)分(fen)化(hua)成血細(xi)胞而(er)不是其他巨噬細(xi)胞有抑制(zhi)功(gong)能。 OP9細(xi)胞可(ke)以(yi)用於(yu)與(yu)小鼠胚胎幹(gan)細(xi)胞共(gong)培養(yang)以誘(you)導胚胎幹細(xi)胞分(fen)化(hua)成成紅血球(qiu)來(lai)源的、骨髓(sui)來(lai)源的和(he)B細(xi)胞譜(pu)系的血細(xi)胞。與(yu)OP9共培養(yang)不需要外(wai)源的生長因(yin)子(zi)或復雜(za)的胚胎結(jie)構。這個系統(tong)對(dui)研究(jiu)造(zao)血細(xi)胞的發育和(he)分(fen)化(hua)的分(fen)子(zi)機(ji)理有用。
小(xiao)鼠顱(lu)蓋(gai)成纖維細(xi)胞;OP9培養(yang)註意(yi)事項:
. 收(shou)到細(xi)胞後首先觀察(cha)細(xi)胞瓶(ping)是否(fou)完(wan)好,培養(yang)液是(shi)否(fou)有漏液、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象(xiang),若有上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang)發生(sheng)請及(ji)時和(he)我們(men)。
2. 仔(zai)細(xi)閱讀細(xi)胞說(shuo)明(ming)書,了解(jie)細(xi)胞相關(guan)信(xin)息(xi),如(ru)細(xi)胞形(xing)態(tai)、所(suo)用培養(yang)基、血清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需細(xi)胞因(yin)子(zi)等。
3. 用75%酒(jiu)精(jing)擦拭細(xi)胞瓶(ping)表(biao)面(mian),顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞狀態(tai)。因(yin)運輸問題(ti)貼壁細(xi)胞會(hui)有少量(liang)從(cong)瓶(ping)壁脫(tuo)落(luo),將細(xi)胞置於培養(yang)箱(xiang)內(nei)靜置培養(yang)過夜(ye),隔(ge)天(tian)再(zai)取(qu)出(chu)觀察(cha)。此時多數(shu)細(xi)胞均(jun)會(hui)貼壁,若細(xi)胞仍(reng)不能貼壁請用(yong)臺盼藍(lan)染色測定(ding)細(xi)胞活(huo)力(li),如(ru)果(guo)證(zheng)實(shi)細(xi)胞活(huo)力(li)正(zheng)常(chang),請將細(xi)胞離(li)心(xin)後用(yong)新鮮培養(yang)基再(zai)次(ci)貼壁培養(yang);如(ru)果(guo)染色結(jie)果(guo)顯(xian)示(shi)細(xi)胞無活力(li),請(qing)拍下(xia)照(zhao)片及(ji)時和(he)我們(men),信(xin)息(xi)確(que)認(ren)後我們(men)為(wei)您再(zai)免費(fei)寄(ji)送壹次。
4. 建議(yi)客(ke)戶(hu)收到細(xi)胞後前(qian)3天各拍幾(ji)張細(xi)胞照(zhao)片,記(ji)錄(lu)細(xi)胞狀態(tai),便(bian)於和(he)技(ji)術部(bu)溝(gou)通(tong)交流。
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