,25二(er)羥基檢測試(shi)劑盒操(cao)作步驟(zhou)

,25二(er)羥基檢測試(shi)劑盒操(cao)作步驟(zhou)：

. 標準(zhun)品(pin)的(de)稀釋(shi)與(yu)加樣(yang)：在酶標包(bao)被(bei)板(ban)上(shang)設(she)標準(zhun)品(pin)孔(kong)0孔(kong)，在di壹、第二(er)孔(kong)中分(fen)別加標準(zhun)品(pin)00μl，然(ran)後在di壹、第二(er)孔(kong)中加標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye)50μl，混勻；然(ran)後從(cong)di壹孔(kong)、第二(er)孔(kong)中各取(qu)00μl分(fen)別加到(dao)第三(san)孔(kong)和第四(si)孔，再(zai)在第三(san)、第四(si)孔分(fen)別加標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye)50μl，混勻；然(ran)後在第三(san)孔(kong)和第四(si)孔中先(xian)各取(qu)50μl棄(qi)掉，再(zai)各取(qu)50μl分(fen)別加到(dao)第五(wu)、第六(liu)孔(kong)中，再在第五(wu)、第六(liu)孔(kong)中分(fen)別加標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye)50ul，混勻；混(hun)勻(yun)後從(cong)第五(wu)、第六(liu)孔(kong)中各取(qu)50μl分(fen)別加到(dao)第七(qi)、第八(ba)孔(kong)中，再在第七(qi)、第八(ba)孔(kong)中分(fen)別加標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye)50μl，混勻後(hou)從(cong)第七(qi)、第八(ba)孔(kong)中分(fen)別取(qu)50μl加到(dao)第九(jiu)、第十孔中，再在第九(jiu)第十孔分(fen)別加標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye)50μl，混勻後(hou)從(cong)第九(jiu)第十孔中各取(qu)50μl棄(qi)掉。（稀釋(shi)後(hou)各孔(kong)加樣(yang)量都(dou)為50μl，濃度分(fen)別為80 ng/L，20 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，5 ng/L）。

2. 加樣(yang)：分(fen)別設(she)空白(bai)孔(kong)（空白(bai)對(dui)照孔(kong)不加樣(yang)品(pin)及(ji)酶標試劑，其(qi)余(yu)各步操(cao)作相(xiang)同）、待測樣品(pin)孔(kong)。在酶標包(bao)被(bei)板(ban)上(shang)待測樣品(pin)孔(kong)中先(xian)加樣(yang)品(pin)稀釋(shi)液(ye)40μl，然(ran)後再(zai)加待測樣品(pin)0μl（樣(yang)品(pin)最(zui)終(zhong)稀釋(shi)度(du)為5倍）。加樣(yang)將樣(yang)品(pin)加於(yu)酶標板(ban)孔(kong)底部(bu)，盡(jin)量不觸及(ji)孔(kong)壁，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動(dong)混勻(yun)。

3. 溫(wen)育(yu)：用封(feng)板(ban)膜(mo)封(feng)板(ban)後(hou)置(zhi)37℃溫(wen)育(yu)30分(fen)鐘。

4. 配(pei)液(ye)：將30（48T的(de)20倍）倍濃縮(suo)洗(xi)滌液(ye)用蒸(zheng)餾水(shui)30（48T的20倍）倍稀釋(shi)後(hou)備用。

5. 洗(xi)滌：小(xiao)心揭掉封(feng)板(ban)膜(mo)，棄(qi)去(qu)液(ye)體，甩(shuai)幹(gan)，每孔(kong)加滿(man)洗(xi)滌液(ye)，靜(jing)置(zhi)30秒(miao)後棄(qi)去(qu)，如(ru)此重復(fu)5次，拍幹(gan)。

6. 加酶：每孔(kong)加入(ru)酶標試劑50μl，空白(bai)孔(kong)除(chu)外。

7. 溫(wen)育(yu)：操(cao)作同3。

8. 洗(xi)滌：操(cao)作同5。

9. 顯(xian)色(se)：每孔(kong)先(xian)加入(ru)顯(xian)色(se)劑(ji)A50μl，再加入(ru)顯(xian)色(se)劑(ji)B50μl，輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩混勻，37℃避(bi)光(guang)顯(xian)色(se)5分(fen)鐘.

0. 終(zhong)止(zhi)：每孔(kong)加終(zhong)止(zhi)液(ye)50μl，終止(zhi)反(fan)應(ying)（此時藍色(se)立(li)轉(zhuan)黃(huang)色(se)）。

. 測(ce)定：以(yi)空白(bai)空調零(ling)，450nm波(bo)長依序測量各孔(kong)的吸(xi)光度（OD值）。 測(ce)定應(ying)在加終(zhong)止(zhi)液(ye)後5分(fen)鐘。

人(ren)基質(zhi)細胞(bao)衍生因(yin)子(zi)(SDF-)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒

人(ren)B-淋巴細胞(bao)趨化因(yin)子(BLC)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒 

人(ren)趨化因(yin)子CXC配(pei)體6(CXCL6)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒

人(ren)胱(guang)抑(yi)素C(Cys-C)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒

人(ren)(Cyt-C)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒

人(ren)Dickkopf相(xiang)關蛋(dan)白(bai) (DKK)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒

人(ren)二肽(tai)基肽(tai)酶IV(DPP4)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒

人(ren)表皮生長(chang)因(yin)子(EGF)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒

人(ren)表皮生長(chang)因(yin)子受(shou)體(EGFR)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒

人(ren)內分(fen)泌腺(xian)來源的(de)血(xue)管內皮生長(chang)因(yin)子(EG-VEGF)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒 

人(ren)內皮糖蛋白(bai)(ENG)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒

人(ren)內皮抑(yi)制素(su)(ES)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒

人(ren)內皮素(ET-)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒

人(ren)內皮細胞(bao)蛋白(bai)C受(shou)體(EPCR)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒

人(ren)促(cu)紅細(xi)胞(bao)生成素(su)(EPO)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒

人(ren)雕亡相(xiang)關因(yin)子(FAS/CD95)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒 

人(ren)雕亡相(xiang)關因(yin)子配體(FASL/TNFSF6)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒 

人(ren)脂肪(fang)酸(suan)結(jie)合(he)蛋(dan)白(bai)(FABP)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒

人(ren)甲胎(tai)蛋(dan)白(bai)(αFP)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒 

人(ren)酸(suan)性(xing)成纖(xian)維(wei)細胞(bao)生長(chang)因(yin)子(AFGF/FGF)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒

人(ren)氨肽(tai)酶(AAP)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒

人(ren)成纖(xian)維(wei)細胞(bao)生長(chang)因(yin)子9(FGF9)酶聯免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定試(shi)劑(ji)盒