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綿(mian)羊(yang)白(bai)介素2受(shou)體(ti)(IL-2R)elisa試劑盒操(cao)作(zuo)步(bu)驟:
. 標準品的(de)稀(xi)釋(shi)與(yu)加樣:在酶(mei)標包被板(ban)上(shang)設標準品孔(kong)0孔(kong),在di壹(yi)、第二孔(kong)中(zhong)分別(bie)加(jia)標準品00μl,然(ran)後(hou)在di壹(yi)、第二孔(kong)中(zhong)加(jia)標準品稀(xi)釋(shi)液50μl,混勻(yun);然(ran)後(hou)從(cong)di壹(yi)孔、第(di)二孔(kong)中(zhong)各(ge)取00μl分別(bie)加(jia)到(dao)第(di)三(san)孔(kong)和(he)第四(si)孔,再(zai)在第(di)三、第四(si)孔分別(bie)加(jia)標準品稀(xi)釋(shi)液50μl,混勻(yun);然(ran)後(hou)在第(di)三孔和(he)第四(si)孔中(zhong)先各取(qu)50μl棄(qi)掉(diao),再(zai)各(ge)取(qu)50μl分別(bie)加(jia)到(dao)第(di)五、第六(liu)孔中(zhong),再(zai)在第(di)五、第六(liu)孔中(zhong)分別(bie)加(jia)標準品稀(xi)釋(shi)液50ul,混勻(yun);混勻(yun)後(hou)從(cong)第(di)五、第六(liu)孔中(zhong)各取50μl分別(bie)加(jia)到(dao)第(di)七(qi)、第(di)八(ba)孔(kong)中,再(zai)在第(di)七、第八(ba)孔(kong)中分別(bie)加(jia)標準品稀(xi)釋(shi)液50μl,混勻(yun)後(hou)從(cong)第(di)七、第(di)八(ba)孔(kong)中分別(bie)取(qu)50μl加到(dao)第(di)九(jiu)、第(di)十孔中,再(zai)在第(di)九第十孔分別(bie)加(jia)標準品稀(xi)釋(shi)液50μl,混勻(yun)後(hou)從(cong)第(di)九第(di)十孔中各(ge)取(qu)50μl棄(qi)掉(diao)。(稀(xi)釋(shi)後(hou)各(ge)孔(kong)加樣量都(dou)為(wei)50μl,濃度分別(bie)為(wei)80 ng/L,20 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,5 ng/L)。
2. 加樣:分別(bie)設(she)空(kong)白(bai)孔(空(kong)白(bai)對照(zhao)孔不加樣品及(ji)酶(mei)標試劑,其余(yu)各步(bu)操作(zuo)相(xiang)同)、待測樣品孔(kong)。在酶(mei)標包被板(ban)上(shang)待測樣品孔(kong)中(zhong)先加樣品稀(xi)釋(shi)液40μl,然後(hou)再(zai)加(jia)待測樣品0μl(樣品最(zui)終稀(xi)釋(shi)度為(wei)5倍)。加(jia)樣將(jiang)樣品加(jia)於(yu)酶標板孔底(di)部,盡(jin)量不(bu)觸及孔(kong)壁(bi),輕(qing)輕(qing)晃(huang)動(dong)混勻(yun)。
3. 溫(wen)育:用(yong)封板(ban)膜(mo)封板(ban)後(hou)置37℃溫(wen)育30分鐘(zhong)。
4. 配(pei)液:將(jiang)30(48T的(de)20倍)倍濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌(di)液用蒸(zheng)餾水(shui)30(48T的(de)20倍(bei))倍(bei)稀(xi)釋(shi)後(hou)備(bei)用(yong)。
5. 洗(xi)滌(di):小心(xin)揭(jie)掉(diao)封板(ban)膜(mo),棄(qi)去(qu)液體,甩(shuai)幹,每孔(kong)加(jia)滿(man)洗(xi)滌(di)液,靜置30秒(miao)後(hou)棄(qi)去(qu),如(ru)此重(zhong)復(fu)5次(ci),拍幹(gan)。
6. 加酶:每孔(kong)加(jia)入酶標試劑50μl,空(kong)白(bai)孔除(chu)外。
7. 溫(wen)育:操(cao)作(zuo)同3。
8. 洗(xi)滌(di):操作(zuo)同5。
9. 顯色:每孔(kong)先加入顯色劑A50μl,再(zai)加(jia)入顯色劑B50μl,輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩混勻(yun),37℃避(bi)光顯色5分鐘(zhong).
0. 終(zhong)止:每孔(kong)加(jia)終(zhong)止液50μl,終止反(fan)應(ying)(此時藍色立轉(zhuan)黃色)。
. 測定(ding):以(yi)空(kong)白(bai)空(kong)調(tiao)零(ling),450nm波(bo)長依序(xu)測量各(ge)孔(kong)的吸(xi)光度(OD值)。 測定應(ying)在加(jia)終止液後(hou)5分鐘(zhong)。
過氧化(hua)物酶(mei)(GPX)微(wei)量法(fa)0.2g或(huo)者0.2mL
硫(liu)氧(yang)還蛋白(bai)過氧化(hua)物酶(mei)(TPX)微(wei)量法(fa)0.2g或(huo)者0.2mL
S-轉移(yi)酶(GST)微(wei)量法(fa)0.2g或(huo)者0.2mL
還原(yuan)酶(GR)微(wei)量法(fa)0.2g或(huo)者0.2mL
硫(liu)氧(yang)還蛋白(bai)氧化(hua)還原(yuan)酶(mei)(TrxR)微量法(fa)0.2g或(huo)者0.2mL
γ-谷(gu)氨酰(xian)半連(lian)接酶(mei)(GCL)微量法(fa)0.2g或(huo)者0.2mL
γ-谷(gu)氨酰(xian)轉(zhuan)肽(tai)酶(mei)(γ-GT)活(huo)性(xing)測定(ding)微量法(fa)0.2g或(huo)者0.2mL
抗壞(huai)血(xue)酸(suan)(AsA)含(han)量微(wei)量法(fa)0.2g或(huo)者0.2mL
脫氫抗壞(huai)血(xue)酸(suan)(DHA)含(han)量微(wei)量法(fa)0.2g或(huo)者0.2mL
L-半乳(ru)糖(tang)苷(gan)-,4-內酯脫氫酶(Gal LDH)微量法(fa)0.2g或(huo)者0.2mL
抗壞(huai)血(xue)酸(suan)氧(yang)化酶(mei)(AAO)活(huo)性(xing)測定(ding)微量法(fa)0.2g或(huo)者0.2mL
抗壞(huai)血(xue)酸(suan)過氧化(hua)物酶(mei)(APX)測(ce)定(ding)微(wei)量法(fa)0.2g或(huo)者0.2mL
單(dan)脫氫抗壞(huai)血(xue)酸(suan)還(hai)原酶(mei)(MDHAR)微(wei)量法(fa)0.2g或(huo)者0.2mL
脫氫抗壞(huai)血(xue)酸(suan)還(hai)原酶(mei)(DHAR)活(huo)性(xing)測定(ding)微量法(fa)0.2g或(huo)者0.2mL
二胺(an)氧(yang)化(hua)酶(DAO)測試盒(he)微量法(fa)0.2g或(huo)者0.2mL
銅藍蛋白(bai)(Cp)含量測(ce)試(shi)盒微(wei)量法(fa)0.2g或(huo)者0.2mL
植物(wu)總(zong)酚(fen)(Tp)測試(shi)盒(he)微(wei)量法(fa)0.5g或(huo)者0.2mL
植物(wu)原花(hua)青(qing)素(OPC)測試(shi)盒(he)微量法(fa)0.5g或(huo)者0.2mL
尿(niao)酸(suan)(UA)含量測(ce)試(shi)盒微(wei)量法(fa)0.2g或(huo)者0.2mL
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