人黏(nian)著(zhe)斑(ban)激(ji)酶(mei)（FAK）elisa試劑(ji)盒(he)​操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)

人黏(nian)著(zhe)斑(ban)激(ji)酶(mei)(FAK)elisa試劑(ji)盒(he)操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)：

. 標準(zhun)品的(de)稀釋(shi)與加(jia)樣：在酶(mei)標(biao)包(bao)被板(ban)上設標準品孔(kong)0孔(kong)，在(zai)di壹、第(di)二(er)孔(kong)中分(fen)別加(jia)標(biao)準品00μl，然後(hou)在(zai)di壹(yi)、第(di)二(er)孔(kong)中加標準品稀釋(shi)液50μl，混勻；然後(hou)從(cong)di壹孔(kong)、第(di)二(er)孔(kong)中各(ge)取00μl分(fen)別加(jia)到第(di)三(san)孔(kong)和(he)第(di)四孔(kong)，再(zai)在第(di)三(san)、第(di)四孔(kong)分(fen)別加(jia)標(biao)準品稀釋(shi)液50μl，混勻；然後(hou)在(zai)第(di)三(san)孔(kong)和(he)第(di)四孔(kong)中先各(ge)取50μl棄掉，再(zai)各(ge)取50μl分(fen)別加(jia)到第(di)五(wu)、第(di)六孔(kong)中，再(zai)在第(di)五(wu)、第(di)六孔(kong)中分(fen)別加(jia)標(biao)準品稀釋(shi)液50ul，混勻；混(hun)勻後(hou)從(cong)第(di)五(wu)、第(di)六孔(kong)中各(ge)取50μl分(fen)別加(jia)到第(di)七、第(di)八孔(kong)中，再(zai)在第(di)七、第(di)八孔(kong)中分(fen)別加(jia)標(biao)準品稀釋(shi)液50μl，混勻後(hou)從(cong)第(di)七、第(di)八孔(kong)中分(fen)別取50μl加(jia)到第(di)九(jiu)、第(di)十(shi)孔(kong)中，再(zai)在第(di)九(jiu)第(di)十(shi)孔(kong)分(fen)別加(jia)標(biao)準品稀釋(shi)液50μl，混勻後(hou)從(cong)第(di)九(jiu)第(di)十(shi)孔(kong)中各(ge)取50μl棄掉。（稀釋(shi)後(hou)各(ge)孔(kong)加(jia)樣量都(dou)為50μl，濃(nong)度分(fen)別為80 ng/L，20 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，5 ng/L）。

2. 加(jia)樣：分(fen)別設空白孔(kong)（空(kong)白對照孔(kong)不(bu)加樣品及酶標(biao)試劑(ji)，其(qi)余各(ge)步操(cao)作(zuo)相(xiang)同(tong)）、待測樣品孔(kong)。在(zai)酶標包(bao)被板(ban)上待測樣品孔(kong)中先加樣品稀釋(shi)液40μl，然後(hou)再(zai)加待(dai)測樣品0μl（樣品最終(zhong)稀釋(shi)度為5倍(bei)）。加(jia)樣將樣品加於酶標(biao)板(ban)孔(kong)底(di)部(bu)，盡量不(bu)觸(chu)及孔(kong)壁(bi)，輕輕晃(huang)動(dong)混勻。

3. 溫(wen)育(yu)：用封(feng)板(ban)膜封(feng)板(ban)後(hou)置(zhi)37℃溫(wen)育30分(fen)鐘(zhong)。

4. 配液：將30（48T的(de)20倍(bei)）倍(bei)濃(nong)縮洗滌液用蒸(zheng)餾(liu)水30（48T的(de)20倍(bei)）倍(bei)稀釋(shi)後(hou)備用。

5. 洗滌：小心揭(jie)掉封板(ban)膜，棄去液體，甩幹，每孔(kong)加(jia)滿洗滌液，靜(jing)置(zhi)30秒(miao)後(hou)棄去，如(ru)此重復(fu)5次，拍(pai)幹。

6. 加酶(mei)：每孔(kong)加(jia)入酶(mei)標(biao)試劑(ji)50μl，空(kong)白(bai)孔(kong)除外。

7. 溫育：操(cao)作(zuo)同(tong)3。

8. 洗滌：操(cao)作(zuo)同(tong)5。

9. 顯色：每(mei)孔(kong)先(xian)加入顯色劑(ji)A50μl，再(zai)加入顯色劑(ji)B50μl，輕輕震蕩混(hun)勻，37℃避(bi)光(guang)顯色5分(fen)鐘(zhong).

0. 終(zhong)止：每(mei)孔(kong)加(jia)終(zhong)止液50μl，終(zhong)止反(fan)應(ying)（此時藍(lan)色立(li)轉黃色）。

. 測定(ding)：以空白空(kong)調零(ling)，450nm波長(chang)依(yi)序(xu)測量(liang)各(ge)孔(kong)的(de)吸光(guang)度(du)（OD值(zhi)）。 測定(ding)應在加(jia)終(zhong)止液後(hou)5分(fen)鐘(zhong)。

維拉(la)帕(pa)米(mi) 雜(za)質I（V00008

：用於峰鑒別試驗(yan)（Y0000625

（Y000056

（T500000

托(tuo)烷(wan)司瓊(qiong)雜(za)質B： -吲(yin)哚(duo)甲酸(suan)（Y000068

托(tuo)品醇（T2580 00

（T707000

托(tuo)滅(mie)酸(suan)（Y00005

：用於系統(tong)適(shi)用性(xing)試驗(yan)（Y000062

（Y00006

（T2580000

天然生(sheng)育(yu)酚(fen)：用於峰鑒別試驗(yan)（Y0000 8 

（T70000

雜(za)質B（T7000

雜(za)質A（Y0000899

替(ti)諾(nuo)昔(xi)康(kang)（T000800

（Y000068

替可(ke)克(ke)肽(tai)（T0550000

鈉；羧噻吩(fen)鈉(na)（Y000065

雜(za)質A（T2000

替(ti)勃龍(long)：用於系統(tong)適(shi)用性(xing)試驗(yan)（Y0000668

替勃龍(long) - 對照譜(pu)圖（Y000078

特拉唑(zuo)嗪(qin)雜(za)質A（Y0000622

特(te)拉(la)唑(zuo)嗪 雜(za)質N（Y000062

特(te)拉(la)唑(zuo)嗪 雜(za)質L（Y000062 

特(te)拉(la)唑(zuo)嗪 雜(za)質E（Y0000665

特(te)拉(la)唑(zuo)嗪 ：用於系統(tong)適(shi)用性(xing)試驗(yan)（Y0000666

特非(fei)那丁（T007000