ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)實驗(yan)條件(jian)的選擇

　　在(zai)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)實驗(yan)中，選(xuan)擇各種(zhong)實(shi)驗條件(jian)至關(guan)重要(yao)，包(bao)括：

　　壹(yi)、固(gu)相載體的選(xuan)擇：許(xu)多(duo)物(wu)質可以(yi)作(zuo)為固(gu)相載體，如(ru)聚(ju)氯乙(yi)烯(xi)、聚(ju)苯(ben)乙(yi)烯(xi)和(he)聚丙(bing)烯(xi)。酰胺和(he)纖維素(su)等。其形式(shi)可為凹孔平板、試(shi)管、珠(zhu)粒(li)等。目(mu)前(qian)常用(yong)的(de)是40孔聚苯(ben)乙(yi)烯(xi)凹孔板。無(wu)論什麽樣的載(zai)體，在使(shi)用前(qian)都(dou)可以(yi)進(jin)行篩選：用等量的(de)抗原包(bao)，在同(tong)壹實(shi)驗條件(jian)下反應，觀察其顯色反應是(shi)否(fou)均勻(yun)，判(pan)斷(duan)其吸(xi)附(fu)性能(neng)是否(fou)良(liang)好(hao)。

　　二、包(bao)被抗體(或(huo)抗原)的選擇(ze)：將(jiang)抗體(或(huo)抗原)吸(xi)附(fu)在固(gu)相載體表面時，純度好(hao)，吸(xi)附(fu)時壹般要求PH在9.0-9.6之(zhi)間。吸(xi)附(fu)溫(wen)度、時間及其(qi)蛋(dan)白(bai)質量也有壹(yi)定的影(ying)響(xiang)，壹般采(cai)用(yong)4℃、8-24小時。蛋(dan)白(bai)質包(bao)的較佳濃(nong)度需(xu)要滴(di)定：用不(bu)同(tong)的蛋(dan)白(bai)質濃度(du)(0...0和0μg/ml等)包(bao)定後(hou)，在其他(ta)試驗(yan)條件(jian)相同(tong)的情(qing)況下，觀察陽(yang)性標本的(de)OD值(zhi)。選(xuan)擇(ze)OD值較大(da)、蛋(dan)白(bai)量(liang)較少的(de)濃度(du)。大(da)多數蛋(dan)白(bai)質通常為-0μg/ml。

　　三(san)、酶標記抗體工(gong)作(zuo)濃度(du)的(de)選(xuan)擇(ze)：首先(xian)用直(zhi)接ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)法進(jin)行初步效果(guo)的(de)DDT(見酶(mei)標記抗體部分(fen))。然後(hou)固(gu)定其他(ta)條件(jian)或(huo)采(cai)用(yong)方陣法，正(zheng)式實驗(yan)系統正(zheng)確(que)滴(di)下其工(gong)作(zuo)濃度(du)。

　　四、酶的(de)底(di)部物(wu)質和氫化(hua)物質的選(xuan)擇：氫化(hua)物質的選(xuan)擇要(yao)求(qiu)有明(ming)顯(xian)的(de)顯(xian)色反應，但本身沒(mei)有顏(yan)色。有些(xie)氫體(OPD等)具有潛(qian)在致(zhi)癌作(zuo)用(yong)，應註(zhu)意(yi)防(fang)護(hu)。有條(tiao)件(jian)的人(ren)必(bi)須(xu)使用(yong)不(bu)致(zhi)癌、敏感(gan)度(du)高(gao)的氫氣體。例如(ru)TMB和(he)ABTS是目(mu)前(qian)令人(ren)滿意(yi)的(de)氫氣體。底(di)部作(zuo)用(yong)壹(yi)段時間後，應加(jia)強酸(suan)或(huo)強(qiang)堿終(zhong)止反應。通常，底(di)部的(de)作(zuo)用(yong)時間建(jian)議(yi)是0-30分鐘。底(di)部物(wu)質的使(shi)用液(ye)必(bi)須(xu)新(xin)鮮(xian)配制，特別是(shi)在(zai)使(shi)用前加(jia)入過(guo)氧化(hua)氫水。（內(nei)容(rong)僅供(gong)參(can)考，有問(wen)題或(huo)遇到問題請(qing)在線(xian)咨(zi)詢(xun)，我們(men)會竭誠為您(nin)服(fu)務(wu)）