ELISA試(shi)劑盒(he)如(ru)何(he)保(bao)溫

　　elisa試(shi)劑盒(he)中(zhong)通常有兩種(zhong)抗原抗體(ti)反應(ying)，即加(jia)入樣品(pin)和(he)酶(mei)結合(he)物(wu)後的(de)反(fan)應(ying)。抗原抗體(ti)反應(ying)的(de)完成需要(yao)壹定的溫度(du)和時間。這種(zhong)保(bao)溫過(guo)程(cheng)稱為孵(fu)化。有人(ren)稱之為孵(fu)育(yu)，這(zhe)在(zai)elisa試(shi)劑盒(he)中(zhong)似乎(hu)不合(he)適(shi)。

　　elisa屬(shu)於(yu)固相免疫分析，抗原和抗體(ti)的結(jie)合(he)只(zhi)發生在(zai)固(gu)相表面(mian)。以(yi)抗體(ti)包被的三明(ming)治法為例，添加到(dao)板(ban)孔(kong)中(zhong)的(de)抗原不具有固相抗結(jie)合(he)的(de)平等機會(hui)。只有靠近孔(kong)壁的壹層溶液中(zhong)的(de)抗原與(yu)抗體(ti)直接(jie)接(jie)觸(chu)。這是壹個(ge)逐漸平衡(heng)的(de)過(guo)程(cheng)，因此需(xu)要(yao)擴散才(cai)能(neng)達(da)到(dao)反應(ying)的(de)終點(dian)。隨後添加到(dao)固相抗原的酶(mei)標記抗體(ti)的結(jie)合(he)也(ye)是如(ru)此。這(zhe)就(jiu)是為什(shen)麽elisa反應(ying)總是需要(yao)壹定的培養時間。

　　常用的培養溫度(du)為43℃、37℃、室溫和(he)4℃。37℃是實驗(yan)室常見(jian)的(de)保(bao)溫溫(wen)度(du)，也是大多數(shu)抗原和抗體(ti)結合(he)的(de)適宜(yi)溫度(du)。建立(li)酶(mei)聯免(mian)疫吸附法（elisa）研究(jiu)反(fan)應(ying)動(dong)力(li)學(xue)時(shi)，實驗(yan)表(biao)明(ming)，在(zai)37℃條(tiao)件下(xia)，兩種(zhong)抗原抗體(ti)反應(ying)在(zai)～2h後達(da)到(dao)高(gao)峰(feng)。為了(le)加速反應(ying)，可(ke)以(yi)提(ti)高(gao)反應(ying)溫(wen)度(du)。有些試驗(yan)在(zai)43℃下(xia)進(jin)行，但不適合(he)更(geng)高(gao)的溫(wen)度(du)。4℃時抗原抗體(ti)反應(ying)更(geng)*。在(zai)放(fang)射免(mian)疫分析中(zhong)，反(fan)應(ying)主(zhu)要(yao)在(zai)冰(bing)箱中(zhong)過(guo)夜(ye)，以(yi)形成更多的(de)沈(chen)澱。但由於(yu)所需(xu)時間太(tai)長，壹般(ban)不在(zai)elisa試(shi)劑盒(he)中(zhong)使(shi)用。

　　除壹(yi)些帶(dai)有特殊(shu)電(dian)熱(re)塊(kuai)的(de)elisa儀器外(wai)，壹(yi)般(ban)采(cai)用水浴(yu)法。elisa試劑盒(he)板(ban)可(ke)放置(zhi)在(zai)水(shui)浴(yu)箱中(zhong)，elisa板(ban)底部應(ying)靠(kao)近水面(mian)，以(yi)快速平衡溫度(du)。為避(bi)免蒸(zheng)發(fa)，應(ying)將(jiang)板(ban)蓋上(shang)，或用塑(su)料(liao)密封(feng)紙(zhi)或保(bao)鮮膜覆蓋板(ban)孔(kong)。此時，反應(ying)板(ban)可(ke)以(yi)浮在(zai)水(shui)面(mian)上。如(ru)果(guo)使用培養箱，elisa試劑盒(he)應(ying)放(fang)在(zai)濕盒(he)中(zhong)。濕箱應(ying)由傳熱(re)良好的(de)材(cai)料(liao)制成，如(ru)金(jin)屬(shu)。將(jiang)濕紗(sha)布墊(dian)在(zai)盒(he)底，然後將(jiang)elisa板(ban)放在(zai)濕紗(sha)布上。濕箱應(ying)放(fang)在(zai)培養箱中(zhong)預(yu)熱至(zhi)規(gui)定溫度(du)，尤其是在(zai)溫(wen)度(du)較低(di)時。無論是水浴(yu)培養還是濕箱培養，反應(ying)板(ban)都不應(ying)堆放(fang)，以(yi)確保(bao)每個板(ban)的溫(wen)度(du)能夠(gou)快速平衡。對(dui)於(yu)室溫培養的反應(ying)，操作過(guo)程(cheng)中(zhong)的(de)室溫應(ying)嚴(yan)格限制在(zai)規(gui)定範圍內(nei)。標準(zhun)室溫為20~25℃，但在(zai)具(ju)體(ti)操作過(guo)程(cheng)中(zhong)可(ke)根(gen)據(ju)手(shou)冊(ce)要(yao)求進(jin)行控制。當在(zai)室溫下(xia)培養時，elisa試劑盒(he)可(ke)以(yi)平放在(zai)控制臺上。應(ying)註(zhu)意(yi)的是，孵化(hua)溫度(du)和時間應(ying)盡(jin)可(ke)能準(zhun)確(que)。為了(le)確保(bao)這壹(yi)點(dian)，當(dang)壹(yi)個(ge)人(ren)操作時，不應(ying)同時測量(liang)兩個(ge)以(yi)上的板(ban)。（內容僅(jin)供(gong)參(can)考，如(ru)有問題(ti)或遇(yu)到(dao)問題(ti)，請在(zai)線(xian)咨詢(xun)，我(wo)們將竭誠(cheng)為您(nin)服務）