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        1. 當(dang)前位(wei)置(zhi):首頁  >  技(ji)術(shu)文(wen)章(zhang)  >  倉鼠Ca-ATP酶(mei)ELISA檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)​操(cao)作(zuo)步驟

          倉鼠Ca-ATP酶(mei)ELISA檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)​操(cao)作(zuo)步驟

          更(geng)新時間(jian):2021-10-26 點(dian)擊(ji)量(liang):513

          倉鼠Ca-ATP酶(mei)ELISA檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)操(cao)作(zuo)步驟:


          . 標準(zhun)品的稀釋與(yu)加(jia)樣(yang):在酶(mei)標包(bao)被(bei)板上設(she)標準(zhun)品孔(kong)0孔(kong),在(zai)di壹(yi)、第(di)二(er)孔(kong)中(zhong)分(fen)別加(jia)標準(zhun)品00μl,然(ran)後在di壹(yi)、第(di)二(er)孔(kong)中(zhong)加標準(zhun)品稀釋液(ye)50μl,混(hun)勻(yun);然(ran)後從di壹(yi)孔(kong)、第(di)二(er)孔(kong)中(zhong)各(ge)取00μl分(fen)別加(jia)到(dao)第(di)三(san)孔(kong)和(he)第(di)四(si)孔(kong),再在(zai)第(di)三(san)、第(di)四(si)孔(kong)分(fen)別加(jia)標準(zhun)品稀釋液(ye)50μl,混(hun)勻(yun);然(ran)後在第(di)三(san)孔(kong)和(he)第(di)四(si)孔(kong)中(zhong)先各(ge)取50μl棄(qi)掉(diao),再各(ge)取50μl分(fen)別加(jia)到(dao)第(di)五、第(di)六孔(kong)中(zhong),再在(zai)第(di)五、第(di)六孔(kong)中(zhong)分(fen)別加(jia)標準(zhun)品稀釋液(ye)50ul,混(hun)勻(yun);混(hun)勻(yun)後從第(di)五、第(di)六孔(kong)中(zhong)各(ge)取50μl分(fen)別加(jia)到(dao)第(di)七(qi)、第(di)八(ba)孔(kong)中(zhong),再在(zai)第(di)七(qi)、第(di)八(ba)孔(kong)中(zhong)分(fen)別加(jia)標準(zhun)品稀釋液(ye)50μl,混(hun)勻(yun)後從第(di)七(qi)、第(di)八(ba)孔(kong)中(zhong)分(fen)別取(qu)50μl加到(dao)第(di)九(jiu)、第(di)十(shi)孔(kong)中(zhong),再在(zai)第(di)九(jiu)第(di)十(shi)孔(kong)分(fen)別加(jia)標準(zhun)品稀釋液(ye)50μl,混(hun)勻(yun)後從第(di)九(jiu)第(di)十(shi)孔(kong)中(zhong)各(ge)取50μl棄(qi)掉(diao)。(稀釋後各(ge)孔(kong)加(jia)樣(yang)量(liang)都為(wei)50μl,濃度(du)分(fen)別為(wei)80 ng/L,20 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,5 ng/L)。

          2. 加樣(yang):分(fen)別設(she)空白(bai)孔(kong)(空(kong)白(bai)對照孔(kong)不(bu)加(jia)樣(yang)品及(ji)酶(mei)標試(shi)劑,其余(yu)各(ge)步操作相(xiang)同)、待測(ce)樣(yang)品孔(kong)。在(zai)酶(mei)標包(bao)被(bei)板上待測(ce)樣(yang)品孔(kong)中(zhong)先加(jia)樣(yang)品稀釋液(ye)40μl,然(ran)後再加(jia)待測(ce)樣(yang)品0μl(樣(yang)品最(zui)終稀釋度(du)為5倍)。加(jia)樣(yang)將樣(yang)品加於(yu)酶(mei)標板(ban)孔(kong)底(di)部,盡(jin)量(liang)不觸(chu)及(ji)孔(kong)壁(bi),輕(qing)輕(qing)晃動混(hun)勻(yun)。

          3. 溫(wen)育:用封(feng)板膜封(feng)板後置37℃溫(wen)育30分(fen)鐘(zhong)。

          4. 配液(ye):將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液(ye)用蒸餾水(shui)30(48T的20倍)倍稀釋後備(bei)用。

          5. 洗滌:小心揭(jie)掉(diao)封(feng)板膜,棄(qi)去(qu)液(ye)體(ti),甩幹(gan),每(mei)孔(kong)加(jia)滿(man)洗(xi)滌液(ye),靜(jing)置(zhi)30秒(miao)後棄去(qu),如(ru)此(ci)重(zhong)復(fu)5次(ci),拍幹(gan)。

          6. 加酶(mei):每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)酶(mei)標試(shi)劑50μl,空白(bai)孔(kong)除(chu)外。

          7. 溫(wen)育:操(cao)作(zuo)同3。

          8. 洗滌:操(cao)作(zuo)同5。

          9. 顯色(se):每(mei)孔(kong)先加(jia)入顯色(se)劑(ji)A50μl,再加(jia)入(ru)顯色(se)劑(ji)B50μl,輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩混(hun)勻(yun),37℃避(bi)光(guang)顯色(se)5分(fen)鐘(zhong).

          0. 終止:每(mei)孔(kong)加(jia)終止液(ye)50μl,終止反應(ying)(此(ci)時(shi)藍(lan)色(se)立(li)轉(zhuan)黃(huang)色(se))。

          . 測(ce)定(ding):以(yi)空(kong)白(bai)空調零(ling),450nm波長依(yi)序測(ce)量(liang)各(ge)孔(kong)的吸(xi)光(guang)度(du)(OD值)。 測(ce)定(ding)應(ying)在(zai)加(jia)終止液(ye)後5分(fen)鐘(zhong)。

          脊髓(sui)小腦共(gong)濟(ji)失調2型(xing)蛋白(bai)抗體(ti)

          芳香(xiang)基硫(liu)酸(suan)酯(zhi)酶(mei)H抗(kang)體(ti)

          溴區結構域相(xiang)鄰鋅(xin)指(zhi)蛋白(bai)A抗體(ti)

          載(zai)脂(zhi)蛋白(bai)抗體(ti)

          突(tu)觸融(rong)合結合蛋白(bai)6抗體(ti)

          酶(mei)抗(kang)體(ti)

          腺(xian)苷(gan)酸(suan)激(ji)酶(mei)結構域蛋白(bai)抗體(ti)

          三(san)磷酸(suan)腺苷(gan)結合盒(he)轉(zhuan)運蛋白(bai)7抗體(ti)

          磷酸(suan)化(hua)鈉鉀ATP酶(mei)α多(duo)肽抗(kang)體(ti)

          Na+/K+-ATPase α 鈉鉀ATP酶(mei)α抗(kang)體(ti)

          肌(ji)動蛋白(bai)樣(yang)蛋白(bai)6B抗體(ti)

          脊(ji)髓小腦共(gong)濟(ji)失調蛋白(bai)7抗體(ti)

          磷酸(suan)化(hua)非受(shou)體(ti)激(ji)酶(mei)c-Abl抗(kang)體(ti)

          β澱(dian)粉(fen)樣(yang)前體(ti)蛋白(bai)結合蛋白(bai)抗體(ti)

          載(zai)脂(zhi)蛋白(bai)E抗體(ti)

          甲胎(tai)蛋白(bai)AFP抗體(ti)

          陰(yin)離(li)子交換蛋白(bai)2抗體(ti)

          鐵(tie)調節蛋白(bai)抗體(ti)

          三(san)磷酸(suan)腺苷(gan)酶(mei)家(jia)族蛋白(bai)3A抗體(ti)

          載(zai)脂(zhi)蛋白(bai)J抗體(ti)

          載(zai)脂(zhi)蛋白(bai)H抗體(ti)

          二(er)磷酸(suan)腺苷(gan)核糖基轉(zhuan)移(yi)酶(mei)4抗(kang)體(ti)

          AKIRIN2蛋白(bai)抗體(ti)

          ADP核糖基化(hua)樣(yang)因子8B抗體(ti)

          三(san)磷酸(suan)腺苷(gan)酶(mei)家(jia)族蛋白(bai)2抗體(ti)

          AKIRIN蛋白(bai)抗體(ti)


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