當前(qian)位(wei)置:首(shou)頁(ye) > 技術文章 > 人(ren)CXC趨(qu)化因子(zi)配體(ti)6操作步(bu)驟
人(ren)CXC趨(qu)化因子(zi)配體(ti)6操作步(bu)驟:
. 標準品的(de)稀釋與加樣:在(zai)酶(mei)標包(bao)被板上(shang)設(she)標準品孔(kong)0孔(kong),在(zai)di壹(yi)、第二(er)孔(kong)中分別加標準品00μl,然後在(zai)di壹(yi)、第二(er)孔(kong)中加標準品稀釋液(ye)50μl,混勻;然後從(cong)di壹孔(kong)、第二(er)孔(kong)中各取00μl分別加到(dao)第(di)三孔(kong)和第(di)四(si)孔(kong),再在(zai)第(di)三、第四(si)孔(kong)分別加標準品稀釋液(ye)50μl,混勻;然後在(zai)第(di)三孔(kong)和第(di)四(si)孔(kong)中先(xian)各取50μl棄(qi)掉(diao),再各取50μl分別加到(dao)第(di)五(wu)、第(di)六(liu)孔(kong)中,再在(zai)第(di)五(wu)、第(di)六(liu)孔(kong)中分別加標準品稀釋液(ye)50ul,混勻;混勻後從(cong)第五(wu)、第(di)六(liu)孔(kong)中各取50μl分別加到(dao)第(di)七、第八孔(kong)中,再在(zai)第(di)七、第八孔(kong)中分別加標準品稀釋液(ye)50μl,混勻後從(cong)第七、第八孔(kong)中分別取50μl加到(dao)第(di)九、第十孔(kong)中,再在(zai)第(di)九第十孔(kong)分別加標準品稀釋液(ye)50μl,混勻後從(cong)第九第十孔(kong)中各取50μl棄(qi)掉(diao)。(稀(xi)釋後各孔(kong)加樣量(liang)都(dou)為(wei)50μl,濃(nong)度(du)分(fen)別為(wei)80 ng/L,20 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,5 ng/L)。
2. 加樣:分(fen)別設空(kong)白(bai)孔(kong)(空白(bai)對(dui)照(zhao)孔(kong)不加樣品及(ji)酶(mei)標試劑(ji),其余(yu)各步(bu)操作相(xiang)同)、待測(ce)樣品孔(kong)。在(zai)酶(mei)標包(bao)被板上(shang)待(dai)測樣品孔(kong)中先(xian)加樣品稀釋液(ye)40μl,然後再加待(dai)測(ce)樣品0μl(樣品最終稀釋度(du)為(wei)5倍)。加樣將樣品加於酶標板孔(kong)底(di)部(bu),盡(jin)量(liang)不觸及(ji)孔(kong)壁,輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混勻。
3. 溫育:用封(feng)板膜(mo)封板後置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的(de)20倍)倍濃(nong)縮洗(xi)滌液用(yong)蒸餾水(shui)30(48T的(de)20倍)倍稀(xi)釋後備用(yong)。
5. 洗(xi)滌:小(xiao)心(xin)揭掉(diao)封(feng)板膜(mo),棄(qi)去(qu)液體(ti),甩幹(gan),每(mei)孔(kong)加滿洗(xi)滌液,靜置30秒後棄(qi)去(qu),如此(ci)重復5次(ci),拍幹(gan)。
6. 加酶(mei):每(mei)孔(kong)加入酶(mei)標試劑(ji)50μl,空(kong)白(bai)孔(kong)除外(wai)。
7. 溫(wen)育:操作同(tong)3。
8. 洗(xi)滌:操作同(tong)5。
9. 顯色:每孔(kong)先(xian)加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕(qing)輕(qing)震蕩(dang)混勻,37℃避光顯色5分鐘.
0. 終止:每孔(kong)加終(zhong)止(zhi)液50μl,終(zhong)止反應(此時(shi)藍色立轉(zhuan)黃色)。
. 測定(ding):以空白(bai)空調零,450nm波(bo)長依(yi)序測(ce)量各(ge)孔(kong)的(de)吸光度(du)(OD值(zhi))。 測定(ding)應(ying)在(zai)加終(zhong)止(zhi)液後5分鐘。
錨(mao)蛋(dan)白(bai)重復結構(gou)域(yu)蛋(dan)白(bai)33B抗體(ti)
載(zai)脂蛋(dan)白(bai)C3抗體(ti)
細(xi)胞(bao)雕(diao)亡增(zeng)強(qiang)核酸酶(mei)抗體(ti)
染色體(ti)脆(cui)弱(ruo)性相(xiang)關基(ji)因(yin)抗(kang)體(ti)
磷酸化蛋(dan)白(bai)激酶B抗(kang)體(ti)
銅(tong)轉(zhuan)運(yun)蛋(dan)白(bai)質β鏈(lian)抗體(ti)
酰(xian)基(ji)合(he)成酶家族4抗(kang)體(ti)
酸性磷酸酶(mei)樣蛋(dan)白(bai)2抗體(ti)
AHNAK核蛋(dan)白(bai)2抗體(ti)
二(er)磷酸腺(xian)苷(gan)核糖(tang)基(ji)化因子(zi)6相互作用(yong)蛋(dan)白(bai)抗體(ti)
p53誘(you)導蛋(dan)白(bai)5抗體(ti)
錨(mao)蛋(dan)白(bai)重復域(yu)5抗(kang)體(ti)
腦(nao)鈉(na)通道蛋(dan)白(bai)2抗體(ti)
腦(nao)鈉(na)通道蛋(dan)白(bai)4抗體(ti)
小(xiao)腸鈉(na)通道蛋(dan)白(bai)5抗體(ti)
APXL蛋(dan)白(bai)抗體(ti)
酸敏(min)感離子(zi)通道蛋(dan)白(bai)3抗體(ti)
天(tian)β羥化酶抗(kang)體(ti)
加壓素受(shou)體(ti)2抗(kang)體(ti)
細(xi)胞(bao)骨(gu)架(jia)肌動(dong)蛋(dan)白(bai)樣蛋(dan)白(bai)3抗體(ti)
膜(mo)粘連(lian)蛋(dan)白(bai)8抗體(ti)
水(shui)通道蛋(dan)白(bai)8抗體(ti)
錨(mao)蛋(dan)白(bai)重復結構(gou)域(yu)蛋(dan)白(bai)40抗體(ti)
雕(diao)亡抑制(zhi)因子(zi)5抗體(ti)
水(shui)通道蛋(dan)白(bai)-3抗體(ti)
載(zai)脂蛋(dan)白(bai)D抗體(ti)
丁(ding)酰(xian)基(ji)合(he)成酶3抗(kang)體(ti)
脂(zhi)肪(fang)細(xi)胞(bao)源(yuan)性氨(an)基(ji)肽酶抗(kang)體(ti)
線(xian)粒(li)體(ti)雕(diao)亡誘(you)導因(yin)子(zi)2抗體(ti)
ABL2蛋(dan)白(bai)抗體(ti)
聯(lian)系方(fang)式(shi)
郵箱(xiang):[email protected] 地(di)址(zhi):上(shang)海(hai)市嘉定(ding)區澄(cheng)瀏(liu)公(gong)路52號盛(sheng)創(chuang)企(qi)業
掃(sao)碼(ma)加微信
移(yi)動端(duan)瀏(liu)覽