人延伸蛋(dan)白A(EloA)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)​洗滌(di)方(fang)法

人(ren)延伸蛋(dan)白A(EloA)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)洗滌(di)方(fang)法：

. 自動洗板機：每孔(kong)加(jia)入(ru)洗滌(di)液(ye)350μl，註(zhu)入與(yu)吸出間隔60秒(miao)。洗板5次(ci)。

2. 手工(gong)洗板：甩盡孔(kong)內(nei)液(ye)體，在(zai)潔凈的(de)吸水(shui)紙上(shang)拍幹(gan)，每孔(kong)加(jia)洗滌(di)液(ye)350μl，浸泡(pao)-2分鐘(zhong)，吸去(qu)(不可觸(chu)及板壁(bi))或(huo)甩掉酶(mei)標板內(nei)的(de)液(ye)體，在(zai)厚的(de)吸水(shui)紙上(shang)拍幹(gan)。洗板5次(ci)。

實(shi)驗開(kai)始前(qian)，各(ge)試(shi)劑(ji)均(jun)應平(ping)衡至(zhi)室(shi)溫；試(shi)劑(ji)或(huo)樣(yang)品(pin)配制時，均(jun)需(xu)充(chong)分(fen)混勻，並盡量避(bi)免(mian)起泡(pao)。

.加(jia)樣(yang)：分(fen)別(bie)設(she)空(kong)白孔(kong)、標準孔(kong)、待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔(kong)。空(kong)白孔(kong)加(jia)樣(yang)品(pin)稀釋(shi)液(ye)00μl，余(yu)孔(kong)分(fen)別(bie)加(jia)標準品(pin)或待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)00μl，註(zhu)意(yi)不(bu)要(yao)有氣(qi)泡，加(jia)樣(yang)時將(jiang)樣(yang)品(pin)加(jia)於(yu)酶(mei)標板底(di)部(bu)，盡量不觸及(ji)孔(kong)壁(bi)，輕輕(qing)晃動混勻。給酶(mei)標板覆(fu)膜(mo)，37℃孵(fu)育(yu)2小(xiao)時。為(wei)保(bao)證實(shi)驗結果(guo)有(you)效性，每(mei)次實(shi)驗請使用(yong)新的(de)標準品(pin)溶液(ye)。

2.棄去(qu)液(ye)體，甩幹(gan)，每個孔(kong)中(zhong)加(jia)入(ru)Detection Ab工(gong)作(zuo)液(ye) 00μl(在使用(yong)前(qian)5分(fen)鐘(zhong)內(nei)配(pei)制)，酶(mei)標板加(jia)上(shang)覆(fu)膜(mo)，37℃溫育(yu)小(xiao)時。

3.棄去(qu)孔(kong)內(nei)液(ye)體，甩幹(gan)，洗板 3次(ci)，每(mei)次浸泡(pao)-2分鐘(zhong)，大(da)約350μl /每(mei)孔(kong)，甩幹(gan)並在(zai)吸水(shui)紙上(shang)輕(qing)拍將(jiang)孔(kong)內(nei)液(ye)體拍幹(gan)。

4.每孔(kong)加(jia)HRP Conjugate工(gong)作(zuo)液(ye)(臨(lin)用(yong)前(qian)5分(fen)鐘(zhong)內(nei)配(pei)制)00μl，加(jia)上(shang)覆(fu)膜(mo)，37℃溫育(yu)小(xiao)時。

5.棄去(qu)孔(kong)內(nei)液(ye)體，甩幹(gan)，洗板5次(ci)，方(fang)法同(tong)步(bu)驟(zhou)3。

6.每(mei)孔(kong)加(jia)底(di)物溶液(ye)00μl，酶(mei)標板加(jia)上(shang)覆(fu)膜(mo)37℃避(bi)光(guang)孵育(yu)5分鐘(zhong)左右(you)(根據實(shi)際顯色(se)情況酌情縮短或延長，但不(bu)可(ke)超(chao)過(guo)30分(fen)鐘(zhong)。當(dang)標準孔(kong)出現明顯梯度時，即(ji)可(ke)終止(zhi))。

7.每孔(kong)加(jia)終(zhong)止(zhi)液(ye)50μl，終止(zhi)反(fan)應，此時藍色立轉黃色。終止(zhi)液(ye)的(de)加(jia)入(ru)順序(xu)應盡量與(yu)底(di)物(wu)液(ye)的(de)加(jia)入(ru)順序(xu)相(xiang)同(tong)。

8.立即用(yong)酶(mei)標儀(yi)在(zai)450nm波長測(ce)量各(ge)孔(kong)的(de)光(guang)密度(OD值(zhi))。應提前(qian)打(da)開(kai)酶(mei)標儀(yi)電(dian)源，預熱儀(yi)器(qi)，設(she)置好檢測(ce)程序(xu)。

9.實(shi)驗完(wan)畢(bi)後將(jiang)未(wei)用(yong)完(wan)的(de)試(shi)劑(ji)按(an)規(gui)定的(de)保(bao)存(cun)溫度放(fang)回(hui)冰(bing)箱(xiang)保存至(zhi)有(you)效期(qi)結束(shu)。

小(xiao)鼠骨(gu)髓(sui)間充(chong)質(zhi)幹(gan)細胞（BMSCs）

MEF, 小(xiao)鼠胚胎(tai)成纖(xian)維細胞

MM, 小(xiao)鼠小(xiao)膠(jiao)質細胞

mCF, 小(xiao)鼠心臟成(cheng)纖(xian)維細胞

MN-c, 小(xiao)鼠皮質神經(jing)元

 細胞名稱

人(ren)絨(rong)毛(mao)膜(mo)毛(mao)細血管(guan)內(nei)皮(pi)細胞

人(ren)羊(yang)膜(mo)上(shang)皮(pi)細胞

人(ren)絨(rong)毛(mao)間充(chong)質(zhi)成(cheng)纖(xian)維細胞

人(ren)羊(yang)膜(mo)間充(chong)質(zhi)基(ji)質細胞

人(ren)絨(rong)毛(mao)膜(mo)間充(chong)質(zhi)基(ji)質細胞

 細胞名稱

NRK-52E，大(da)鼠腎細胞

H9c2大(da)鼠心肌細胞（ATCC來源(yuan)）

NIH/3T3, 小(xiao)鼠成纖(xian)維細胞系

大(da)鼠骨(gu)髓(sui)間充(chong)質(zhi)幹(gan)細胞（BMSCs）

HSC-T6, 大(da)鼠肝星狀細胞系

CHO, 中(zhong)國(guo)倉(cang)鼠卵巢細胞系

COS-7L, 非洲綠猴腎成(cheng)纖(xian)維細胞

SF9, 昆(kun)蟲(chong)卵(luan)巢細胞

BRL 3A, 大(da)鼠肝正常細胞

HK-2, 人(ren)腎(shen)皮(pi)質(zhi)近(jin)曲(qu)小(xiao)管上(shang)皮(pi)細胞

HET-A, 人(ren)食(shi)管(guan)上(shang)皮(pi)細胞

RGC-5, 小(xiao)鼠視(shi)網膜(mo)神(shen)經(jing)節(jie)細胞

GC-, 鼠精原細胞

293A，人(ren)胚(pei)腎(shen)上(shang)皮(pi)細胞系（腺病(bing)毒(du)包(bao)裝(zhuang)級(ji)別(bie)）

hDPSCs, 人(ren)前(qian)磨牙牙髓(sui)幹(gan)細胞

293T, SV40轉化的(de)人(ren)胚(pei)腎(shen)上(shang)皮(pi)細胞系

EPC, 大(da)鼠血管內(nei)皮(pi)祖細胞

HBE, 正常人(ren)支氣管上(shang)皮(pi)細胞系

HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人(ren)肝(gan)上(shang)皮(pi)細胞

HUVEC-2, 人(ren)臍(qi)靜(jing)脈(mai)血管(guan)內(nei)皮(pi)細胞系

HUM, 正常人(ren)主(zhu)動(dong)脈(mai)平(ping)滑(hua)肌細胞

HAVSMC, 人(ren)主(zhu)動(dong)脈(mai)平(ping)滑(hua)肌細胞