大鼠(shu)elisa試劑盒(he)應(ying)用雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾(jia)心法測(ce)定標本(ben)中大鼠(shu)TNF2α水平(ping)。用純化的大鼠(shu)TNF2α抗(kang)體(ti)包(bao)被(bei)微(wei)孔板(ban),制成固相(xiang)抗(kang)體(ti),往(wang)包(bao)被(bei)單抗的微(wei)孔中依次(ci)加入TNF2α再(zai)與(yu)HRP標記(ji)的TNF2α抗(kang)體(ti)結合(he),形(xing)成抗(kang)體(ti)-抗(kang)原-酶標(biao)抗(kang)體(ti)復(fu)合(he)物,經過(guo)*洗滌後(hou)加底(di)物TMB顯色(se)。TMB在HRP酶的(de)催化下(xia)轉化成藍(lan)色(se),並在(zai)酸的(de)作用下(xia)轉化成*終(zhong)的(de)黃(huang)色(se)。顏(yan)色的深(shen)淺(qian)和(he)樣品(pin)中的TNF2α呈正相(xiang)關(guan)。
大鼠(shu)elisa試劑盒(he)試驗(yan)與(yu)操作(zuo)使(shi)用
.試劑應按(an)標簽說(shuo)明(ming)書(shu)儲(chu)存(cun),使(shi)用前恢復(fu)到室(shi)溫(wen)。稀(xi)稀(xi)過(guo)後(hou)的標(biao)準品(pin)應(ying)丟(diu)棄(qi),不可(ke)保存(cun)。
2.實(shi)驗(yan)中不用的板(ban)條(tiao)應(ying)立(li)即(ji)放(fang)回(hui)包(bao)裝(zhuang)袋中,密封保存(cun),以免變(bian)質(zhi)。
3.不用的其它(ta)試劑應包(bao)裝(zhuang)好(hao)或(huo)蓋(gai)好(hao)。不同批號(hao)的(de)試劑不要(yao)混用。保質前使(shi)用。
4.使(shi)用壹次(ci)性(xing)的吸(xi)頭以免交(jiao)叉汙(wu)染,吸取(qu)終(zhong)止(zhi)液和(he)底(di)物A、B液時(shi),避免使(shi)用帶金(jin)屬部(bu)分(fen)的加樣器。
5.使(shi)用幹凈的塑料(liao)容(rong)器配(pei)置(zhi)洗滌液。使(shi)用前充分(fen)混勻(yun)試劑盒(he)裏(li)的各(ge)種(zhong)成份(fen)及(ji)樣品(pin)。
6.洗(xi)滌酶(mei)標(biao)板(ban)時(shi)應(ying)充(chong)分(fen)拍幹,不要(yao)將吸(xi)水紙(zhi)直(zhi)接放(fang)入酶標反(fan)應孔(kong)中吸水。
7.免(mian)費代(dai)測(ce)底(di)物A應揮(hui)發,避免長時(shi)間打(da)開蓋(gai)子(zi)。底(di)物B對光(guang)敏(min)感,避免長時(shi)間暴露於光(guang)下(xia)。避免用手接觸,有(you)毒。實(shi)驗(yan)完成後(hou)應立(li)即(ji)讀(du)取(qu)OD值(zhi)。
8.加入試劑的順序應(ying)壹致,以保證所有反(fan)應板(ban)孔(kong)溫(wen)育(yu)的時(shi)間壹樣。
9.按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)中標明的時間、加液的(de)量(liang)及順序進(jin)行溫(wen)育(yu)操作(zuo)。