日本(ben)血(xue)吸(xi)蟲(chong)(SJ)核酸檢測(ce)試劑盒(he)(PCR-熒(ying)光探(tan)針法)洗(xi)滌方(fang)法:
1. 自動洗(xi)板機(ji):每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)洗(xi)滌液(ye)350μl,註(zhu)入(ru)與(yu)吸(xi)出間隔60秒(miao)。洗(xi)板5次(ci)。
2. 手(shou)工(gong)洗(xi)板:甩(shuai)盡(jin)孔(kong)內(nei)液(ye)體(ti),在(zai)潔凈的吸水(shui)紙(zhi)上拍幹(gan),每(mei)孔(kong)加(jia)洗(xi)滌液(ye)350μl,浸(jin)泡(pao)1-2分鐘,吸(xi)去(不可觸及板壁)或甩(shuai)掉(diao)酶標(biao)板(ban)內(nei)的(de)液(ye)體(ti),在(zai)厚的(de)吸水紙上拍幹(gan)。洗(xi)板5次(ci)。
實(shi)驗(yan)開(kai)始(shi)前,各(ge)試劑均應(ying)平(ping)衡至室(shi)溫(wen);試劑或樣(yang)品(pin)配(pei)制(zhi)時,均需充(chong)分混勻,並盡(jin)量(liang)避(bi)免起(qi)泡(pao)。
1.加(jia)樣:分別(bie)設空(kong)白孔、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待(dai)測(ce)樣品(pin)孔(kong)。空白孔加(jia)樣品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)100μl,余(yu)孔(kong)分別(bie)加(jia)標(biao)準(zhun)品(pin)或待(dai)測(ce)樣品(pin)100μl,註(zhu)意不要有(you)氣泡(pao),加(jia)樣時將樣品(pin)加(jia)於酶標(biao)板(ban)底(di)部(bu),盡(jin)量(liang)不觸及孔壁,輕輕晃(huang)動混勻。給酶標(biao)板(ban)覆(fu)膜(mo),37℃孵育2小(xiao)時。為(wei)保(bao)證實(shi)驗結(jie)果有(you)效性(xing),每(mei)次(ci)實(shi)驗(yan)請(qing)使用(yong)新(xin)的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)溶液。
2.棄去液(ye)體(ti),甩(shuai)幹(gan),每(mei)個(ge)孔(kong)中(zhong)加(jia)入(ru)Detection Ab工(gong)作液 100μl(在(zai)使用(yong)前15分鐘內(nei)配(pei)制(zhi)),酶標(biao)板(ban)加(jia)上覆膜(mo),37℃溫(wen)育(yu)1小時。
3.棄去孔(kong)內(nei)液體(ti),甩(shuai)幹(gan),洗(xi)板 3次(ci),每(mei)次(ci)浸(jin)泡(pao)1-2分鐘,大(da)約350μl /每(mei)孔(kong),甩(shuai)並(bing)在(zai)吸水(shui)紙上輕拍將孔內(nei)液體(ti)拍幹(gan)。
幹(gan)4.每(mei)孔(kong)加(jia)HRP Conjugate工(gong)作液(臨用(yong)前15分鐘內(nei)配(pei)制(zhi))100μl,加(jia)上覆膜(mo),37℃溫(wen)育(yu)1小時。
5.棄去孔(kong)內(nei)液體(ti),甩(shuai)幹(gan),洗(xi)板5次(ci),方(fang)法同步驟(zhou)3。
6.每(mei)孔(kong)加(jia)底物溶液100μl,酶標(biao)板(ban)加(jia)上覆膜(mo)37℃避(bi)光孵育15分鐘左右(you)(根(gen)據實際顯(xian)色情(qing)況酌(zhuo)情縮(suo)短(duan)或延(yan)長(chang),但(dan)不可超(chao)過30分鐘。當(dang)標(biao)準(zhun)孔(kong)出(chu)現明顯(xian)梯度(du)時,即可終止(zhi))。
7.每(mei)孔(kong)加(jia)終止(zhi)液(ye)50μl,終止(zhi)反應(ying),此時藍(lan)色立(li)轉(zhuan)黃(huang)色。終止(zhi)液(ye)的加(jia)入(ru)順(shun)序應(ying)盡(jin)量(liang)與(yu)底(di)物液(ye)的(de)加(jia)入(ru)順(shun)序相同。
8.立(li)即(ji)用(yong)酶標(biao)儀在(zai)450nm波長(chang)測(ce)量(liang)各(ge)孔(kong)的光密度(du)(OD值(zhi))。應(ying)提(ti)前(qian)打開(kai)酶標(biao)儀電源,預(yu)熱(re)儀器,設(she)置好檢測(ce)程(cheng)序。
9.實驗(yan)完畢(bi)後將未用(yong)完的試劑按規定的(de)保(bao)存(cun)溫(wen)度(du)放回冰(bing)箱保(bao)存(cun)至有(you)效期(qi)結(jie)束(shu)。
細胞(bao)衰(shuai)老相(xiang)關蛋(dan)白ASF1A抗體(ti)
氨(an)基糖(tang)苷類磷酸結構(gou)域蛋(dan)白抗體(ti)
唾(tuo)液酸糖蛋(dan)白受(shou)體(ti)1抗(kang)體(ti)
芳香基硫(liu)酸酯(zhi)酶F抗(kang)體(ti)
A激(ji)酶錨(mao)定蛋(dan)白5抗體(ti)
小(xiao)腦脊髓共(gong)濟失調(tiao)蛋(dan)白3抗體(ti)
ASTE1蛋(dan)白抗體(ti)
磷酸化自(zi)噬(shi)相(xiang)關蛋(dan)白4B抗體(ti)
微(wei)絲相(xiang)關蛋(dan)白1抗體(ti)
腺(xian)苷A1A受(shou)體(ti)抗(kang)體(ti)
芳基硫(liu)酸酯(zhi)酶B抗(kang)體(ti)
γ氨(an)基丁(ding)酸轉氨(an)酶抗(kang)體(ti)
共(gong)濟失調(tiao)蛋(dan)白2結合蛋白1抗體(ti)
壞(huai)死(si)因(yin)子α轉(zhuan)換(huan)酶
芳香烴(ting)受(shou)體(ti)核轉(zhuan)錄(lu)蛋白2抗體(ti)
AlkB同源蛋(dan)白8抗體(ti)
ABI基因(yin)家(jia)族成(cheng)員3結(jie)合(he)蛋(dan)白抗體(ti)
Rho GTP酶激(ji)活(huo)蛋白20抗體(ti)
含(han)錨(mao)蛋(dan)白重(zhong)復(fu)序列(lie)-細胞(bao)因(yin)子信號(hao)抑(yi)制(zhi)物盒(he)蛋(dan)白家族10抗體(ti)
乙(yi)醛脫(tuo)氫(qing)酶1蛋(dan)白家族L1抗體(ti)
軸抑(yi)制(zhi)蛋白2抗體(ti)
血(xue)管(guan)生(sheng)成(cheng)素相(xiang)關蛋(dan)白6抗體(ti)
Muellerian繆(mou)勒管(guan)激(ji)素抑(yi)制(zhi)因子抗(kang)體(ti)
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