人(ren)轉錄(lu)因(yin)子(zi)E2F1試劑(ji)盒(he)激活方法與(yu)檢(jian)測(ce)程(cheng)序(xu)方法

人(ren)轉(zhuan)錄(lu)因(yin)子(zi)E2F1試劑(ji)盒(he)激活方法：

1. 將450ul 標本(ben)稀(xi)釋液加(jia)入到壹支 1.5ml 進口(kou)聚(ju)丙(bing)烯(xi)管中 , 再(zai)加 10ul 血(xue)清(qing)或血(xue)漿(jiang)標本(ben)。

2. 加(jia)20ul 1 N HC I ,蓋緊(jin)，上(shang)下(xia)混(hun)勻。 2 － 8 ℃ 放置(zhi)60± 2 分鐘(zhong)。

3. 加(jia)20ul 1 N NaOH, 蓋緊，上(shang)下(xia)混(hun)勻。

4. 即用，或放-20/-70 ℃ 保(bao)存(cun)3 天(tian)。計(ji)算(suan)結(jie)果時(shi)乘 以(yi)稀(xi)釋倍(bei)數 50 。 （ 註意(yi)：不(bu)同(tong)的(de)標本(ben)E2F1 的(de)水平(ping)可(ke)能有較(jiao)大(da)差(cha)異，請根(gen)據(ju)實(shi)際(ji)情(qing)況靈活掌握稀(xi)釋度(du)）

5. 細胞(bao)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)或組(zu)織勻漿(jiang) 10 倍(bei)稀(xi)釋 (410ul 的(de)標本(ben)稀(xi)釋液＋ 50ul 樣(yang)本＋ 20ul 的(de) 1N HCI+20ul 的(de) 1N NaOH) 。

檢(jian)測(ce)程(cheng)序(xu)

1. 加(jia)樣(yang)：每(mei)孔各(ge)加入(ru)標準(zhun)品(pin)或待測(ce)樣(yang)品（已激活） 100ul ，將反(fan)應板(ban)充(chong)分混(hun)勻後(hou)置(zhi) 37 ℃ 120 分鐘(zhong)。

2. 洗(xi)板：用(yong)洗(xi)滌液將反(fan)應板(ban)充(chong)分洗(xi)滌 4-6 次(ci)，向(xiang)濾紙上(shang)印幹。

3. 每(mei)孔中加(jia)入第(di)壹抗(kang)體(ti)工作液10 0ul 。將反(fan)應板(ban)充(chong)分混(hun)勻後(hou)置(zhi) 37 ℃ 6 0 分鐘(zhong)。

4. 洗(xi)板：同(tong)前。

5. 每(mei)孔加酶(mei)標抗(kang)體(ti)工作液100ul 。將反(fan)應板(ban)置 37 ℃ 3 0 分鐘(zhong)。

6. 洗(xi)板：同(tong)前。

7. 每(mei)孔加入(ru)底物(wu)工作液100ul ，置(zhi) 37 ℃ 暗(an)處反(fan)應15 分鐘(zhong)。

8. 每(mei)孔加入(ru)100ul 終止(zhi)液混(hun)勻。

9. 30分鐘(zhong)內(nei)用酶(mei)標儀(yi)在 45 0 nm 處測(ce) 吸(xi)光(guang)值(zhi)。

人(ren)腎(shen)皮(pi)質(zhi)近(jin)曲小(xiao)管上(shang)皮(pi)細胞(bao)；HK-2

人腎小(xiao)管上(shang)皮(pi)細胞(bao)；HKC

人胚胎(tai)膀(pang)胱組(zu)織來(lai)源(yuan)細胞(bao)；CCC-HB-2

人胚胎(tai)氣(qi)管組織(zhi)來(lai)源(yuan)細胞(bao)；CCC-HBE-2

人胚腎(shen)二倍(bei)體(ti)細胞(bao)；CCC-HEK-1

人胚肝(gan)二倍(bei)體(ti)細胞(bao)；CCC-HEL-1

人胚胎(tai)心(xin)肌(ji)組(zu)織(zhi)來(lai)源(yuan)細胞(bao)；CCC-HEH-2

人胚胎(tai)腸(chang)粘膜(mo)組(zu)織(zhi)來(lai)源(yuan)細胞(bao)；CCC-HIE-2

人胚胎(tai)胰(yi)腺(xian)組(zu)織(zhi)來(lai)源(yuan)細胞(bao)；CCC-HPE-2

人胚胎(tai)肌(ji)肉(rou)組(zu)織來(lai)源(yuan)細胞(bao)；CCC-HSM-2

人葡萄膜(mo)黑色(se)素(su)細胞(bao)；UM

人胚肺成纖維細胞(bao)；WI-38 [WI38]

SV40T轉化(hua)的(de)人(ren)胚腎(shen)細胞(bao)（亞系）；293T/17

293來(lai)源(yuan)病毒包裝(zhuang)細胞(bao)；ΦA

293來(lai)源(yuan)病毒包裝(zhuang)細胞(bao)；ΦA-GP

人永(yong)生化(hua)表(biao)皮細胞(bao)；HaCaT

SV-40轉化(hua)肺成纖維細胞(bao)；WI38/VA13

人乳腺(xian)上(shang)皮(pi)細胞(bao)；MCF-10A

人胚肺成纖維細胞(bao)；MRC-5

人胚肺二倍(bei)體(ti)細胞(bao)；2BS

人胚肺二倍(bei)體(ti)細胞(bao)；KMB-17

人胚腎(shen)細胞(bao)；293 [HEK-293]

人臍(qi)靜(jing)脈內皮細胞(bao)；HUV-EC

人肺細胞(bao)；HLF-a

人胚肺成纖維細胞(bao)；WI-38 [WI38]

人胎兒(er)胸(xiong)腺(xian)細胞(bao)株(zhu)；HFT-8810 [HFT8810]

人胚肺成纖維細胞(bao)；HFL1

人胚腎(shen)細胞(bao)；293 [HEK-293]

人羊膜(mo)細胞(bao)；HA

人胚肺成纖維細胞(bao)；HFL-I

人肝(gan)細胞(bao)；HL-7702[L-02]

人肝(gan)細胞(bao)；QSG-7701 [QSG7701]

人胚肺成纖維細胞(bao)；WI-38 [WI38]