濾紙(zhi)酶(mei)可(ke)見(jian)分(fen)光(guang)光(guang)度(du)法檢測試(shi)劑(ji)盒實(shi)驗方(fang)法學

濾(lv)紙(zhi)酶(mei)可(ke)見(jian)分(fen)光(guang)光(guang)度(du)法檢測試(shi)劑(ji)盒實(shi)驗方(fang)法學：

壹(yi)、肝(gan)素的配制(zhi)：產(chan)品(pin)僅(jin)用於(yu)科研(yan)

市售(shou)肝素凍(dong)幹粉(fen)140單位/mg，1克瓶(ping)裝，每(mei)瓶(ping)140，000單位，稱取0.1克肝(gan)素(su)凍(dong)幹粉(fen)，加生(sheng)理鹽水(shui)5ml，配(pei)成(cheng)2800單(dan)位/ml。取(qu)50～100μl濕潤(run)管(guan)壁(bi)，可(ke)抗凝(ning)人(ren)血(xue)3～5ml，血(xue)液(ye)不會(hui)凝固。老鼠血易凝固，所(suo)以(yi)更濃(nong)壹(yi)些(xie)。可(ke)以(yi)取0.1克肝(gan)素(su)凍(dong)幹粉(fen)，加3ml生(sheng)理鹽水(shui)溶(rong)解後(hou)，取(qu)50～100μl,可(ke)抗凝(ning)鼠血2～4ml。

肝素抗凝(ning)管(guan)的制(zhi)備(bei)：取0.1克肝(gan)素(su)凍(dong)幹粉(fen)，加2.5ml生(sheng)理鹽水(shui)。取(qu)100μl～150μl滴(di)入(ru)塑料(liao)或(huo)玻璃(li)管(guan)中(zhong)，濕潤(run)管(guan)壁(bi)，低(di)於(yu)80℃小烤(kao)箱中(zhong)（可(ke)以(yi)用烤(kao)面包(bao)的小烤(kao)箱），橫(heng)向(xiang)轉動，每(mei)隔(ge)5～10分鐘轉動壹(yi)次(ci)，直至(zhi)幹(gan)燥(zao)後(hou)放入(ru)4℃保存(cun)，可(ke)使(shi)2～5ml血(xue)液(ye)不(bu)凝固。

二、血液(ye)樣(yang)本的(de)收(shou)集：

全(quan)血(xue)根(gen)據(ju)收(shou)集的(de)條(tiao)件，分(fen)成(cheng)不(bu)抗凝(ning)和(he)抗凝(ning)兩(liang)種(zhong)。同時，不(bu)抗凝(ning)分(fen)離出(chu)的上(shang)層(ceng)黃色的液(ye)體(ti)我(wo)們(men)稱之為(wei)血(xue)清；抗凝(ning)分(fen)離出(chu)的上(shang)層(ceng)黃色的液(ye)體(ti)我(wo)們(men)稱之為(wei)血(xue)漿。

1、不抗凝(ning)收(shou)集血(xue)清(qing):將收(shou)集好(hao)的(de)全血(xue),靜置1～2小時，直接低(di)速離(li)心分(fen)離(li)出血(xue)清待(dai)用(yong)或(huo)保存(cun)。

測(ce)定(ding)意(yi)義(yi)：

纖(xian)維素酶是(shi)由(you)微(wei)生(sheng)物產(chan)生(sheng)的多組(zu)分(fen)的酶(mei)系(xi)，能水(shui)解纖(xian)維素β-1,4葡萄糖(tang)苷(gan)鍵(jian)生(sheng)成(cheng)葡(pu)萄糖(tang)，濾(lv)紙(zhi)酶(mei)是(shi)其中的壹(yi)個組(zu)分(fen)，研(yan)究濾紙(zhi)酶(mei)活(huo)力(li)對纖(xian)維素酶的研(yan)究具有(you)非(fei)常重要的意(yi)義(yi)。

測定(ding)原(yuan)理(li)

濾(lv)紙(zhi)酶(mei)水(shui)解濾紙(zhi)產(chan)生(sheng)的還(hai)原(yuan)糖(tang)能(neng)與(yu)3,5-二硝(xiao)基(ji)水楊酸(suan)生(sheng)成(cheng)紅(hong)棕(zong)色氨(an)基(ji)化合物(wu)，在540nm處(chu)有(you)光(guang)吸(xi)收(shou)，在壹(yi)定(ding)範(fan)圍內反(fan)應(ying)液顏色深淺(qian)與還(hai)原(yuan)糖(tang)的(de)量成(cheng)正(zheng)比，可(ke)測(ce)定(ding)計(ji)算(suan)得濾紙(zhi)酶(mei)的(de)活(huo)力。

自(zi)備(bei)實(shi)驗用(yong)品(pin)及儀器

天平(ping)、研(yan)缽、低溫(wen)離心(xin)機、可(ke)見(jian)分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計、1 mL玻璃比色皿、恒溫(wen)水浴(yu)鍋(guo)。。