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人軍(jun)團菌(jun)抗體IgMelisa檢測(ce)試劑盒標(biao)本要(yao)求:
1. 血(xue)清:室(shi)溫(wen)血(xue)液(ye)自(zi)然(ran)凝(ning)固(gu)10-20分(fen)鐘,離心(xin)20分(fen)鐘左右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上清,保存(cun)過程(cheng)中(zhong)如(ru)出(chu)現(xian)沈(chen)澱(dian),應(ying)再次(ci)離(li)心(xin)。
2. 血(xue)漿(jiang):應(ying)根據(ju)標(biao)本的(de)要(yao)求選擇(ze)EDTA或(huo)檸(ning)檬酸(suan)鈉(na)作為抗凝劑,混(hun)合10-20分(fen)鐘後,離心(xin)20分(fen)鐘左右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上清,保存(cun)過程(cheng)中(zhong)如(ru)有沈(chen)澱(dian)形成(cheng),應(ying)該再次(ci)離(li)心(xin)。
3. 尿(niao)液:用(yong)無(wu)菌(jun)管收(shou)集(ji),離心(xin)20分(fen)鐘左右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上清,保存(cun)過程(cheng)中(zhong)如(ru)有沈(chen)澱(dian)形成(cheng),應(ying)再次(ci)離(li)心(xin)。胸腹水(shui)、腦(nao)脊液(ye)參(can)照實(shi)行。
4. 細(xi)胞(bao)培養上清:檢測(ce)分(fen)泌(mi)性的(de)成(cheng)份時(shi),用(yong)無(wu)菌(jun)管收(shou)集(ji)。離心(xin)20分(fen)鐘左右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上清。檢測(ce)細(xi)胞(bao)內(nei)的(de)成(cheng)份時(shi),用(yong)PBS(PH7.2-7.4)稀(xi)釋細(xi)胞(bao)懸液(ye),細(xi)胞(bao)濃度達(da)到100萬/ml左右。通過(guo)反復凍(dong)融(rong),以(yi)使細(xi)胞(bao)破(po)壞(huai)並放出(chu)細(xi)胞(bao)內(nei)成(cheng)份。離心(xin)20分(fen)鐘左右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上清。保存(cun)過程(cheng)中(zhong)如(ru)有沈(chen)澱(dian)形成(cheng),應(ying)再次(ci)離(li)心(xin)。
5. 組織標(biao)本:切(qie)割標本後(hou),稱(cheng)取(qu)重量(liang)。加(jia)入(ru)壹定(ding)量(liang)的(de)PBS,PH7.4。用(yong)液(ye)氮(dan)迅速(su)冷(leng)凍(dong)保存(cun)備用(yong)。標(biao)本融(rong)化後仍(reng)然(ran)保持(chi)2-8℃的(de)溫度。加(jia)入(ru)壹定(ding)量(liang)的(de)PBS(PH7.4),用(yong)手工(gong)或(huo)勻(yun)漿(jiang)器(qi)將(jiang)標(biao)本勻(yun)漿(jiang)充分(fen)。離心(xin)20分(fen)鐘左右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上清。分(fen)裝(zhuang)後(hou)壹份(fen)待檢測(ce),其(qi)余冷(leng)凍(dong)備(bei)用(yong)。
6. 標(biao)本采(cai)集(ji)後盡(jin)早(zao)進行提(ti)取(qu),提(ti)取(qu)按相(xiang)關(guan)文(wen)獻(xian)進行,提(ti)取(qu)後應(ying)盡(jin)快進行實(shi)驗。若(ruo)不(bu)能馬(ma)上進行試驗,可將(jiang)標本放(fang)於(yu)-20℃保存(cun),但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反復(fu)凍(dong)融(rong).
7. 不(bu)能檢測(ce)含(han)NaN3的(de)樣(yang)品,因(yin)NaN3抑(yi)制(zhi)辣根(gen)過(guo)氧(yang)化物酶的(de)(HRP)活性。
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