豬巨(ju)噬(shi)細胞(bao)炎(yan)性(xing)蛋(dan)白(bai)1βelisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)操作步驟(zhou)

豬巨(ju)噬(shi)細胞(bao)炎(yan)性(xing)蛋(dan)白(bai)1βelisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)操作步驟(zhou)：

1. 標準(zhun)品(pin)的稀(xi)釋(shi)與(yu)加(jia)樣：在酶(mei)標包被板(ban)上(shang)設(she)標準(zhun)品(pin)孔(kong)10孔(kong)，在di壹、第(di)二(er)孔(kong)中分(fen)別(bie)加(jia)標準(zhun)品(pin)100μl，然(ran)後(hou)在di壹、第(di)二(er)孔(kong)中加(jia)標準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)液50μl，混勻(yun)；然(ran)後(hou)從(cong)di壹孔(kong)、第二(er)孔(kong)中各(ge)取(qu)100μl分(fen)別(bie)加(jia)到第(di)三孔(kong)和(he)第四孔(kong)，再在第三(san)、第(di)四孔(kong)分別(bie)加(jia)標準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)液50μl，混勻(yun)；然(ran)後(hou)在第三(san)孔(kong)和(he)第四孔(kong)中先(xian)各(ge)取(qu)50μl棄(qi)掉(diao)，再各(ge)取(qu)50μl分(fen)別(bie)取(qu)50μl分(fen)別(bie)加(jia)到第(di)七(qi)、第八孔(kong)中，再在第七(qi)、第八孔(kong)中分(fen)別(bie)加(jia)標準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)液50μl，混勻(yun)後(hou)從(cong)第七(qi)、第八孔(kong)中加(jia)到第(di)五(wu)、第(di)六孔(kong)中，再在第五(wu)、第(di)六孔(kong)中分(fen)別(bie)加(jia)標準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)液50ul，混勻(yun)；混勻(yun)後(hou)從(cong)第五(wu)、第(di)六孔(kong)中各(ge)分別(bie)取(qu)50μl加(jia)到第(di)九(jiu)、第(di)十(shi)孔(kong)中，再在第九(jiu)第(di)十(shi)孔(kong)分別(bie)加(jia)標準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)液50μl，混勻(yun)後(hou)從(cong)第九(jiu)第(di)十(shi)孔(kong)中各(ge)取(qu)50μl棄(qi)掉(diao)。（稀(xi)釋(shi)後(hou)各(ge)孔(kong)加(jia)樣量(liang)都為50μl，濃度分別(bie)為(wei)180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加(jia)樣：分(fen)別(bie)設(she)空白孔(kong)（空白對(dui)照(zhao)孔(kong)不(bu)加(jia)樣品(pin)及(ji)酶(mei)標試(shi)劑，其余(yu)各(ge)步操作相同）、待(dai)測(ce)樣品(pin)孔(kong)。在酶(mei)標包被板(ban)上(shang)待(dai)測(ce)樣品(pin)孔(kong)中先(xian)加(jia)樣品(pin)稀(xi)釋(shi)液40μl，然(ran)後(hou)再加(jia)待測(ce)樣品(pin)10μl（樣品最終稀(xi)釋(shi)度為(wei)5倍(bei)）。加(jia)樣將(jiang)樣品(pin)加(jia)於酶(mei)標板(ban)孔(kong)底部(bu)，盡量(liang)不(bu)觸及(ji)孔(kong)壁，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混勻(yun)。

3. 溫育(yu)：用封(feng)板(ban)膜封(feng)板(ban)後(hou)置37℃溫(wen)育(yu)30分鐘(zhong)。

4. 配液(ye)：將(jiang)30（48T的20倍(bei)）倍濃縮(suo)洗滌(di)液用蒸(zheng)餾水30（48T的20倍）倍稀(xi)釋(shi)後(hou)備(bei)用。

5. 洗滌(di)：小心揭(jie)掉封(feng)板(ban)膜，棄(qi)去液(ye)體，甩(shuai)幹(gan)，每孔(kong)加(jia)滿洗滌(di)液，靜(jing)置30秒(miao)後(hou)棄(qi)去，如(ru)此重(zhong)復(fu)5次(ci)，拍(pai)幹(gan)。

6. 加(jia)酶(mei)：每孔(kong)加(jia)入酶(mei)標試(shi)劑50μl，空白孔(kong)除外(wai)。

7. 溫(wen)育(yu)：操作同3。

8. 洗滌(di)：操作同5。

9. 顯色(se)：每(mei)孔(kong)先(xian)加(jia)入顯色(se)劑(ji)A50μl，再加(jia)入顯色(se)劑(ji)B50μl，輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩(dang)混勻(yun)，37℃避光(guang)顯色(se)15分(fen)鐘(zhong).

10. 終止(zhi)：每(mei)孔(kong)加(jia)終止(zhi)液(ye)50μl，終止(zhi)反(fan)應（此時藍(lan)色立(li)轉(zhuan)黃色）。

11. 測(ce)定(ding)：以空白空調(tiao)零，450nm波長(chang)依序測(ce)量各(ge)孔(kong)的吸(xi)光(guang)度（OD值）。 測(ce)定(ding)應在加(jia)終止(zhi)液(ye)後(hou)15分(fen)鐘。

木材(cai)DNAout（見關聯(lian)產品(pin)）

壹(yi)管(guan)式(shi)植物DNAout

壹管式植(zhi)物DNAout（500次(ci)）

植(zhi)物DNAout

中草藥(yao)DNAout（20次(ci)）

柱(zhu)式醬(jiang)油DNAout（見關聯(lian)產品(pin)）

柱(zhu)式(shi)植(zhi)物DNAout

柱式植物油DNAout

真菌DNA提取(qu)

Southern級真菌DNAout（見關聯(lian)產品(pin)）

百(bai)萬(wan)堿(jian)基(ji)級真菌DNAout（見關聯(lian)產品(pin)）

玻(bo)璃(li)珠法柱(zhu)式(shi)酵母DNAout

玻璃珠法柱(zhu)式(shi)真菌DNAout

大提(ti)柱式(shi)酵母DNAout（見關聯(lian)產品(pin)）

大(da)提(ti)柱(zhu)式真菌DNAout

酵母DNAout（見關聯(lian)產品(pin)）

溶(rong)壁(bi)酶(mei)（破壁(bi)酶(mei)）幹(gan)粉(fen)

蝸(wo)牛(niu)酶(mei)幹(gan)粉(fen)

消解(jie)酶(mei)（溶細胞(bao)酶(mei)）幹(gan)粉(fen)

真菌DNAout

柱式(shi)真菌DNAout

細胞(bao)器(qi)DNA提(ti)取(qu)

絲(si)狀(zhuang)真菌線粒體DNAout