家(jia)蠶(can)卵(luan)黃蛋白(LT)ELISA定(ding)量檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)​樣本(ben)處(chu)理及要求

家(jia)蠶(can)卵(luan)黃蛋白(LT)ELISA定(ding)量檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)樣本(ben)處(chu)理及要求：

1. 血清：室(shi)溫血液自(zi)然(ran)凝固10-20分鐘，離心(xin)20分鐘左右（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔(zai)細(xi)收(shou)集上(shang)清，保(bao)存過程中(zhong)如出(chu)現(xian)沈澱(dian)，應再次離心(xin)。

2. 血漿：應(ying)根據(ju)標本(ben)的(de)要求(qiu)選(xuan)擇(ze)EDTA或(huo)檸檬酸(suan)鈉作為(wei)抗(kang)凝劑(ji)，混(hun)合10-20分(fen)鐘後，離心(xin)20分鐘左右（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔(zai)細(xi)收(shou)集上(shang)清，保(bao)存過程中(zhong)如有沈(chen)澱形(xing)成，應該(gai)再(zai)次離心(xin)。

3. 尿液：用無菌(jun)管收集，離心(xin)20分鐘左右（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔(zai)細(xi)收(shou)集上(shang)清，保(bao)存過程中(zhong)如有沈(chen)澱形(xing)成，應再(zai)次(ci)離心(xin)。胸腹水、腦脊液參(can)照實(shi)行(xing)。

4. 細(xi)胞培(pei)養(yang)上(shang)清：檢(jian)測分(fen)泌(mi)性(xing)的(de)成份(fen)時(shi)，用(yong)無菌(jun)管收集。離心(xin)20分鐘左右（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔(zai)細(xi)收(shou)集上(shang)清。檢(jian)測細(xi)胞內的(de)成份(fen)時(shi)，用(yong)PBS（PH7.2-7.4）稀釋(shi)細(xi)胞懸液，細(xi)胞濃(nong)度(du)達到

100萬(wan)/ml左右。通(tong)過反(fan)復(fu)凍(dong)融，以使細(xi)胞破(po)壞(huai)並(bing)放出(chu)細(xi)胞內成(cheng)份。離心(xin)20分鐘左右（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔(zai)細(xi)收(shou)集上(shang)清。保(bao)存過程中(zhong)如有沈(chen)澱形(xing)成，應再(zai)次(ci)離心(xin)。

5. 組織(zhi)標本(ben)：切(qie)割標本(ben)後，稱(cheng)取(qu)重(zhong)量。加入壹(yi)定(ding)量(liang)的(de)PBS，PH7.4。用液氮迅(xun)速(su)冷凍(dong)保存備(bei)用。標本(ben)融化(hua)後仍然保持(chi)2-8℃的(de)溫度(du)。加(jia)入壹(yi)定(ding)量(liang)的(de)PBS（PH7.4），用手(shou)工(gong)或(huo)勻(yun)漿(jiang)器將標本(ben)勻(yun)漿(jiang)充(chong)分(fen)。離心(xin)20分鐘左右（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔(zai)細(xi)收(shou)集上(shang)清。分(fen)裝(zhuang)後壹(yi)份(fen)待(dai)檢(jian)測，其余冷凍(dong)備(bei)用。

6. 標本(ben)采集後盡(jin)早進(jin)行(xing)提取(qu)，提取(qu)按相(xiang)關文獻進(jin)行(xing)，提取(qu)後應(ying)盡(jin)快進(jin)行(xing)實(shi)驗(yan)。若(ruo)不能馬(ma)上(shang)進(jin)行(xing)試驗(yan)，可將標本(ben)放於(yu)-20℃保(bao)存，但(dan)應避免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融.

7. 不能檢(jian)測含(han)NaN3的(de)樣品(pin)，因(yin)NaN3抑(yi)制(zhi)辣(la)根(gen)過氧化(hua)物酶(mei)的(de)（HRP）活(huo)性(xing)。