小(xiao)鼠(shu)組(zu)蛋(dan)白H2b酶聯免(mian)疫(yi)分析(xi)試劑盒雙抗體夾心法(檢(jian)測未(wei)知抗原(yuan))

小(xiao)鼠(shu)組(zu)蛋(dan)白H2b（histon-H2b）酶聯免(mian)疫(yi)分析(xi)試劑盒雙抗體夾心法(檢(jian)測未(wei)知抗原(yuan))：

1、用緩(huan)沖(chong)液將抗體稀釋(shi)至(zhi)1-10ug/ml。在反應孔中加(jia)0.1ml，4℃ 過夜。次(ci)日(ri)，棄(qi)去孔(kong)內(nei)溶(rong)液，用洗(xi)滌緩(huan)沖(chong)液洗3次(ci)。

2、加(jia)樣(yang)：加(jia)壹(yi)定(ding)稀釋(shi)的(de)待檢(jian)樣(yang)品(pin)0.05ml於(yu)上(shang)述(shu)已包(bao)被(bei)之反應孔中，置37℃ 孵育(yu)1小(xiao)時。然後(hou)洗(xi)滌(同(tong)時做空白孔(kong)，陰性對照孔及陽(yang)性對照孔)。

3、加(jia)酶標抗體：於各(ge)反應孔中，加(jia)入新鮮稀釋(shi)的(de)酶標抗體(經(jing)滴定(ding)後(hou)的稀釋(shi)度(du))0.05ml。37℃ 孵育(yu)0.5～1小(xiao)時，洗滌。

4、加(jia)底物(wu)液顯(xian)色(se)：於各(ge)反應孔中加(jia)入臨時配制(zhi)的(de)TMB底物(wu)溶(rong)液0.1ml，37℃ 10～30分鐘(zhong)。

5、終止反應：於各(ge)反應孔中加(jia)入2M硫酸0.05ml

6、結果(guo)判定：可(ke)於(yu)白色(se)背景上(shang)，直接(jie)用(yong)肉眼(yan)觀察(cha)結果(guo)：反應孔內(nei)顏(yan)色(se)越(yue)深，陽(yang)性程度越(yue)強，陰性反應為(wei)無(wu)色(se)或極淺，依據所(suo)呈顏(yan)色(se)的深淺(qian)，以“+"、“-"號表(biao)示(shi)。也(ye)可(ke)測(ce)OD值：在ELISA檢(jian)測儀(yi)上(shang)，於(yu)450nm(若(ruo)以ABTS顯(xian)色(se)，則410nm)處(chu)，以空白對照孔調零(ling)後(hou)測(ce)各(ge)孔(kong)OD值，若(ruo)大於(yu)規定的(de)陰性對照OD值的(de)2.1倍，即(ji)為(wei)陽(yang)性。