拉(la)沙熱病(bing)毒(du)PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒​反應(ying)特點

拉(la)沙(sha)熱病(bing)毒(du)PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒反應(ying)特點:

() 特(te)異(yi)性強(qiang)

PCR反應(ying)的(de)特異(yi)性決定因素為：

①引(yin)物與模板(ban)DNA特異(yi)正確的(de)結(jie)合；

②堿(jian)基配對原則(ze)；

③Taq DNA聚(ju)合酶合(he)成(cheng)反(fan)應(ying)的(de)忠實(shi)性；

④靶基因的(de)特異(yi)性與保(bao)守性。

其中(zhong)引(yin)物與模板(ban)的(de)正確(que)結(jie)合是(shi)關鍵(jian)。引(yin)物與模板(ban)的(de)結(jie)合及引(yin)物鏈(lian)的(de)延(yan)伸是遵(zun)循堿(jian)基配對原則(ze)的(de)。聚(ju)合酶合(he)成(cheng)反(fan)應(ying)的(de)忠實(shi)性及Taq DNA聚(ju)合酶耐(nai)高(gao)溫性，使(shi)反應(ying)中模板(ban)與引(yin)物的(de)結(jie)合(復(fu)性)可(ke)以(yi)在較高(gao)的(de)溫度下進(jin)行，結(jie)合的(de)特異(yi)性大大增(zeng)加(jia)，被(bei)擴增(zeng)的(de)靶基因片段也(ye)就能保(bao)持(chi)很(hen)高(gao)的(de)正確(que)度。再(zai)通過選擇特(te)異(yi)性和保(bao)守性高(gao)的(de)靶基因區，其(qi)特(te)異(yi)性程度就更(geng)高(gao)。

(2) 靈(ling)敏度高(gao)

PCR產(chan)物的(de)生成(cheng)量(liang)是(shi)以(yi)指(zhi)數(shu)方(fang)式(shi)增(zeng)加(jia)的(de)，能將皮(pi)克(pg=0-2g)量(liang)級(ji)的(de)起始待(dai)測(ce)模板(ban)擴增(zeng)到(dao)微克(ug=0-6g)水(shui)平(ping)。能從00萬個(ge)細胞(bao)中檢(jian)出(chu)壹(yi)個(ge)靶細胞(bao)；在病(bing)毒(du)的(de)檢測(ce)中，PCR的(de)靈(ling)敏度可(ke)達(da)3個(ge)RFU(空斑(ban)形(xing)成(cheng)單(dan)位(wei))；在細(xi)菌(jun)學中(zhong)zui小檢出(chu)率(lv)為(wei)3個(ge)細菌(jun)。

(3) 簡便(bian)、快(kuai)速(su)

PCR反應(ying)用(yong)耐高(gao)溫的(de)Taq DNA聚(ju)合酶，壹(yi)次(ci)性地將反(fan)應(ying)液加好後(hou)，即在DNA擴增(zeng)液(ye)和(he)水(shui)浴(yu)鍋(guo)上進(jin)行變(bian)性-退火(huo)-延(yan)伸反應(ying)，壹(yi)般在2～4 小(xiao)時(shi)完(wan)成(cheng)擴增(zeng)反(fan)應(ying)。擴增(zeng)產(chan)物壹(yi)般用(yong)電泳(yong)分析(xi)，不壹(yi)定要(yao)用(yong)同位(wei)素，無放(fang)射(she)性汙染、易推(tui)廣。

(4) 對(dui)標(biao)本的(de)純度要(yao)求(qiu)低

不需(xu)要(yao)分(fen)離病(bing)毒(du)或(huo)細(xi)菌(jun)及培養(yang)細(xi)胞(bao)，DNA 粗(cu)制品及總(zong)RNA均(jun)可(ke)作(zuo)為擴增(zeng)模板(ban)。可(ke)直(zhi)接用(yong)臨(lin)床標(biao)本如(ru)血(xue)液、體腔液(ye)、洗(xi)嗽液、毛發、細(xi)胞(bao)、活PCR技術(shu)概論。