單(dan)純(chun)皰(pao)疹(zhen)病(bing)毒1型探針法熒(ying)光(guang)PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)操作步(bu)驟(zhou)

單純(chun)皰(pao)疹(zhen)病(bing)毒1型（HSV-1）探針法熒(ying)光(guang)PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)操作，需細致遵(zun)循(xun)以(yi)下步(bu)驟(zhou)以(yi)確保(bao)結(jie)果(guo)的(de)準確性(xing)：

樣本處(chu)理與(yu)核(he)酸(suan)提取

將(jiang)采(cai)集(ji)到(dao)的(de)樣本（如(ru)咽(yan)拭子、腦(nao)脊液(ye)或組(zu)織樣本）按(an)說明(ming)書(shu)要求(qiu)進(jin)行(xing)處(chu)理，去(qu)除(chu)雜質及(ji)非(fei)核(he)酸(suan)成分(fen)。使(shi)用配套的(de)核(he)酸(suan)提取試(shi)劑(ji)盒(he)，依(yi)據廠家提(ti)供的(de)指南(nan)進(jin)行核(he)酸(suan)提取。此(ci)步(bu)驟(zhou)需在(zai)生(sheng)物安(an)全櫃中(zhong)操作，以(yi)防交叉(cha)汙(wu)染。

配置(zhi)反(fan)應體(ti)系

取出PCR反(fan)應管(guan)，根(gen)據樣本數(shu)量準(zhun)備(bei)足(zu)夠的(de)反(fan)應體(ti)系。將(jiang)提(ti)取的(de)核(he)酸(suan)樣本、探(tan)針混(hun)合(he)物、酶混(hun)合(he)物及(ji)反(fan)應緩(huan)沖(chong)液按(an)比例(li)加入PCR反(fan)應管(guan)中(zhong)，輕輕(qing)混(hun)勻，避(bi)免產(chan)生(sheng)氣泡(pao)。註意每(mei)個樣本應設(she)置(zhi)至少壹(yi)個陰(yin)性對照和(he)壹(yi)個陽(yang)性(xing)對照，以(yi)監(jian)控實驗過(guo)程的(de)有效(xiao)性。

PCR擴增與熒(ying)光(guang)檢(jian)測(ce)

將(jiang)配置(zhi)好(hao)的(de)PCR反(fan)應管(guan)放(fang)入(ru)熒(ying)光(guang)PCR儀(yi)中(zhong)，根(gen)據試(shi)劑(ji)盒(he)推薦的(de)擴增程序(xu)設(she)定儀(yi)器(qi)參(can)數(shu)，包(bao)括(kuo)預變性、循(xun)環(huan)擴(kuo)增及(ji)最(zui)終(zhong)延伸(shen)等(deng)階(jie)段。儀(yi)器(qi)將(jiang)自(zi)動(dong)進行(xing)PCR擴(kuo)增，並在(zai)每(mei)個循(xun)環(huan)中(zhong)檢(jian)測(ce)特定波長(chang)下的(de)熒(ying)光(guang)信(xin)號(hao)，從而(er)判(pan)斷(duan)HSV-1 DNA的(de)存在(zai)與(yu)否(fou)。

結(jie)果(guo)分(fen)析(xi)與報(bao)告(gao)

PCR擴(kuo)增結(jie)束後，儀(yi)器(qi)軟(ruan)件將(jiang)自(zi)動(dong)分(fen)析(xi)熒(ying)光(guang)曲(qu)線，根據設定(ding)的(de)閾(yu)值判(pan)斷(duan)樣本是(shi)否(fou)為(wei)HSV-1陽性(xing)。結(jie)果(guo)應結(jie)合(he)陰(yin)性對照和(he)陽(yang)性(xing)對照的(de)表現進行解讀，確保(bao)實驗結(jie)果(guo)的(de)可靠性。最後，將(jiang)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)準(zhun)確記(ji)錄(lu)並報(bao)告(gao)給(gei)臨(lin)床(chuang)醫(yi)生(sheng)，以便其作出相(xiang)應的(de)診(zhen)斷(duan)和治(zhi)療(liao)決(jue)策(ce)。