ELISA，即酶(mei)聯(lian)免(mian)疫(yi)吸附(fu)測(ce)定(ding)（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay），它(ta)的(de)核心原(yuan)理(li)基於抗(kang)原(yuan)與(yu)抗(kang)體(ti)之間的(de)特異性(xing)結合(he)反(fan)應。抗(kang)原(yuan)是能(neng)夠(gou)刺激機體(ti)產(chan)生(sheng)免(mian)疫(yi)應(ying)答(da)，並(bing)能(neng)與(yu)免(mian)疫(yi)應(ying)答(da)產(chan)物(wu)抗體和(he)致(zhi)敏淋巴(ba)細胞(bao)在(zai)體(ti)內外結合(he)，發(fa)生免(mian)疫(yi)效應（特異性(xing)反(fan)應）的(de)物質(zhi)；抗體則(ze)是機(ji)體(ti)在(zai)抗(kang)原(yuan)刺(ci)激下，由(you)B淋(lin)巴(ba)細胞(bao)或(huo)記憶(yi)細(xi)胞(bao)增(zeng)殖分(fen)化成的(de)漿(jiang)細胞(bao)所產(chan)生(sheng)的、可與(yu)相應抗原(yuan)發(fa)生特(te)異性(xing)結合(he)的免(mian)疫(yi)球蛋白(bai)。這(zhe)種(zhong)特(te)異(yi)性(xing)結合(he)就像(xiang)壹(yi)把鑰(yao)匙(chi)開壹把鎖，具有(you)較(jiao)高的(de)精準(zhun)度。
ELISA試(shi)劑盒(he)的(de)檢測過(guo)程(cheng)通常包含以(yi)下(xia)幾個(ge)關鍵(jian)步(bu)驟(zhou)。首(shou)先(xian)是包被，將(jiang)已(yi)知(zhi)的抗(kang)原(yuan)或(huo)抗體(ti)固(gu)定(ding)在(zai)固(gu)相載(zai)體表面(mian)，常用(yong)的(de)固(gu)相載(zai)體有(you)聚苯乙烯(xi)微(wei)量(liang)反(fan)應板(ban)。這(zhe)壹(yi)步(bu)就像(xiang)是給目(mu)標(biao)物質搭(da)建了(le)壹(yi)個(ge)“專(zhuan)屬座位”，使其能(neng)夠(gou)穩(wen)定(ding)地附(fu)著(zhe)在(zai)載(zai)體上，等(deng)待後(hou)續(xu)的(de)反(fan)應。
接(jie)著(zhe)是加樣(yang)，將(jiang)待(dai)測(ce)樣(yang)本(ben)加入(ru)到包被有(you)抗(kang)原(yuan)或(huo)抗體(ti)的(de)反(fan)應孔中。如(ru)果(guo)樣(yang)本(ben)中(zhong)含有與(yu)包被抗(kang)原(yuan)或(huo)抗體(ti)相對應的(de)物(wu)質，它(ta)們(men)就會發(fa)生特(te)異性(xing)結合(he)，形成抗(kang)原(yuan)-抗(kang)體(ti)復(fu)合(he)物。這(zhe)壹(yi)過(guo)程(cheng)是ELISA檢測的關鍵(jian)環節(jie)，特異(yi)性結合(he)保證了(le)檢測結果的(de)準(zhun)確(que)性，避免(mian)了(le)其(qi)他(ta)物(wu)質的幹擾。
然後(hou)是加酶(mei)標(biao)記抗(kang)體(ti)或(huo)抗原(yuan)。酶(mei)標(biao)記是壹(yi)種(zhong)將(jiang)酶(mei)與(yu)抗體(ti)或(huo)抗原(yuan)結合(he)的技(ji)術，常用(yong)的(de)酶(mei)有(you)辣根(gen)過(guo)氧(yang)化(hua)物酶(mei)（HRP）和(he)堿(jian)性(xing)磷(lin)酸(suan)酶（ALP）。酶標記的(de)抗(kang)體(ti)或(huo)抗原(yuan)能(neng)夠(gou)與(yu)已(yi)經形成的(de)抗原(yuan)-抗(kang)體(ti)復(fu)合(he)物進壹(yi)步(bu)結合(he)，這(zhe)樣(yang)就(jiu)將(jiang)酶(mei)引入(ru)到了(le)反(fan)應體(ti)系中(zhong)。
之後(hou)是顯色反(fan)應。加入(ru)酶的(de)底物(wu)後(hou)，酶會(hui)催(cui)化底(di)物發(fa)生化(hua)學反(fan)應，產(chan)生(sheng)可檢測的信號，通常是顏(yan)色變(bian)化(hua)。顏(yan)色變(bian)化(hua)的(de)深淺(qian)與樣(yang)本(ben)中(zhong)目(mu)標(biao)物質的含量(liang)成正(zheng)比，通(tong)過(guo)酶(mei)標儀等(deng)儀器(qi)測(ce)量(liang)吸光(guang)度(du)值(zhi)，就可(ke)以(yi)定(ding)量(liang)分析樣(yang)本(ben)中(zhong)目(mu)標(biao)物質的濃(nong)度。
最後(hou)是結果判(pan)定(ding)。根(gen)據標(biao)準(zhun)曲(qu)線，將(jiang)測(ce)得(de)的(de)吸光(guang)度(du)值(zhi)轉換(huan)為相應的目(mu)標(biao)物質(zhi)含量(liang)，從(cong)而(er)得(de)出(chu)檢測結果。
ELISA試(shi)劑盒(he)憑(ping)借(jie)其(qi)靈(ling)敏度高(gao)、特(te)異性強(qiang)、操作(zuo)簡(jian)便等(deng)優點，在(zai)生(sheng)物(wu)檢測領(ling)域(yu)發(fa)揮著(zhe)不(bu)可替代(dai)的作(zuo)用(yong)。從(cong)疾(ji)病的(de)早期(qi)診斷(duan)到藥物(wu)研(yan)發(fa)中的(de)生物(wu)標誌物檢測，從(cong)食品(pin)安全中(zhong)的(de)有害物質(zhi)篩查(zha)到環境(jing)監(jian)測(ce)中(zhong)的(de)汙染物分析，ELISA試(shi)劑盒(he)都(dou)為我(wo)們(men)提供了(le)有(you)力(li)的技術支持，幫(bang)助我(wo)們更好地了(le)解(jie)生命科學和(he)保(bao)障(zhang)人類(lei)健(jian)康。
掃碼加微(wei)信
移動端(duan)瀏(liu)覽