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大鼠(shu)白(bai)介(jie)素6elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒樣本處理(li)及(ji)要(yao)求(qiu):
1. 血清:室(shi)溫(wen)血(xue)液自然(ran)凝(ning)固10-20分鐘(zhong),離(li)心20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細(xi)收集(ji)上清,保存(cun)過(guo)程(cheng)中(zhong)如出(chu)現(xian)沈澱(dian),應再(zai)次(ci)離(li)心(xin)。
2. 血漿:應根(gen)據標本的(de)要(yao)求(qiu)選擇(ze)EDTA或檸(ning)檬酸鈉(na)作(zuo)為抗凝(ning)劑,混合(he)10-20分鐘(zhong)後,離(li)心20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細(xi)收集(ji)上清,保存(cun)過(guo)程(cheng)中(zhong)如有沈澱(dian)形(xing)成(cheng),應該(gai)再(zai)次(ci)離(li)心(xin)。
3. 尿(niao)液:用無菌管收集(ji),離心(xin)20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細(xi)收集(ji)上清,保存(cun)過(guo)程(cheng)中(zhong)如有沈澱(dian)形(xing)成(cheng),應再(zai)次(ci)離(li)心(xin)。胸腹水(shui)、腦(nao)脊液參照實行。
4. 細胞(bao)培(pei)養上(shang)清:檢(jian)測(ce)分泌(mi)性的(de)成份(fen)時,用無菌管收集(ji)。離心(xin)20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細(xi)收集(ji)上清。檢(jian)測(ce)細胞(bao)內的(de)成份(fen)時,用PBS(PH7.2-7.4)稀(xi)釋(shi)細胞(bao)懸(xuan)液,細(xi)胞(bao)濃(nong)度達(da)到(dao)
100萬/ml左右。通(tong)過反復凍(dong)融,以(yi)使細(xi)胞(bao)破(po)壞並(bing)放(fang)出(chu)細(xi)胞(bao)內成(cheng)份(fen)。離(li)心20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細(xi)收集(ji)上清。保存(cun)過(guo)程(cheng)中(zhong)如有沈澱(dian)形(xing)成(cheng),應再(zai)次(ci)離(li)心(xin)。
5. 組織標本:切割標本後,稱(cheng)取(qu)重量。加入(ru)壹(yi)定(ding)量的(de)PBS,PH7.4。用液氮(dan)迅速冷(leng)凍(dong)保存(cun)備(bei)用。標本融化後仍然(ran)保持2-8℃的(de)溫(wen)度。加(jia)入(ru)壹(yi)定(ding)量的(de)PBS(PH7.4),用手(shou)工或勻漿器將(jiang)標本勻漿充(chong)分。離(li)心(xin)20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細(xi)收集(ji)上清。分裝(zhuang)後壹(yi)份(fen)待(dai)檢測(ce),其(qi)余(yu)冷(leng)凍(dong)備(bei)用。
6. 標本采(cai)集後盡(jin)早進行提取(qu),提取(qu)按相(xiang)關(guan)文(wen)獻(xian)進行(xing),提取(qu)後應盡(jin)快(kuai)進(jin)行實驗。若(ruo)不(bu)能馬上(shang)進(jin)行試(shi)驗,可將標本放於-20℃保存(cun),但(dan)應避(bi)免(mian)反復凍(dong)融.
7. 不(bu)能檢測(ce)含NaN3的(de)樣品(pin),因(yin)NaN3抑制(zhi)辣(la)根(gen)過氧(yang)化物酶的(de)(HRP)活性。
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