大鼠嗜(shi)酸粒(li)細(xi)胞趨(qu)化因(yin)子elisa檢測試劑盒樣(yang)本處(chu)理(li)及(ji)要求(qiu)

大鼠嗜(shi)酸粒(li)細(xi)胞趨(qu)化因(yin)子elisa檢測試劑盒樣(yang)本處(chu)理(li)及(ji)要求(qiu)：

1. 血清(qing)：室(shi)溫(wen)血液(ye)自(zi)然凝固10-20分鐘，離(li)心(xin)20分鐘左右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔細(xi)收(shou)集上(shang)清(qing)，保(bao)存過(guo)程中如出現沈(chen)澱(dian)，應再(zai)次(ci)離(li)心(xin)。

2. 血漿：應根(gen)據標(biao)本的(de)要求(qiu)選擇(ze)EDTA或(huo)檸檬酸(suan)鈉(na)作(zuo)為抗(kang)凝劑，混(hun)合10-20分鐘後(hou)，離(li)心(xin)20分鐘左右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔細(xi)收(shou)集上(shang)清(qing)，保(bao)存過(guo)程中如有沈(chen)澱(dian)形成，應該(gai)再(zai)次(ci)離(li)心(xin)。

3. 尿液(ye)：用(yong)無(wu)菌(jun)管(guan)收(shou)集，離(li)心(xin)20分鐘左右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔細(xi)收(shou)集上(shang)清(qing)，保(bao)存過(guo)程中如有沈(chen)澱(dian)形成，應再(zai)次(ci)離(li)心(xin)。胸(xiong)腹(fu)水、腦脊液(ye)參(can)照實(shi)行。

4. 細胞(bao)培(pei)養上清(qing)：檢測分泌性的(de)成份(fen)時，用(yong)無(wu)菌(jun)管收(shou)集。離(li)心(xin)20分鐘左右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔細(xi)收(shou)集上(shang)清(qing)。檢測細(xi)胞(bao)內(nei)的(de)成份(fen)時，用(yong)PBS（PH7.2-7.4）稀釋(shi)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，細(xi)胞(bao)濃度達到

100萬/ml左右(you)。通(tong)過(guo)反(fan)復(fu)凍融，以使(shi)細(xi)胞(bao)破壞並放(fang)出細(xi)胞內(nei)成份(fen)。離(li)心(xin)20分鐘左右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔細(xi)收(shou)集上(shang)清(qing)。保(bao)存過(guo)程中如有沈(chen)澱(dian)形成，應再(zai)次(ci)離(li)心(xin)。

5. 組織(zhi)標(biao)本：切割(ge)標(biao)本後(hou)，稱取(qu)重(zhong)量。加(jia)入(ru)壹(yi)定量的(de)PBS，PH7.4。用液(ye)氮(dan)迅速(su)冷(leng)凍保(bao)存備(bei)用。標(biao)本融化(hua)後(hou)仍(reng)然保(bao)持2-8℃的(de)溫度。加(jia)入(ru)壹(yi)定量的(de)PBS（PH7.4），用手工或(huo)勻(yun)漿器將標(biao)本勻(yun)漿充分。離(li)心(xin)20分鐘左右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔細(xi)收(shou)集上(shang)清(qing)。分裝後(hou)壹份(fen)待檢測，其(qi)余冷凍備用(yong)。

6. 標(biao)本采集後(hou)盡(jin)早(zao)進(jin)行提取(qu)，提(ti)取(qu)按相關(guan)文(wen)獻(xian)進(jin)行，提取(qu)後(hou)應盡(jin)快(kuai)進(jin)行實(shi)驗(yan)。若不(bu)能(neng)馬(ma)上進(jin)行試驗(yan)，可將(jiang)標(biao)本放(fang)於(yu)-20℃保(bao)存，但(dan)應避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍融.

7. 不(bu)能(neng)檢測含(han)NaN3的(de)樣品(pin)，因NaN3抑(yi)制辣根過(guo)氧(yang)化物(wu)酶的(de)（HRP）活性(xing)。