庫(ku)蚊通(tong)用探(tan)針(zhen)法(fa)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR試(shi)劑(ji)盒(he)實驗(yan)註意(yi)事(shi)項(xiang):
1)RT-PCR可以檢測組(zu)織、細(xi)胞(bao)、血(xue)液、細(xi)菌(jun)等很多(duo)材料(liao),不(bu)同(tong)的(de)樣本(ben)有(you)不同(tong)要(yao)求,實(shi)驗(yan)前請充分溝(gou)通(tong)確(que)認(ren)實驗方(fang)案和(he)樣本(ben)情(qing)況(kuang);
2)客戶(hu)盡可能(neng)提(ti)供實驗的(de)背景(jing)信(xin)息、物(wu)種(zhong)、基因準(zhun)確(que)的(de)名稱(cheng)和(he)ID號;
3)客戶(hu)盡量不要提(ti)供DNA或RNA樣品(pin)。
4)樣本(ben)保(bao)存於(yu)液氮(dan)或幹(gan)冰,也(ye)可(ke)以保存於Trizol液中。
實時(shi)熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是(shi)指(zhi)在PCR反(fan)應體(ti)系(xi)中加入(ru)熒光(guang)基團,利用熒光(guang)信(xin)號積(ji)累實(shi)時(shi)監測整個PCR進程,*通(tong)過(guo)標準(zhun)曲(qu)線對(dui)未知(zhi)模板進行定(ding)量(liang)分析(xi)的(de)方(fang)法。實(shi)時(shi)熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR的(de)化(hua)學原(yuan)理包括探(tan)針(zhen)類(lei)和(he)非探(tan)針(zhen)類(lei)兩(liang)類(lei),探(tan)針(zhen)類(lei)是(shi)利用與(yu)靶(ba)細(xi)胞(bao)序列特(te)異(yi)性(xing)雜(za)交的(de)探(tan)針(zhen)來(lai)指(zhi)示(shi)擴增(zeng)產物(wu)的(de)增(zeng)加,非探(tan)針(zhen)類(lei)是(shi)利用熒光(guang)染料(liao)或者(zhe)特(te)異(yi)性(xing)設(she)計(ji)的(de)引(yin)物(wu)來(lai)指(zhi)示(shi)擴增(zeng)的(de)增(zeng)加。運用該技(ji)術可以對DNA、RNA樣品(pin)進行定(ding)量(liang)(包括(kuo)*定(ding)量(liang)和(he)相(xiang)對定(ding)量(liang))和(he)定(ding)性(xing)分析(xi)。
主(zhu)要服(fu)務(wu):DNA或RNA的(de)*定(ding)量(liang)分析(xi)、基因表達差異(yi)分析(xi)、基因分型(xing)。
主(zhu)要技(ji)術:引物(wu)設(she)計(ji)、RNA提取、cDNA合(he)成、qPCR。
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