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IL-6 elisa酶聯(lian)免疫(yi)試(shi)劑盒(he)樣本處(chu)理(li)及要(yao)求:
1. 血清(qing):室溫血液(ye)自(zi)然凝(ning)固(gu)10-20分(fen)鐘,離(li)心(xin)20分(fen)鐘左(zuo)右(you)(2000-3000轉/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上(shang)清(qing),保存過程中如(ru)出現沈(chen)澱(dian),應再次(ci)離(li)心(xin)。
2. 血漿:應根據標本(ben)的要(yao)求選擇(ze)EDTA或(huo)檸檬(meng)酸鈉(na)作為抗凝劑(ji),混(hun)合10-20分(fen)鐘後,離(li)心(xin)20分(fen)鐘左(zuo)右(you)(2000-3000轉/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上(shang)清(qing),保存過程中如(ru)有(you)沈(chen)澱(dian)形(xing)成,應該再次(ci)離(li)心(xin)。
3. 尿(niao)液(ye):用(yong)無(wu)菌管(guan)收(shou)集(ji),離(li)心(xin)20分(fen)鐘左(zuo)右(you)(2000-3000轉/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上(shang)清(qing),保存過程中如(ru)有(you)沈(chen)澱(dian)形(xing)成,應再次(ci)離(li)心(xin)。胸腹(fu)水、腦(nao)脊液(ye)參照(zhao)實(shi)行。
4. 細(xi)胞培(pei)養(yang)上(shang)清:檢(jian)測(ce)分(fen)泌性的成份(fen)時,用(yong)無菌管(guan)收(shou)集(ji)。離(li)心(xin)20分(fen)鐘左(zuo)右(you)(2000-3000轉/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上(shang)清(qing)。檢測細(xi)胞內的(de)成份(fen)時,用(yong)PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xi)胞懸液,細(xi)胞濃(nong)度達到(dao)
100萬/ml左(zuo)右(you)。通過反復凍融(rong),以(yi)使(shi)細(xi)胞破(po)壞(huai)並放出細(xi)胞內成份(fen)。離(li)心(xin)20分(fen)鐘左(zuo)右(you)(2000-3000轉/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上(shang)清(qing)。保存過程中如(ru)有(you)沈(chen)澱(dian)形(xing)成,應再次(ci)離(li)心(xin)。
5. 組織(zhi)標本(ben):切(qie)割標本(ben)後,稱(cheng)取重(zhong)量。加入壹(yi)定(ding)量(liang)的(de)PBS,PH7.4。用(yong)液氮迅速(su)冷(leng)凍保存備用(yong)。標本(ben)融(rong)化(hua)後仍(reng)然保(bao)持(chi)2-8℃的溫(wen)度。加入壹(yi)定(ding)量(liang)的(de)PBS(PH7.4),用(yong)手工(gong)或(huo)勻(yun)漿器將標本(ben)勻(yun)漿充分(fen)。離(li)心(xin)20分(fen)鐘左(zuo)右(you)(2000-3000轉/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集(ji)上(shang)清(qing)。分(fen)裝後壹(yi)份(fen)待(dai)檢(jian)測(ce),其余(yu)冷凍備用(yong)。
6. 標本(ben)采集(ji)後盡(jin)早(zao)進(jin)行提取(qu),提(ti)取(qu)按(an)相關文(wen)獻(xian)進(jin)行,提取(qu)後應盡快(kuai)進(jin)行實驗。若不(bu)能馬(ma)上(shang)進(jin)行試(shi)驗,可將標本(ben)放於(yu)-20℃保(bao)存,但應避免反(fan)復凍融(rong).
7. 不(bu)能檢(jian)測(ce)含NaN3的(de)樣品,因(yin)NaN3抑(yi)制辣根過氧(yang)化(hua)物酶的(de)(HRP)活(huo)性。
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